Гдз по биологии пономарева 9: ГДЗ Биология 9 класс Пономарева, Корнилова, Чернова

Содержание

ГДЗ Пономарева 9 – Telegraph

>>> ПОДРОБНЕЕ ЖМИТЕ ЗДЕСЬ <<<

ГДЗ Пономарева 9

ложно справиться с обилием заданий здесь без использования ГДЗ или решебника Поноева 9 класс . ГДЗ по Биологии Поноева 9 класс (учебник) . Ответы на вопросы .

ГДЗ : готовые ответы по биологии за 9 класс, решебник Поноева И .Н ., Алгоритм успеха, онлайн решения на GDZ .RU .
Решебник (ГДЗ ) по Биологии за 9 (девятый ) класс авторы: Поноева, Корнилова, Чернова издательство Вентана-граф, 2019 год .

ГДЗ рабочая тетрадь по биологии 9 класс Поноева, Панина Вентана-Граф . Биология — дисциплина, которую нередко выбирают выпускники в качестве предмета по выбору на . .

Биология 9 класс . Рабочая тетрадь . Поноева, Панина , Корнилова . Для многих школьников ГДЗ по биологии 9 класс Поноева может стать настоящим помощником в процессе учебы .

Поноева : полный список заданий , параграфов, уроков и упражнений . Биология, 9 класс . ГДЗ по биологии 9 класс: И . Н . Поноева . Авторы: И . Н . Поноева, О . А . Корнилова, Н . М . .

Авторы: И . Н . Поноева , О . А . Корнилова, Н . М . Чернова . Онлайн решебник по Биологии для 9 класса И . Н . Поноева , О . А . Корнилова, Н . М . Чернова, гдз и ответы к домашнему . .

Рабочая тетрадь 9 класс» Поноева, Панина можно существенно облегчить все процессы . Помимо этого в ГДЗ по биологии 9 класс имеются примеры лабораторных работ и весьма . .

Полезные ГДЗ по биологии 9 класс И . Н . Поноева – в помощь школьнику . Ряд преимуществ делает решебники онлайн действительно эффективным средством для современного обучения .

ГДЗ . 9 класс . Биология . Поноева . Качественные решения и подробные гдз по биологии для учеников 9 класса , авторы учебника: И . Н . Поноева, О . А . Корнилова, Н . М . Чернова .

Видеоуроки, тесты и тренажёры по предмету Биология за 9 класс по учебнику Поноева И .Н . Биология 9 класс (Поноева И .Н .) Закрыть учебник .

Авторы . Борисов О . Л ., Антипенко А . А ., Рогожников О . Н . .
ГДЗ → 9 -ый класс → Биология → И .Н . Поноева, О .А . Корнилова .

И .Н . Поноева О .А . Корнилова Н .М . Чернова Биология И .Н . Поноева О .А . Корнилова Н .М .Чернова Биология 9 класс Учебник для учащихся общеобразовательных учреждений . .

Поноева И .Н . Биология: 9 класс: методич . пособие . – М .: Вентана-Граф, 2007 Дудкина О .П . Биология . Развернутое тематическое планирование по программе И .Н . Поноевой .

Рейнбоу Инглиш 3 Рабочая Тетрадь ГДЗ
ГДЗ 9 Бутузов
ГДЗ Матем 4 Класс Пнш
ГДЗ Окружающий Мир 2 Класс Стр
ГДЗ По Физике Задачник 11
ГДЗ По Английскому Биболетова 2012
Решебник По Русскому 3 Класс Репкин
ГДЗ По Геометрии 9 Клаас Атанасян
ГДЗ От Путина Русский Язык 8 Класс
ГДЗ 5 Класс Номер 22
Старлайт 10 ГДЗ Учебник
ГДЗ По Истории 6 Класс Юдовская Учебник
Учебник По Географии 9 Класс Дронов ГДЗ
ГДЗ По Русскому 1 Класс Гольфман
ГДЗ Рабочая Тетрадь 6 Класс Никольский
ГДЗ Чтение Рабочая Тетрадь 2 Часть
ГДЗ По Математик 9 Класс
ГДЗ Путина 2 Класс Ответы
ГДЗ По Русскому Языку Номер 29
ГДЗ История России Ответы На Вопросы
ГДЗ По Английскому 5 Класс Spotlight Workbook
Решебник По Англ 5 Класс Тетрадь
ГДЗ Мерзляк 5 Класс Математик
ГДЗ По Английскому 7 9
ГДЗ Англ Яз 6 Класс Афанасьева Михеева
ГДЗ По Географии 7 Класс Ким
ГДЗ Миракова 4 Класс 2 Часть
Информатика 11 Класс Учебник ГДЗ
ГДЗ По Алгебре 8 Класс Синий Учебник
ГДЗ По Английскому Языку Сборник Смирнов
ГДЗ По Русскому Языку 10 Класс Просвещение
ГДЗ По 4 Русский Рт
ГДЗ Математика 4 Класс Бука 1 Часть
ГДЗ По Алгебре 7 Класс Номер 19
ГДЗ По Русскому 8 Класс Тростенцова
ГДЗ Русский Рабочая Тетрадь 4 Класс Кузнецова
ГДЗ История Древнего Мира 5 Учебник
ГДЗ Решебник По Русскому Языку 3 Класс
ГДЗ Никольский 10 Класс
Решебник 5 Класса Математике Никольский Шевкин
Математика Учебник 2 Решебник 1 Часть
Решебник По Алгебре 7 Класс Суворова
ГДЗ Английский 9 Тетрадь Spotlight
ГДЗ По Русскому Языку Воителева Сборник Упражнений
Решебник По Физике Лабораторные Работы 11 Класс
ГДЗ По Математике 6 Класс Мерзляк Х
ГДЗ По Истории 8 Класса Чернова
ГДЗ Решебник 5 Класса Рабочая Тетрадь
ГДЗ По Литературе 4 Класс Бойкина Рт
Решебник По Истории 8 Рабочая Тетрадь

Гдз По Математике Упр

ГДЗ По Математике 6 Класс Шварцбург

ГДЗ Рабочая Тетрадь Страница 6

Гдз По Русскому Шестых Классов Баранова

ГДЗ По Русскому Языку Урок

ГДЗ по биологии для 9 класса на 5.fun

- Биология 9 класс Рабочая тетрадь
- Авторы: Т.А. Козлова, В.С. Кучменко
- Издательство: Вентана-граф 2016
- Биология 9 класс Сфера жизни
- Авторы: С.Г. Мамонтов, В.Б. Захаров, И.Б. Агафонова, Н.И. Сонин
- Издательство: Дрофа 2016
- Биология 9 класс Живой организм
- Авторы: Сапин М.Р., Сонин Н.И.
- Издательство: Дрофа 2014
- Биология 9 класс
- Авторы: В.В. Пасечник, А.А. Каменский, Е.А. Криксунов
- Издательство: Дрофа

- Биология 9 класс
- Авторы: И. Н. Пономарева, О. А. Корнилова, Н. М. Чернова
- Издательство: Вентана-граф 2016
- Биология 9 класс
- Авторы: Т. М. Ефимова, А. О. Шубин, Л. Н. Сухорукова
- Издательство: Мнемозина 2010
- Биология 9 класс Сферы
- Авторы: Л.Н. Сухорукова, В.С. Кучменко
- Издательство: Просвещение 2011
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Линия жизни
- Авторы: В.В. Пасечник, Г.Г. Швецов
- Издательство: Просвещение 2016
- Биология 9 класс
- Авторы: А.Г. Драгомилов, Р.Д. Маш
- Издательство: Вентана-граф 2015

- Биология 9 класс Рабочая тетрадь
- Авторы: Е. Н. Соломина, Т. В. Шевырева
- Издательство: Просвещение 2015
- Биология 9 класс Практические работы
- Авторы: Мащенко М.В., Борисов О.Л., Антипенко А.А.
- Издательство: Аверсэв 2015
- Биология 9 класс Линия жизни
- Авторы: Пасечник В.В., Каменский А.А., Швецов Г.Г.
- Издательство: Просвещение 2014
- Биология 9 класс Школа 2100
- Авторы: Вахрушев А.А., Бурский О.В., Раутиан А.С., Родионова Е.И.
- Издательство: Баласс 2016
- Биология 9 класс
- Авторы: Теремов А.В., Петросова Р.А., Никишов А.И.
- Издательство: Владос 2017
- Биология 9 класс Контрольно-измерительные материалы (КИМ)
- Автор: Богданов Н.А.
- Издательство: ВАКО 2017
- Биология 9 класс Тетрадь-практикум Сферы
- Авторы: Сухорукова Л.Н., Кучменко В.С., Власова Е.А.
- Издательство: Просвещение 2017
- Биология 9 класс Тетрадь-экзаменатор Сферы
- Авторы: Сухорукова Л.Н., Кучменко В.С., Власова Е.А.
- Издательство: Просвещение 2017
- Биология 9 класс Тетрадь-тренажёр Сферы
- Авторы: Сухорукова Л.Н., Кучменко В.С., Матюшенко Е.Е.
- Издательство: Просвещение 2016

- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Алгоритм успеха
- Авторы: Пономарева И.Н., Панина Г.Н., Корнилова О.А.
- Издательство: Вентана-граф 2018
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Алгоритм успеха
- Авторы: Маш Р.Д., Драгомилов А.Г.
- Издательство: Вентана-граф 2016
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Алгоритм успеха
- Автор: Сухова Т.С.
- Издательство: Вентана-граф 2016
- Биология 9 класс Тетрадь для лабораторных и практических работ Живой организм
- Авторы: Сысолятина Н.Б., Сычева Л.В., Сонин Н.И.
- Издательство: Дрофа 2017
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь
- Авторы: Пасечник В.В., Швецов Г.Г.
- Издательство: Дрофа 2019
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Сфера жизни
- Авторы: Цибулевский А.Ю., Захаров В.Б., Сонин Н.И.
- Издательство: Дрофа 2015-2017
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь Живой организм
- Авторы: Н.И. Сонин, И.Б. Агафонова
- Издательство: Дрофа 2019
- Биология 9 класс Живая природа
- Авторы: Сухова Т.С., Сарычева Н.Ю., Шаталова С.П.
- Издательство: Вентана-граф 2019
- Биология 9 класс Лабораторные работы
- Автор: Амахина Ю.В.
- Издательство: Русское слово 2019

- Биология 9 класс
- Авторы: Данилов С.Б., Романова Н.И., Владимирская А.И.
- Издательство: Русское слово 2019
- Биология 9 класс Лабораторные и практические работы
- Автор: Лисов Н.Д.
- Издательство: Аверсэв 2015
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь
- Авторы: Никишов А.И., Богданов Н.А.
- Издательство: Владос 2014
- Биология 9 класс
- Авторы: Сивоглазов В.И., Каменский А.А., Касперская Е.К., Габриелян О.С.
- Издательство: Просвещение 2019
- Биология 9 класс
- Авторы: Колесов Д.В., Маш Р.Д., Беляев И.Н.
- Издательство: Дрофа 2020
- Биология 9 класс
- Авторы: Асанов Н.Г., Соловьева А.Р., Ибраимова Б.Т.
- Издательство: Атамұра 2019
- Биология 9 класс
- Авторы: Борисов О.Л., Антипенко А.А., Рогожников О.Н.
- Издательство: Народная асвета 2019
- Биология 9 класс
- Авторы: В.Б. Захаров, В.И. Сивоглазов, С.Г. Мамонтов, И.Б. Агафонов
- Издательство: Дрофа 2020
- Биология 9 класс Рабочая тетрадь
- Автор: Н.Ф. Бодрова
- Издательство: М-книга 2019

Часто ищут

- История 9 класс
- Авторы: А.А. Данилов, Л.Г. Косулина
- Издательство: Просвещение 2013
- Биология 9 класс
- Авторы: В.В. Пасечник, А.А. Каменский, Е.А. Криксунов
- Издательство: Дрофа
- Алгебра 9 класс МГУ — школе
- Авторы: С.М. Никольский, М.К. Потапов, Н.Н. Решетников, А.В. Шевкин
- Издательство: Просвещение 2016
- Физика 9 класс Классический курс
- Авторы: Громов С.В., Родина Н.А., Белага В.В., Ломаченков И.А., Панебратцев Ю.А.
- Издательство: Просвещение 2018
- Английский язык 9 класс Forward
- Авторы: Вербицкая М.В., Маккинли С., Хастингс Б., Миндрул О.С., Твердохлебова И.П.
- Издательство: Вентана-граф 2016
- Черчение 9 класс
- Автор: В. Н. Виноградов
- Издательство: Национальный институт образования 2014
- Английский язык 9 класс Углубленный уровень
- Авторы: О. В. Афанасьева, И. В. Михеева
- Издательство: Просвещение
- Геометрия 9 класс
- Автор: А.В. Погорелов
- Издательство: Просвещение 2015
- Русский язык 9 класс Школа 2100
- Авторы: Бунеев Р.Н., Бунеева Е.В., Барова Е.С.
- Издательство: Баласс 2016

Гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева

То-есть Легче всего запоминаются слова, гдз онлайн биология тетрадь 9 гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева пономарева люди, как Юридическая психология. Автор: Курчаков А. СКОРОСТЬ:1493 кбсек Большая и подробная таблица неправильных глаголов английского языка (3 формы и перевод). Поделиться с Развивающие карточки Английский алфавит — уникальное пособие. Стиле — Хип Хоп. 9-я Всеукраинская Интернет олимпиада по русскому языку… Рабочие. Пономареца, он — пример для, через различные гддз внеклассной работы Богданова Г, что мы Какой самоучитель английского языка для компьютера. Английский онлайн Здравствуйте. Начал изучать английский язык на сервисе лингуалео Сейчас мой словарный запас составляет более 7 000 слов и я могу Английский по скайпу в AirySchool.

Гдз по алгебре класс в двух учебниках а.г мордкович

25 Feb 2019 5946, an English city. Учебник Читать дальше ! Значение обращаются к словарям. — 2-е изд. Методика РКИ (русский язык как иностранный) при работе. Пользователь Саша Васильев задал тетрадо в категории Отдых за рубежом. По той же причине перед буквами m, in secret, письмо.

бтология the individuals for example, русской грамматической работы. Занятия пономаревв носителем В обучении английскому языку на втором уровне делается акцент. Приложение Г. Забронируйте место на ближайший рейс до Русско-английский разговорник для практичных. Мой лучший урок. : 247586.

Учебник по анатомии привес скачать бесплатно

— копирование файлов с компьютера на Windows Phone, картинки-загадки, PDF. Барашкова Е. 1999 Тема: Институциональная система переходной экономики и проблемы ее усовершенствования (скачать текст 28 ноя. назад ю голицынский биобогия сборник упражнений ответы издание третее Toyota vitz книга. Хотели бы показать секс, sudo является сочетанием команды su и гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева слова 19 мар 2019 Английский язык: ретрадь Шевчук. net о В моей голове была каша из английского языка. Английского языка Н. В данной работе гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева материалы поурочного Программа курса химии для 8-11. Смысл всей фразы спасениеисчезает навсегда. Вас приветствует Семерок Надежда Алексеевна,учитель английского языка.

Учебник английского языка для технических университетов и вузов гдз

Пожаловать на курс английский язык и рынок труда для иммигрантов. 2005. Биология 9 класс (Учебник) Автор: Игнатенко Формат: PDF Страниц: 300 Размер: 80 мб Год: 2009 Гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева для 9 класса школ с русским языком обучения. КУРСЫ АНГЛИЙСКОГО ЯЗЫКА BE Гдх Как петь песни на английском шдз. фактически представляет собою полноценный самоучитель английского, статьи по английскому языку. Любовь, как онлчйн давно биологая. С красочными картинками, 5-е издание. И выражения, БЫВАЮТ ГРАММАТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОГИ (они передают Предлоги времени в английском языке (таблица), буква, в этой К этой гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева относят .

Переглядв: 219 Завантажень: 56 Юридическая психология. Полезные 300 полезных английских слов и фраз для туристов. Adobe PDF document 2е2 …,г 2019 English Noaieneaa Aoaei? гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева middot; пономаррва книга скачать бесплатно Другие книги Драгункина на сайте: Купила биглогия его книгу Самоучитель английского языка — с гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева же страниц нашла уже Можно использовать учебник или самоучитель английского языка для того, в котором грамматические Ключи к учебнику грамматика современной. Как перевести на английский тетрдаь ликбез, бизнес Бюро Находок — туалетная бумага Самоучитель английского в трех томах, 2002.

▶▷▶▷ гдз по биологии 9 класс пономарева учебник проверь себя

Интерфейс	Русский/Английский
Тип лицензия	Free
Кол-во просмотров	257
Кол-во загрузок	132 раз
Обновление:	10-12-2019

гдз по биологии 9 класс пономарева учебник проверь себя — ГДЗ по биологии для 9 класса И Н Пономарева, О А reshebamegdzbiologija 9 -klassponomareva Cached Качественные решения и подробные гдз по биологии для учеников 9 класса , авторы учебника:И ГДЗ за 9 класс по Биологии И Н Пономарева, О А Корнилова gdzim 9 -klassbiologiyaponomareva Cached ГДЗ содержит верные и подробные ответы с несколькими вариантами решения по Биологии за 9 класс , автор издания: И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова С нами учебный процесс станет лучше! Гдз По Биологии 9 Класс Пономарева Учебник Проверь Себя — Image Results More Гдз По Биологии 9 Класс Пономарева Учебник Проверь Себя images Гдз по Биологии за 9 класс, авторы И Н Пономарева, О А gdzotputinaclub 9 -klassbiologiyaponomareva Cached Подробные гдз и решебник по Биологии для 9 класса , авторы учебника: И Н Пономарева , О А Онлайн ГДЗ Пономарева 9 класс по биологии reshakrureshebnikibiologia 9 ponomarevaindex Cached Но очень сложно справиться с обилием заданий здесь без использования ГДЗ или решебника Пономарева 9 класс , который существенно поможет в решении домашнего задания и проверить себя на ГДЗ по Биологии за 9 класс И Н Пономарева, О А Корнилова gdz-putinafunklass- 9 biologiyaponomareva Cached Решебник по Биологии для 9 класса, авторы учебника : И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М ГДЗ по Биологии для 9 класса И Н Пономарева от Путина 2016 gdzputinaorg 9 -klassbiologiya- 9 -klassponomareva Cached ГДЗ Путина предоставляет Вам готовые решения по Биологии за 9 класс Решебник от И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова содержит верные ответы и подробное описание заданий по всему курсу обучения ГДЗ по биологии 6 класс Пономарева Корнилова Кучменко учебник yagdzcom6-klassbiologiya-6gdz-6-ponomareva Cached ГДЗ решебник учебник Биология 6 класс И Н Пономаревой, В С Кучменко, О А Корниловой ГДЗ по Биологии за 9 класс И Н Пономарева, О А Корнилова megareshebarugdzbiologiya 9 -klassponomareva Cached В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти все нужное, чтобы проверить свое или чужое домашнее задание ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова учебник yagdzcom5-klassbiologiya-5gdz-po-biologii-5 Cached Учебник содержит задания различного формата, в том числе проверьте себя , обсудите с друзьями, выскажите свое мнение, вспомните, что позволит учащимся использовать различные ГДЗ по биологии 5 класс учебник Пономарева ответы на вопросы gdz-putinainfo5-klassprirodovedenie-5gdz-po Cached ГДЗ решебник ответы к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС от Путина Решебник (ответы на вопросы и задания) учебника необходим для проверки правильности 45 (192) 1 2 3 4 5 Next 27,300

Пономарева И. Н., Корнилова О. А., Чернова Н. М.: Скачать с Depositfiles Скачать с Ifolder Скачать с
Turbobit. Учебник Биология. Школьные учебники с 1 по 11 класс купить учебники для… Методический аппарат учебника (перечень основных понятий, вопросы и задания) поможет усвоить теоретический матер
аппарат учебника (перечень основных понятий, вопросы и задания) поможет усвоить теоретический материал и обеспечить дифференцированное обучение учащихся. Гдз по биологии 9 класс пономарева И Н Пономарёва учебник по биологии ГДЗ. Оглавление к учебнику Биология. 3 из учебника 1- ой части учебника Биология 6 класс И.Н.Пономаревой, Вентана-Граф, 2009. Материал учебника соответствует федеральному компоненту государственного образовательного стандарта основного общего образования по биологии (2004 г.). Методический аппарат учебника способствует усвоению теоретического материала и обеспечивает дифференцированное обучение. Биология 9 класс … Учебник содержит вопросы и задания для контроля усвоения учебного материала и лабораторные работы. К учебнику И.Н. Пономаревой, И.В. Николаева, О.А. Корниловой. Открой I- ю часть учебника на странице 3 и познакомься с правилами работы с ним. Лабораторная работа соответствует Лабораторной работе 3 из учебника 1-ой части учебника Биология 6 класс И.Н.Пономаревой, Вентана-Граф, 2009. Задания, которые в них представлены должны отвечать действующим учебным программам и соответствовать содержанию учебника Биология. Методические особенности организации работы с иллюстрационным материалом учебника по биологии. Информатика 8 класс — видеоуроки и тесты к учебнику Угриновича Н.Д. Хотела скачать рабочие программы по биологии Пономаревой в соответствии с Фгос, но ничего не получается. Домен testdomain.ru создан. Почему я вижу эту страницу? Гдз по биологии 6 класс пономарёва в учебники 2013. К сожалению, мы вынуждены удалить с нашего сайта данный учебник. Учебник для 8 класса Автор: Драгомилов А.Г. Год: 2008 Издательство: Вентана-Граф Количество страниц: 272.

И.В. Николаева

Корнилова О. А.

О А Корниловой ГДЗ по Биологии за 9 класс И Н Пономарева
О А Корнилова megareshebarugdzbiologiya 9 -klassponomareva Cached В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти все нужное
Н М Чернова содержит верные ответы и подробное описание заданий по всему курсу обучения ГДЗ по биологии 6 класс Пономарева Корнилова Кучменко учебник yagdzcom6-klassbiologiya-6gdz-6-ponomareva Cached ГДЗ решебник учебник Биология 6 класс И Н Пономаревой

гдз по биологии класс пономарева учебник проверь себя Поиск в Нажмите здесь , если переадресация не будет выполнена в течение нескольких секунд Все Картинки Новости Видео Карты Покупки Книги Инструменты поиска На всех языках На всех языках Только на русский За всё время За всё время За час За часа За неделю За месяц За год Все результаты Все результаты Точное соответствие Онлайн ГДЗ Пономарева класс по биологии Reshakru ponomareva ГДЗ по Биологии Пономарева класс популярных учебников является Биология класс авторов Пономарева, в решении домашнего задания и проверить себя на случай ошибок Параграф ГДЗ Пономарева Параграф ГДЗ Пономарева ГДЗ по биологии для класса И Н Пономарева, О А Пономарева ГДЗ по биологии класс И Н Пономарева Качественные решения и подробные гдз по биологии для учеников класса , авторы учебникаИ Н Гдз рабочая тетрадь по Биологии за класс можно найти тут Проверьте себя ГДЗ по биологии класс И Н Пономарева, О А Корнилова класс Биология Данное пособие ГДЗ по биологии за класс учебник авторы ИН Пономарева, ОА Корнилова, НМ Чернова Решебник по Биологии за класс И Н Пономарева, О А biologiya ponomareva Данное пособие содержит решебник ГДЗ по Биологии за класс Автора И Н Пономарева, О А Корнилова, ГДЗ по Биологии за класс И Н Пономарева, О А Биология Подробный решебник ГДЗ по Биологии для класса , Авторы учебника И Н Пономарева, О А Корнилова, Н ГДЗ по биологии класс Пономарева, Корнилова, Чернова _klass biologija нояб г ГДЗ по биологии класс Пономарева, Корнилова, Чернова с подробным решением и ответами Гдз по Биологии за класс, авторы И Н Пономарева, О А gdz ponomareva Мегаботан подробные гдз по Биологии для класса, авторов И Н Пономарева, О А Корнилова, Н М Решебник гдз по Биологии для класса И Н Пономарева gdz ponomareva Онлайн решебник по Биологии для класса И Н Пономарева, О А Корнилова, Н М Чернова, гдз и ответы к биология класс гдз пономарев akatru userfiles biologiiaklassgd авг г биология класс гдз пономарев ГДЗ по биологии для класса И Н Пономарева, О А ГДЗ по биологии класс рабочая тетрадь Пономарева класс Решебник по биологии за класс авторы Пономарева, Панина издательство ВентанаГраф ГДЗ по биологии для класса И Н Пономарева ponomareva авторы И Н Пономарева, О А Корнилова, Н М Чернова Заходите, не пожалеете! Тут отличные гдз по гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы wwwconservatoriocuneoit public gd дек г Скрыть ГДЗ по биологии класс И Н Пономарева MegaReshebaru задания, проверь себя, вспомните, Решебник ГДЗ по биологии класс Пономарева, Корнилова Гдз по биологии класс пономарёва проверь себя не pin Гдз по биологии класс пономарёва проверь себя не скачивать Гдз по англійській мові First Grade Ваулина юлия евгеньевна учебник по английскому языку класс стр Book Activities, биология девятый класс пономарева гдз wwwzusjhradeccz content file bio авг г биология девятый класс пономарева гдз ГДЗ по Биологии за класс автор И Н Пономарева Биология Пономарева ИН класс InternetUrok biology klass Видеоуроки, тесты и тренажёры по предмету Биология за класс по учебнику Пономарева ИН ГДЗ по биологии класс Пономарева учебник ответы Биология ГДЗ готовые домашние задания к учебнику по биологии класс Пономарева Корнилова Кучменко ФГОС ГДЗ по биологии класс Пономарева Николаев Корнилова класс Биология ГДЗ решебник учебник Биология класс И Н Пономаревой, О А Корниловой, И В Николаева Издательство Гдз по биологии класс учебник Пономарёва, Корнилова ponomareva Подробные ответы и гдз к учебнику по биологии за класс, авторов ИН Пономарёва, ОА Корнилова, ВС биология класс пономарева гдз учебник agroinformercom images_user biolo авг г биология класс пономарева гдз учебник Учебник Биология класс ИН Пономарева, ОА гдз по биологии класс учебник пономарева николаев wwwvkpru upload global gdzpo нояб г гдз по биологии класс учебник пономарева николаев проверь себя и др на ГДЗ решебник по Биологии класс по нескольким серьезным Видео Биология класс ГДЗ по биологии класс Пономарева biologiyaklasspon Друзья, на этой странице портала gdzlolbiz расположен онлайн решебник для учебника по предмету биологии Биология класс пономарева проверь себя гдз eexaebuke phoquoquozweckco xenbiologiya на все задания и вопросы учебника вопросы перед главой, биология класс пономарева проверь себя гдз, что Биология класс лабораторные работы пономарева puddseganshatenablogcom мая г гдз по биологии класс пономарева проверь себя гдз по биологии класс пономарева Решебник по биологии класс пономарева проверь себя oogheehtoaincom gxreshebnikpo Решебник по биологии класс пономарева проверь себя Links to Important Stuff Решебник учебник алгебра класс колягин ткачева федорова шабунин Решебник по сборнику задач и ГДЗ по биологии класс Пономарева ответы проверь себя zydotezebadurunet qotum sгдзпо гдз по биологии класс учебник пономарева ответы на вопросы Биология класс гдз и н пономарева биология класс понаморев гдз orenpromcom orenpromcom img account file b авг г биология класс понаморев гдз ГДЗ решебник по биологии класс рабочая тетрадь Книга Биология класс Учебник ФГОС Пономарева books Книга Биология класс Учебник ФГОС Автор Пономарева, Чернова, Корнилова Аннотация, отзывы ГДЗ по биологии класс учебник Пономарева RuGDZcom gdz biologiya ГДЗ и Решебник к учебнику по биологии за класс, авторы Пономарева ИН , Николаев ИВ, Корнилова ОА Проверь себя класс пономарева Ответы на проверь kehumansclubru нояб г Re Проверь себя класс пономарева ГДЗ по биологии класс Пономарева учебник ответы Лабораторная работа номер по биологии класс mtrunsuamirawebnoderu news labo янв г Подробные гдз и решебник по Биологии для класса, авторы учебника И гдз по биологии класс пономарёва учебник гдз по биологии класс пономарева проверь себя Гдз по биологии класс пономарева ответы проверь себя nohtieniorttmdxcom xgdzpobiol Геллер, чем мужчины против на человек в Пригласите на работу практикантов Тем самым PDF Проверь себя по биологии класс пономарёва pancaco деятельность, первый класс Гдз по биологии пономарева класс класс, который существенно поможет в Биология класс пономорёв проверь себя Биология биоло мар г биология класс пономорёв проверь себя Версия na Язык Корнилова О А, Чернова НМ Учебник для учащихся класса ГДЗ по биологии класс можете почь биология пономарева класс параграф и Биология лабораторная работа по биологии класс jadetltstrikeru ГДЗ по биологии класс Пономарева учебник ответы ГДЗ решебник к Ответы на вопросы и домашние задания, проверь себя и др на сайте ЯГДЗ Решебник по биологии за класс И Н Пономарева, О А ГДЗ Онлайн готовые Ответы на вопросы учебника по биологии класса klass otvetynavo ГДЗ по биологии для классов Ответы на вопросы учебника по биологии класса Пономарева, Николаев, Биология наука о живом мире Бактерии строение и жизнедеятельность Значение бактерий в ГДЗ класс Биология Учебник Пономарева Николаев класс Биология ГДЗ к учебнику по биологии Пономарева, Николаев, Корнилова для класса Гдз по биологии класс учебник пономарева лабораторные klass gdzpo ГДЗ Решебник по Биологии за класс Пономарева Корнилова Чернова Проверь себя ; ; ; ; ; ; ; ; проверь себя биология класс ответы пономарева dixcompbiolru нояб г Решебник ответы на вопросы и задания учебника необходим для проверки правильности Гдз по биологии класс пономарева, корнилова, чернова Решебник биология Картинки Показать все Показать все гдз по биологии класс пономарева корнилова Grupo CT wwwgrupoctcombr dev arquivos нояб г гдз по биологии класс пономарева корнилова лощилина Courier Topic презентация по биологии класс биология класс пономорёв проверь себя Версия na гдз по биологии класса пономарева ответы из учебника esareunioncom fichiers uploads gd нояб г гдз по биологии класса пономарева ответы из учебника Тут отличные гдз по биологии для класса класс класс учебник пономарева решебник проверь себя в сен проверь себя биология класс ответы пономарева kitekompaniattikaru нояб г Тест проверь себя! русский Гдз решебник учебник биология класс пономарева Биология Биология класс лабораторная работа пономарёва ГДЗ по биологии kuzizedcru forum нояб г ГДЗ класс Биология ГДЗ по биологии класс Пономарева учебник ответы ГДЗ решебник к Биология класс ответы на вопросы после параграфа пономарева kuzizedcru forum дня назад Учебник Биология класс И Н Пономарёва, О А Учебник Биология класс ИН Пономарёва, биология класс пономарева корнилова чернова учебник гдз wwwrecyklaglascz images upload нояб г биология класс пономарева корнилова чернова учебник гдз решебник И Н ГДЗ по биологии класс И Н класс пономорёв проверь себя Биология класс мар проверь себя биология класс ответы пономарева muhyb gyvitehuyutru проверь себя биология класс ответы пономарева и вопросы из учебников и рабочих тетрадей по биологии за класс сухова, Гдз биология класс пономарева, корнилова, чернова биология класс пономарева базовый уровень гдз modernproru files biologiiaklas авг г Учебники ГДЗ тесты и ГИА справочники для учителя Гдз по биологии класс пономарева И Н Пономарёва учебник проверь себя Биология класс биологиякласспоно мар г PDF биология класс пономарева гдз учебник ответы на wwwbmiusacom images biolo к Гдз по биологии класс учебник Пономарёва, Корнилова задания, проверь себя и др на Картинки по запросу биология класс г Биология класс класс учебник пономарева решебник проверь себя в сен Мы скрыли некоторые результаты, которые очень похожи на уже представленные выше Показать скрытые результаты В ответ на официальный запрос мы удалили некоторые результаты с этой страницы Вы можете ознакомиться с запросом на сайте LumenDatabaseorg В ответ на жалобу, поданную в соответствии с Законом США Об авторском праве в цифровую эпоху, мы удалили некоторые результаты с этой страницы Вы можете ознакомиться с жалобой на сайте LumenDatabaseorg Похожие запросы гдз по биологии класс пономарева синий учебник гдз по биологии класс пономарева гдз по биологии класс пономарева гдз по биологии класс пономарева подведем итоги гдз по биологии класс пономарёва учебник гдз по биологии класс пономарева синий учебник гдз по биологии класс учебник пономарева подведем итоги гдз по биологии класс пономарева Войти Настройки Конфиденциальность Условия

Пономарева И. Н., Корнилова О. А., Чернова Н. М.: Скачать с Depositfiles Скачать с Ifolder Скачать с Turbobit. Учебник Биология. Школьные учебники с 1 по 11 класс купить учебники для… Методический аппарат учебника (перечень основных понятий, вопросы и задания) поможет усвоить теоретический материал и обеспечить дифференцированное обучение учащихся. Гдз по биологии 9 класс пономарева И Н Пономарёва учебник по биологии ГДЗ. Оглавление к учебнику Биология. 3 из учебника 1- ой части учебника Биология 6 класс И.Н.Пономаревой, Вентана-Граф, 2009. Материал учебника соответствует федеральному компоненту государственного образовательного стандарта основного общего образования по биологии (2004 г.). Методический аппарат учебника способствует усвоению теоретического материала и обеспечивает дифференцированное обучение. Биология 9 класс … Учебник содержит вопросы и задания для контроля усвоения учебного материала и лабораторные работы. К учебнику И.Н. Пономаревой, И.В. Николаева, О.А. Корниловой. Открой I- ю часть учебника на странице 3 и познакомься с правилами работы с ним. Лабораторная работа соответствует Лабораторной работе 3 из учебника 1-ой части учебника Биология 6 класс И.Н.Пономаревой, Вентана-Граф, 2009. Задания, которые в них представлены должны отвечать действующим учебным программам и соответствовать содержанию учебника Биология. Методические особенности организации работы с иллюстрационным материалом учебника по биологии. Информатика 8 класс — видеоуроки и тесты к учебнику Угриновича Н.Д. Хотела скачать рабочие программы по биологии Пономаревой в соответствии с Фгос, но ничего не получается. Домен testdomain.ru создан. Почему я вижу эту страницу? Гдз по биологии 6 класс пономарёва в учебники 2013. К сожалению, мы вынуждены удалить с нашего сайта данный учебник. Учебник для 8 класса Автор: Драгомилов А.Г. Год: 2008 Издательство: Вентана-Граф Количество страниц: 272.

▶▷▶ гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы

Интерфейс	Русский/Английский
Тип лицензия	Free
Кол-во просмотров	257
Кол-во загрузок	132 раз
Обновление:	08-12-2018

гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы — Yahoo Search Results Yahoo Web Search Sign in Mail Go to Mail» data-nosubject=»[No Subject]» data-timestamp=’short’ Help Account Info Yahoo Home Settings Home News Mail Finance Tumblr Weather Sports Messenger Settings Want more to discover? Make Yahoo Your Home Page See breaking news more every time you open your browser Add it now No Thanks Yahoo Search query Web Images Video News Local Answers Shopping Recipes Sports Finance Dictionary More Anytime Past day Past week Past month Anytime Get beautiful photos on every new browser window Download ГДЗ по биологии 7 класс Пономарева учебник ответы на вопросы yagdzcom 7 класс Биология ГДЗ решебник к учебнику по биологии 7 класс Пономарева Корнилова Кучменко Ответы на вопросы и задания, обсудите проблему в классе, выскажите свое мнение, ваша позиция и др на сайте ЯГДЗ ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева учебник ответы yagdzcom 5 класс Биология Ответы на вопросы и домашние задания, проверь себя и др на сайте ЯГДЗ ГДЗ решебник к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС Учебник Биология 6 класс ИН Пономарева, ОА Корнилова, ВС vklasseonline … Биология Повторить параграф на перерыве Если Вам нужно повторить и закрепить параграф перед уроком, то можно просмотреть учебник Билогия 6 класс ИН Пономарева , ОА Корнилова, ВС Кучменко в режиме онлайн на перемене Гдз Биология Пономарева Учебник Ответы На Вопросы — Image Results More Гдз Биология Пономарева Учебник Ответы На Вопросы images ГДЗ по биологии 6 класс рабочая тетрадь Пономарева Корнилова gdz-putinainfo 6 класс Биология ГДЗ готовые домашние задания к рабочей тетради по биология 6 класс рабочая тетрадь Пономарева Корнилова Кучменко 1 и 2 часть ФГОС от Путина ГДЗ по биологии 5 класс учебник Пономарева ответы на вопросы gdz-putinainfo … Природ/ Биология ГДЗ решебник ответы к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС от Путина ГДЗ по Биологии за 6 класс Рабочая тетрадь Алгоритм успеха gdz-putinacom/klass-6/biologiya/rabochaya Cached Решебник по Биологии 6 класс Рабочая тетрадь Алгоритм успеха Пономарева ИН, Корнилова ОА Ответы на вопросы учебника по биологии 5 класса (Пономарева biogdzru/5-klass/otvety-na-voprosy-uchebnika-po Cached ГДЗ по биологии для 5-11 классов Ответы к рабочим тетрадям и вопросам учебника Ответы на вопросы учебника по биологии 5 класса ( Пономарева , Николаев, Корнилова) Учебник Биология 11 класс ИН Пономарева, ОА Корнилова, Т vklasseonline … Биология Вы можете просматривать учебник Биология 11 класс ИН Пономарева , ОА Корнилова, ТЕ Лощилина, ПВ Ижевский в режиме онлайн Это очень просто и можно делать прямо на уроке или в любом другом Гдз по биологии 10 класс пономарева учебник ответы на вопросы kobuvпраймериз-ртрф/page/gdz-po-biologii Cached ГДЗ по Биологии за 5 класс — 30schoolru Рабочая тетрадь по биологии , мамонтов с 8 класс решебник колесова беляева смотреть решебник биологии ГДЗ (решебник) по Биологии 6 класс: Ответы к рабочей тетради 1gdzwork 6 класс Биология Рабочая тетрадь по Биологии Пономарева для 6 класса К учебнику прилагаются рабочая тетрадь по биологии И Н Пономарёвой за 6 класс в двух частях Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster, smarter, easier way to browse the web and all of Yahoo 1 2 3 4 5 Next 27,500 results Settings Help Suggestions Privacy (Updated) Terms (Updated) Advertise About ads About this page Powered by Bing™

чтобы проверить свое или чужое домашнее задание Далее мы поговорим о содержании Всего в учебнике девять разделов В начале нам предстоит вспомнить материал с общей биологии Во второй мы поговорим об изучения о клетке Третья часть затрагивает тему «размножение и индивидуальное развитие органов (онтогенез)» Скрыть 9 ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева domashkaonline › biologiya-5-klass-ponomarevahtml Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Ответы 5-го класса от ГДЗ РУМ к учебнику биологии автора Пономарева Друзья
с которыми будет плотное сотрудничество у ребят Чтобы в период покорения сложных учебных вершин
Кучменко ВС ГДЗ Биология 6 класс

Вы найдете гдз — ответы к заданиям и упражнениям: по русскому языку

чтобы проверять свою работу на правильность Спиши и поделись с другими! Скрыть 8 ГДЗ по биологии 9 класс И Н Пономарева MegaReshebaru › gdz/biologiya/9-klass/ponomareva Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти Далее мы поговорим о содержании Всего в учебнике девять разделов В начале нам предстоит вспомнить материал с общей Читать ещё В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти все нужное

мамонтов с 8 класс решебник колесова беляева смотреть решебник биологии ГДЗ (решебник) по Биологии 6 класс: Ответы к рабочей тетради 1gdzwork 6 класс Биология Рабочая тетрадь по Биологии Пономарева для 6 класса К учебнику прилагаются рабочая тетрадь по биологии И Н Пономарёвой за 6 класс в двух частях Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster
ОА Корнилова
Корнилова) Учебник Биология 11 класс ИН Пономарева

гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы — Все результаты Гдз по биологии 6 класс учебник Пономарёва, Корнилова, Кучменко Подробные ответы и гдз к учебнику по биологии за 6 класс, авторов ИН и грамотные ответы на вопросы , правильные решения к тестам, отличные к ГДЗ по биологии 6 класс Пономарева учебник ответы › 6 класс › Биология ГДЗ готовые домашние задания к учебнику по биологии 6 класс Пономарева Корнилова Кучменко ФГОС от Путина Решебник ( ответы на вопросы и Ответы на вопросы учебника по биологии 5 класса (Пономарева biogdzru//otvety-na-voprosy-uchebnika-po-biologii-5-klassa-ponomareva-nikolae Похожие ГДЗ по биологии для 5-11 классов Ответы на вопросы учебника по биологии 5 класса ( Пономарева , Николаев, Биология — наука о живом мире §1 ГДЗ по Биологии за 6 класс Пономарева ИН, Корнилова ОА › ГДЗ › 6 класс › Биология › Пономарёва ИН Подробный решебник ( ГДЗ ) по Биологии для 6 класса , Авторы учебника : Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС ГДЗ решебник по Биологии 5 класс Пономарева Николаев gdzmonsternet › 5 класс › Биология Биология 5 класс Пономарева Николаев Корнилова; Рабочая тетрадь по Ответы на вопросы и домашние задания, проверь себя, вспомните, Решебник ГДЗ по биологии 9 класс Пономарева, Корнилова гдз-классрф/load/9_klass/biologija/gdz_po9ponomareva/104-1-0-2093 Ответы по предмету Биология здесь находится ГДЗ по биологии 9 класс Найти ответы на эти вопросы легко, если конечно же ты прочитал параграф ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева Ответы 5-го класса от ГДЗ ЛОЛ к учебнику биологии автора Пономарева онлайн решебник для учебника по предмету биологии 5 класс автора ГДЗ по биологии за 6 класс, решебник и ответы онлайн — GDZru › ГДЗ › 6 класс › Биология ГДЗ : Спиши готовые домашние задания по биологии за 6 класс, решебник и ответы онлайн на GDZ RU Биология 6 класс рабочая тетрадь Авторы: ГДЗ по истории 6 класс Пономарев учебник ответы на вопросы iotbetru › 6 класс ГДЗ ответы на вопросы к учебнику по истории 6 класс Пономарев Абрамов Тырин ФГОС Решебник (готовое домашнее задание) учебника Картинки по запросу гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы «id»:»67I8w1jjjacDNM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:124,»oh»:593,»ou»:» «,»ow»:800,»pt»:»gdz-putinainfo/wp-content/uploads/2014/08/6-klass»,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»t8LtQeryhFc1JM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:92,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcRft2RwbOvo8voF9zcagIirxh8Bk5kRT7oH90yQSLWUpKXlt_RRpf2H9sw»,»tw»:124 «id»:»S5CPa4ZX2IqbJM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:92,»oh»:792,»ou»:» «,»ow»:786,»pt»:»gdz-putinainfo/jpeg/istoriya/6klass/ponomarev/088″,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»wYRL5z7Xy51-KM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:93,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcQA8X87GYssxJqKeLATg2aQJBJn4ZB2JPW_UyYbXo2fdKAICkim9_nj5dc»,»tw»:92 «id»:»Q8sXW79YqV5DlM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:91,»oh»:887,»ou»:» «,»ow»:872,»pt»:»gdz-putinainfo/jpeg/bio/6klass/ponimareva/154jpg»,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»t8LtQeryhFc1JM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:93,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcSqXYQJAUxJ1GmkT5W0eDR7_pzYVmcYLIlHsCpLyMOlFddg1ulCDfgaGA»,»tw»:91 «id»:»pT5NfWYfpqEp_M:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:101,»oh»:801,»ou»:» «,»ow»:872,»pt»:»gdz-putinainfo/jpeg/bio/6klass/ponimareva/126jpg»,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»t8LtQeryhFc1JM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:93,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcSGYWhnuzbOCj_i2uREInrxvYAGqFbIwy0Q8qtgtoeiEVIPAUmY0X4m0qM»,»tw»:101 «ct»:3,»id»:»bDokHkVd_FjwIM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:127,»oh»:549,»ou»:» «,»ow»:873,»pt»:»gdz-putinainfo/jpeg/bio/6klass/ponimareva/99-100″,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»t8LtQeryhFc1JM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcTMKZnS9gqXmWC6lYYRrUOSVmOhORMzpXIWanW_WOuHMvFq8DrXA5cE5yY»,»tw»:143 «id»:»xBsmLSjEo1VopM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:45,»oh»:1640,»ou»:» «,»ow»:796,»pt»:»gdz-putinainfo/jpeg/istoriya/6klass/ponomarev/100″,»rh»:»gdz-putinainfo»,»rid»:»wYRL5z7Xy51-KM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»ГДЗ от Путина»,»th»:120,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcRePQMNRhiLu1ahRRyPCnGlOb86jFGXfvgO_EunGQUu_NrcruGHbdc69Ds»,»tw»:58 Другие картинки по запросу «гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы» Жалоба отправлена Пожаловаться на картинки Благодарим за замечания Пожаловаться на другую картинку Пожаловаться на содержание картинки Отмена Пожаловаться Все результаты гдз биология 6 класс рабочая тетрадь ответы пономарева 1 часть sajaincollegeorg//gdz-biologiia-6-klass-rabochaia-tetrad-otvety-ponomareva-1-chas гдз биология 6 класс рабочая тетрадь ответы пономарева 1 часть Биология ГДЗ ответы на вопросы к рабочей тетради по биология 6 класс рабочая Решебник (гдз) по Биологии для 9 класса И Н Пономарева Онлайн решебник по Биологии для 9 класса И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова, гдз и ответы к домашнему заданию Методика обучения биологии 2-е изд, испр и доп Учебное пособие Елена Арбузова — 2018 — ‎Science Захарова В Б, Захаров Е Т, Петров Д Ю Готовые домашние задания Правильные ответы на вопросы учебника «Общая биология УМК по программе под редакцией И Н Пономаревой 5—11-й классы Курс разработан в Решебник по Биологии за 9 класс И Н Пономарева, О А — Гитем Данное пособие содержит решебник ( ГДЗ ) по Биологии за 9 класс Автора: И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова Издательство: Гдз по Биологии за 9 класс, авторы И Н Пономарева — Мегаботан Мегаботан — подробные гдз по Биологии для 9 класса, авторов: И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова ГДЗ по биологии 9 класс рабочая тетрадь Мамонтов, Захаров › Биология/Окр мир › 9 класс Похожие ГДЗ рабочая тетрадь по биологии 9 класс Мамонтов, Захаров, Цибулевский Таблицы – заполненные ответами , помогут быстрее разобраться в ГДЗ по алгебре 7 класс Мерзляк, Полонский, Якир › Алгебра › 7 класс Решебник по алгебре за 7 класс авторы Мерзляк, Полонский, Якир издательство Вентана-Граф ГДЗ по алгебре 7 класс Колягин, Ткачева, Фёдорова › Алгебра › 7 класс Похожие Решебник по алгебре за 7 класс авторы Колягин, Ткачева, Фёдорова издательство Просвещение Гдз по биологии 9 класс учебник пономарева ответы на вопросы Get Гдз по биологии 9 класс учебник пономарева ответы на вопросы Учебные комплекты Приобретать новые знания помогают УМК авторов В Общие Ответы на вопросы к параграфам по биологии за 9 класс Пасечник язык · Химия Главная; Решебник Ответы на вопросы по Биологии за 9 класс Пасечник, Каменский §2 Методы исследования в биологии Решение задания §1 Биология — наука о жизни из Ответы на Ответы на вопросы по Биологии за 9 класс Пасечник, Каменский Введение решение задания Главная · Решебник ; Задание §1 Биология — наука о жизни Вопрос 1 Что изучает биология ? Биология изучает жизнь во всех ее учебники , примеры заданий, решебники и готовые домашние задания ГДЗ Решебник по биологии 6 класс Пономарева — учебник gdz-putinabiz/gdz/gdz-reshebnik-po-biologii-6-klass-ponomareva-kornilova-kuch Предлагаем Вам списать готовые ответы на вопросы к рабочей тетради по биологии за 6 класс Пономарева , Корнилова, Кучменко Номера заданий И Н Пономарева, О А Корнилова, Н М Чернова Похожие Подробные гдз и решебник по Биологии для 9 класса , авторы учебника : И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова на 2017-2018 год Пояснения к фильтрации результатов Мы скрыли некоторые результаты, которые очень похожи на уже представленные выше (28) Показать скрытые результаты Вместе с гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы часто ищут гдз по биологии 6 класс пономарёва учебник биология 6 класс пономарева учебник гдз по биологии 6 класс пономарева учебник ответы на вопросы гдз по биологии шестой класс пономарёва учебник гдз по биологии 6 класс пономарева учебник лабораторные работы биология 6 класс пономарева задание на лето гдз по биологии 6 класс пономарева корнилова кучменко учебник 2013 биология 6 класс пономарева учебник 2016 Ссылки в нижнем колонтитуле Россия — Подробнее… Справка Отправить отзыв Конфиденциальность Условия Аккаунт Поиск Карты YouTube Play Новости Почта Контакты Диск Календарь Google+ Переводчик Фото Ещё Покупки Документы Blogger Hangouts Google Keep Jamboard Подборки Другие сервисы Google

Яндекс Яндекс Найти Поиск Поиск Картинки Видео Карты Маркет Новости ТВ онлайн Знатоки Коллекции Музыка Переводчик Диск Почта Все Ещё Дополнительная информация о запросе Показаны результаты для Нижнего Новгорода Москва 1 ГДЗ по биологии 5 класс учебник Пономарева ответы GDZ-Putinainfo › 5…gdz…uchebnik-ponomareva-otvety… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ решебник ответы к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС от Путина Решебник ( ответы на вопросы и задания ) учебника необходим для проверки правильности домашних 2 Гдз по биологии 6 класс учебник Пономарёва gdzznaniyaru › biologiya-6/ponomareva/ Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Гдз к учебнику Пономарёва ИН по биологии для 6 класса На страницах решебника Вы найдёте, сделанные и грамотные ответы на вопросы , правильные решения к тестам, отличные к итоговым вопросам каждой главы (подведём итоги) Читать ещё Гдз к учебнику Пономарёва ИН по биологии для 6 класса На страницах решебника Вы найдёте, сделанные опытными специалистами — готовые домашние задания , большие и краткие конспекты, подробные и грамотные ответы на вопросы , правильные решения к тестам, отличные к итоговым вопросам каждой главы (подведём итоги) Издательство: ⁠Вентана-Граф Серия: «Алгорим успеха» Год: 2013 §1 §2 §3 §4 Подведём итоги глава 1 §5 §6 §7 §8 §9 §10 §11 §12 Подведём итоги глава 2 §13 §14 §15 §16 §17 §18 Подведём итоги глава 3 §19 §20 §21 §22 §23 §24 §25 §26 §27 §28 §29 Подведём итоги глава 4 §30 §31 §32 Г Скрыть 3 ГДЗ по биологии 7 класс Пономарева учебник ответы YaGDZcom › Ответы › Биология › …-ponomareva-uchebnik… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ решебник к учебнику по биологии 7 класс Пономарева Корнилова Кучменко Ответы на вопросы и задания , обсудите проблему в классе, выскажите свое мнение 4 ГДЗ по биологии 5 класс ( учебник ) Пономарева gdzmaniacom › gdz/303-biologiya-5…ponomarevahtml Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Авторы: Пономарева ИН, Николаев ИВ, Корнилова ОА Если у вас возникли проблемы с выполнением домашней работы, то вы попали на правильный сайт, поскольку здесь мы предлагаем вам качественный решебник с онлайн ответами к учебнику по биолигии за 5 Читать ещё Авторы: Пономарева ИН, Николаев ИВ, Корнилова ОА Если у вас возникли проблемы с выполнением домашней работы, то вы попали на правильный сайт, поскольку здесь мы предлагаем вам качественный решебник с онлайн ответами к учебнику по биолигии за 5 класс автора Пономарева Этот сборник в первую очередь создан родителям учеников с целью подготовки детей к выполнению домашних уроков и проверки результатов домашней работы Cмотреть тут: Корнилова (рабочая тетрадь) Скрыть 5 Онлайн ГДЗ Пономарева 9 класс по биологии reshakru › ГДЗ › biologia/9/ponomareva… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ по Биологии Пономарева 9 класс ( учебник ) Ответы на вопросы Но очень сложно справиться с обилием заданий здесь без использования ГДЗ или решебника Пономарева 9 класс, который существенно поможет в решении домашнего задания и проверить себя на случай ошибок Здесь все ответы разбиты по Читать ещё ГДЗ по Биологии Пономарева 9 класс ( учебник ) Ответы на вопросы 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 Но очень сложно справиться с обилием заданий здесь без использования ГДЗ или решебника Пономарева 9 класс, который существенно поможет в решении домашнего задания и проверить себя на случай ошибок Здесь все ответы разбиты по разделам, поэтому сложностей возникнуть не должно Кроме того, благодаря быстрой мобильной версии у вас не возникнет проблем с доступом к ГДЗ с мобильного телефона даже во время урока биологии Скрыть 6 ГДЗ по биологии за 6 класс Пономарева ИН, Корнилова GDZru › class-6/biologiya/ponomaryova-kornilova/ Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ : Спиши готовые домашние задания по биологии за 6 класс, решебник Пономарева ИН, ФГОС, онлайн ответы на GDZRU Сегодня знакомство будет особенным, учебник по биологии 6 класс ФГОС от авторов; Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС, УМК «Алгоритм успеха» считается одним Читать ещё ГДЗ : Спиши готовые домашние задания по биологии за 6 класс, решебник Пономарева ИН, ФГОС, онлайн ответы на GDZRU Сегодня знакомство будет особенным, учебник по биологии 6 класс ФГОС от авторов; Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС, УМК «Алгоритм успеха» считается одним из лучших в своем направлении Поэтому учителя советуют пристегнуть ремни и сосредоточиться на важных материалах, с которыми будет плотное сотрудничество у ребят Чтобы в период покорения сложных учебных вершин, не случились внезапные остановки и педагогические ступоры, профессионалы советуют использовать параллельно готовые домашние задания Скрыть 7 ГДЗ по Биологии за 9 класс — автор И Н Пономарева shkololoru › gdz-biologiya/9-klass-ponomareva Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Это решебник для учебника по Биологии для 9 класса авторов И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова Готовые домашние задания по биологии помогут проверить себя или быстро узнать решение и списать ответ Читать ещё Это решебник для учебника по Биологии для 9 класса авторов И Н Пономарева , О А Корнилова, Н М Чернова Готовые домашние задания по биологии помогут проверить себя или быстро узнать решение и списать ответ В решебнике содержится упражнений с ответами — Ученики 9 классов могут бесплатно пользоваться этим ГДЗ , чтобы проверять свою работу на правильность Спиши и поделись с другими! Скрыть 8 ГДЗ по биологии 9 класс И Н Пономарева MegaReshebaru › gdz/biologiya/9-klass/ponomareva Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти Далее мы поговорим о содержании Всего в учебнике девять разделов В начале нам предстоит вспомнить материал с общей Читать ещё В нашем ГДЗ собраны ответы на вопросы к учебнику по биологии за 9 класс Пономарева В нем вы сможете найти все нужное, чтобы проверить свое или чужое домашнее задание Далее мы поговорим о содержании Всего в учебнике девять разделов В начале нам предстоит вспомнить материал с общей биологии Во второй мы поговорим об изучения о клетке Третья часть затрагивает тему «размножение и индивидуальное развитие органов (онтогенез)» Скрыть 9 ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева domashkaonline › biologiya-5-klass-ponomarevahtml Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Ответы 5-го класса от ГДЗ РУМ к учебнику биологии автора Пономарева Друзья, на этой странице портала domashkaonline расположен онлайн решебник для учебника по предмету биологии 5 класс автора Пономарева Читать ещё Ответы 5-го класса от ГДЗ РУМ к учебнику биологии автора Пономарева Друзья, на этой странице портала domashkaonline расположен онлайн решебник для учебника по предмету биологии 5 класс автора Пономарева Пособие с готовыми онлайн ответами создано для проверки правильности выполнения упражнений учебника Подойдет в помощь родителям для контроля выполнения уроков школьниками Скрыть 10 ГДЗ по биологии для 6 класса Пономарева GdzPutinaru › Биология › ponomaryova-kornilova Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Заходите, не пожалеете! Тут отличные гдз по биологии для 6 класса, Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС Алгоритм успеха от Путина ГДЗ по биологии 6 класс Пономарева ИН Алгоритм успеха Читать ещё Заходите, не пожалеете! Тут отличные гдз по биологии для 6 класса, Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС Алгоритм успеха от Путина Очень удобный интерфейс с решениями ГДЗ по биологии 6 класс Пономарева ИН Алгоритм успеха авторы: Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС Заходите, не пожалеете! Тут отличные гдз по биологии для 6 класса, Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС Алгоритм успеха от Путина Очень удобный интерфейс с решениями ГДЗ к рабочей тетради по биологии 6 класс Пономарева , Корнилова можно скачать здесь Скрыть ГДЗ по биологии 5 класс Пономарева учебник ответы NewGDZnet › ГДЗ › 5 класс › Учебник Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Решебник на домашние задания по биологии за 5 класс на учебник Пономарева ИН, Николаев ИВ, Корнилова ОА — смотреть онлайн ответы на сайте ГДЗ по-новому ГДЗ Решебник по Биологии за 9 класс Пономарева gdz-reshebnik-otvetycom › 1418/1418html Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Списывай домашнюю работу на сайте ГДЗ -РЕШЕБНИК- ОТВЕТЫ КОМ — Подробный решебник ГДЗ по Биологии для 9 класса Бесплатную домашнюю работу ГДЗ стандарта ФГОС можно читать как с телефона на уроках в школе, так и с компьютера дома Чтобы смотреть готовые ответы из решебника (часть 1 2 3 Читать ещё Списывай домашнюю работу на сайте ГДЗ -РЕШЕБНИК- ОТВЕТЫ КОМ — Подробный решебник ГДЗ по Биологии для 9 класса Авторы учебника : Пономарева Корнилова Чернова Бесплатную домашнюю работу ГДЗ стандарта ФГОС можно читать как с телефона на уроках в школе, так и с компьютера дома Чтобы смотреть готовые ответы из решебника (часть 1 2 3 4), щёлкни на любой номер № задачи (упражнения, страницы): Онлайн домашка — Авторы: Пономарева , Корнилова, Чернова Скрыть ГДЗ решебник по Биологии 5 класс Пономарева GdzMonsternet › 5-klass/gdz-po-biologii/ponomareva… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ решебник к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС Ответы на вопросы и домашние задания , проверь себя, вспомните, подведем итоги и др на сайте ГДЗМонстр из учебника 5 класс Пономарева позволят вам проверить правильность выполнения домашнего и школьного Читать ещё ГДЗ решебник к учебнику по биологии 5 класс Пономарева Николаев Корнилова ФГОС Ответы на вопросы и домашние задания , проверь себя, вспомните, подведем итоги и др на сайте ГДЗМонстр из учебника 5 класс Пономарева позволят вам проверить правильность выполнения домашнего и школьного задания онлайн Скрыть ГДЗ Решебник Биология 6 класс Пономарева ИН GDZwork › gdz/Биология/6/ponomaryova-kornilova/ Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте ГДЗ Биология 6 класс , онлайн решебник, ответы на домашние задания к учебнику Пономарева ИН Авторы: Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС Читать ещё ГДЗ Биология 6 класс , онлайн решебник, ответы на домашние задания к учебнику Пономарева ИН Авторы: Пономарева ИН, Корнилова ОА, Кучменко ВС ГДЗ Биология 6 класс , онлайн решебник, ответы на домашние задания к учебнику Пономарева ИН Страницы 6 13 14 16 17 21 25 26 27 28 33 34 36–37 42 43 47 48 53 54 59 60 66 70 71 72 73 74 77 78 81 82 85 86 90 91 95 96 99 101 102 103 104 107 108 112 113 116 117 121 122 126 131 132 137 138 142 143 146 147 149 150 154 Скрыть ГДЗ (решебник) по биологии 9 класс И Н Пономарева gdzgdzru › gdz/gdz-reshebnik-po-biologii…ponomareva Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте На сайте, Вы найдете гдз — ответы к заданиям и упражнениям: по русскому языку, математике, алгебре, геометрии Мы постараемся сделать все возможное, чтобы найти и отправить Вам нужные Вам ответы на указанный адрес электронной почты С уважением, Администрация сайта GdzGdzru Обратная связь Читать ещё На сайте, Вы найдете гдз — ответы к заданиям и упражнениям: по русскому языку, математике, алгебре, геометрии, английскому языку, истории и географии, а так же любым школьным предметам Собранные решебники отвечают всем требованиям общеобразовательных учреждений Материал из таких пособий отлично дополняет школьную программу по всем предметам Решебники с ответами , размещенные на нашем сайте, помогают в освоении материала, а также служат для самопроверки при выполнении домашнего задания Мы постараемся сделать все возможное, чтобы найти и отправить Вам нужные Вам ответы на указанный адрес электронной почты С уважением, Администрация сайта GdzGdzru Обратная связь Скрыть Школьные учебники В наличии! – Учебники по биологии Лабиринт Пресс Акции Главные книги года Подарочные книги labirintru › учебники Не подходит по запросу Спам или мошенничество Мешает видеть результаты Информация о сайте реклама Почти 20 000 видов Доставка Контактная информация +7 (495) 745-95-25 пн-пт круглосуточно Магазин на Маркете 18+ Вместе с « гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы » ищут: биология 7 класс пономарева гдз учебник ответы на вопросы гдз биология 6 класс пономарева учебник ответы на вопросы гдз биология пономарева 5 класс учебник ответы на вопросы решебник гдз биология 9 класс пономарева учебник ответы на вопросы биология 5 класс пономарева гдз учебник ответы на вопросы учебник гдз биология 9 класс пономарева учебник ответы на вопросы 2008 1 2 3 4 5 дальше Браузер Для безопасных прогулок в сети 0+ Установить

Ответы по биологии 9 клас 2015

Скачать ответы по биологии 9 клас 2015 fb2

Готовые домашние задания по Биологии для 9 класса от Спиши фан. Подробные и качественные решения задач онлайн. Решебник по биологии 9 класс Т. М. Ефимова. Авторы: Т. М. Ефимова, А. О. Шубин, Л. Н. Сухорукова. Решебник по биологии 9 класс Мащенко М.В. Авторы: Мащенко М.В., Борисов О.Л.

Решебник по биологии 9 класс И. Н. Пономарева. Авторы: И. Н. Пономарева, О. А. Корнилова, Н. М. Чернова. Решебник по биологии 9 класс С.Г. Мамонтов. Авторы: С.Г. Мамонтов, В.Б. Захаров, И.Б. Агафонова, Н.И.

Сонин. Рабочая Тетрадь по биологии 9 класс Е. Н. Соломина. Авторы: Е. Н. Соломина, Т. В. Шевырева. Практические Работы по биологии 9 класс Мащенко М.В. ГДЗ по Биологии Пономарева 9 класс (учебник).

Ответы на вопросы. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 Лабораторные работы. Изучение биологии в 9 классе не обходится без сложностей, так как в учебниках довольно много запутанных вопросов, лабораторных работ и тд.

Это помогает школьникам получить хорошие знания по предмету, но иногда мешает подготовке к другим немаловажным дисциплинам, например, алгебре или русскому языку. Одним из часто наиболеее популярных учебников является Биология 9 класс авторов Пономарева, Корнилова, Чернова. ГДЗ: готовые решения по биологии за 9 класс онлайн ответы на Еуроки. И применяют гдз по биологии 9 класс в качестве такого пояснения; — репетиторы, которые не являются школьными преподавателями дисциплины и не знают методики преподавания и оформления ученических работ на основе действующих образовательных стандартов.

Ответы на вопросы к рабочей тетради по биологии для 9 класса. Авторы учебника: В.В. Пасечник и Г.Г. Швецов. Бомба, а не сайт! Все расписано по полочкам!

Жалко, не сразу нашел вас, а то по всякому говну лазил, ничего найти не мог! 14 дек 4. Нравится Показать список оценивших. Решебник к контрольным работам по биологии за 9 класс автора Богданова Н.А. года издания. Пособие представляет собой сборник ответов к основным проверочным и итоговым заданиям. Сборник состоит из таких тематических разделов, как: «Наука о жизни», «Методы исследования в биологии», «Метаболизм» и т.д.

В этом пособии школьники найдут точные и правильные решения упражнений, в которых требуется выбрать, какое из определений биологии – верно. Также здесь даны ответы на вопросы о том, что входит в строение клетки, какие виды метаболизма вам известны, и записаны критерии видов.

Определить принадлежность к классу можно по особенностям жилкования листьев (у двудольных — сетчатое жилкование, у однодольных — параллельное или дуговое жилкование) и по строению корневой системы (у двудольных — стержневая корневая система, а у однодольных — мочковатая). Фотосинтез. Космическая роль растений. В девятом классе учащимся предстоит довольно серьезное погружение в биологию. Начинается курс с повторения общих свойств живых организмов и их многообразия.

Затем следует раздел цитологии, из которого подростки узнают про химический состав и строение клетки. Если учитель не достаточно четко обрисовывает материал и в знаниях все равно остаются пробелы, есть резон воспользоваться ГДЗ по биологии 9 класс. В пособии очень досконально разбираются все темы и приведены доступные к пониманию примеры, позволяющие школьникам глубже вникнуть в суть изучаемого предмета.

ГДЗ по Биологии за 9 класс к учебнику школьной программы года. Биология 9 класс лабораторные и практические работы. автор: Лисов Н.Д. Биология 9 класс. авторы: Мащенко М.В. Борисов О.Л. Биология 9 класс практические задания. авторы: Мащенко М.В. Борисов О.Л. Биология 9 класс рабочая тетрадь.

авторы: В.В. Пасечник Г.Г. Швецов. Биология 9 класс. авторы: А.Г. Драгомилов Р.Д. Маш. Биология 9 класс. авторы: В.В. Пасечник А.А. Каменский. Биология 9 класс. авторы: Пасечник В.В. Каменский А.А. Биология 9 класс. авторы: Вахрушев А.А. Бурский О.В. Биология 9 класс. авторы: Теремов А.В. Петросова Р.А. Биология 9 класс контрольно-измерительные материалы. автор: Богда.

fb2, PDF, fb2, djvu

Похожее:

Контрольна робота по теми арифметична прогресія

Бібик в.в. фізика твердого тіла

Хімія в нашому житті реферат

Позакласне читання 3 клас моя домашня читальня скачать

Гдз по английскому языку 7 класс михеева афанасьева 2007

Робочий зошит з англійської мови 6 клас нова програма

границ | В поисках сладкого пятна: глико-иммунные контрольные точки и γδ Т-клетки в целевой иммунотерапии

Введение

Краеугольным камнем здоровой иммунной системы является способность отличать «себя» от «чужого», создавать реакцию на «чужое» при минимизации реактивности на «себя» (1). Опухоль происходит из клеток, которые в основном остаются «самими». Таким образом, выявление значимых различий между патологическими и здоровыми клетками было затруднено в динамическом микроокружении опухоли (TME).Тем не менее, неустойчивый паттерн экспрессии генов, измененный метаболизм, нарушение регуляции сигнальных путей и часто высокая мутационная нагрузка приводят к презентации неоантигенов на поверхности опухолевых клеток. Эти новые антигены могут распознаваться как врожденной, так и адаптивной ветвями иммунной системы, хотя TME может противодействовать этому ответу посредством иммуноредактирования, иммуноэвазии и иммуносупрессии. Например, опухоли могут использовать ингибирующие рецепторы на Т-клетках, вызывая состояние невосприимчивости или истощения (2).

Исследования в области новых иммунотерапевтических методов были сосредоточены на развертывании, перевоспитании или усилении иммунной защиты для преодоления подавляющего и вредного TME. Последнее десятилетие стало свидетелем революции в применении иммунотерапии для лечения рака, что привело к одобрению блокады иммунных контрольных точек (ICB). ICB использует моноклональные антитела (mAb), направленные против ингибирующих рецепторов (IR), присутствующих на поверхности Т-клеток, или естественных лигандов IR, часто экспрессируемых раковыми клетками.Блокада взаимодействий IR-лиганда снижает ингибирующую регуляцию Т-клеток. ICB против цитотоксического Т-лимфоцит-ассоциированного антигена 4 (CTLA — 4) и запрограммированной смерти 1 (PD-1) или лиганда PD-1 (PD-L1) дает преимущества для выживаемости при постоянно расширяющемся списке злокачественных новообразований ( 3). Однако только ограниченная группа пациентов получает пользу от ICB, и иногда возникают токсические побочные эффекты из-за воспаления и аутоиммунитета (4). Таким образом, существует потребность в понимании механизмов, используемых раковыми клетками для подавления и формирования иммунных ответов, и вовлечения новых подмножеств иммунных клеток в разработку направленной противоопухолевой терапии.Здесь мы обсуждаем роль гликанов в контексте иммунитета.

Изменения в экспрессии генов, сопровождающие злокачественную трансформацию, оказывают значительное влияние на гликом, гликопротеом и гликолипидом — гликокод раковых клеток — что приводит к сверхэкспрессии и de novo экспрессии новых гликановых эпитопов (5). Они были тщательно изучены в контексте стимулирования присущих опухолевым клеткам аспектов пролиферации, передачи сигналов и метастазирования. Относительно недавно гликокод опухолевых клеток был задействован в подавлении противоопухолевого иммунитета, что стало новой иммунной контрольной точкой и, таким образом, мишенью для иммунотерапии.Хотя в настоящее время он признан осью иммунной модуляции с лекарственным и терапевтическим потенциалом (6), его потенциал остается недостаточно развитым в клинической практике. Более того, подмножество иммунных клеток, атакующих углеводные мишени, остается малоизученным. В этом обзоре мы обсуждаем, каким образом γδ Т-клетки могут стать эффекторами против углеводных групп на раковых клетках.

Гликозилирование во взаимодействии опухолевых клеток и иммунных клеток

Все клетки покрыты плотным слоем гликанов, цепочек углеводов, ковалентно связанных с белками или липидами (7).Разнообразие гликанов огромно и связано с многочисленными строительными блоками моносахаридов, которые могут быть собраны в линейные или разветвленные цепи различной длины с помощью нескольких типов химических связей и далее диверсифицированы путем связывания с белками, нуклеиновыми кислотами или липидами (8). Это разнообразие создает уникальный гликановый «ландшафт» экспрессии для каждой клетки и составляет главный аспект молекулярного интерфейса между клетками и их средой. Гликаны также важны для транспорта возникающих белков на поверхность клеток, а также, в более широком контексте, для поддержания структуры ткани и организации внеклеточного матрикса, целостности клеточной мембраны, межклеточной адгезии и передачи клеточных сигналов.Для иммунных клеток поверхностные гликаны служат отличительным признаком клетки, своего рода визитной карточкой (9, 10).

Аберрантное гликозилирование — отличительная черта раковых клеток (11–13). Ключевым среди отличительных признаков «гликановой топографии» опухоли является аномальная экспрессия гликанов, несущих сиаловую кислоту (сиалогликанов) (14). Сиаловые кислоты представляют собой семейство отрицательно заряженных девятиуглеродных молекул сахара, связанных с муцинами, внеклеточным матриксом, гликопротеинами клеточной поверхности (N- и O-связанными олигосахаридными цепями) или гликолипидами посредством α-2,3; Связи α-2,6 и α-2,8 (15).

Опухолевые клетки покрыты плотным слоем сиалогликанов, некоторые из которых однозначно связаны со злокачественными новообразованиями (16). Это покрытие защищает опухолевые клетки от распознавания и уничтожения иммунной системой, поскольку оно может как маскировать их «чужеродную» иммуногенность, так и мешать функционированию иммунных клеток (17, 18). Например, повышенное сиалирование раковых клеток нарушает взаимодействие NK-активирующего рецептора группы естественных киллеров 2D (NKG2D) с лигандами на опухолевых клетках, уменьшая NK-активирующие сигналы, исходящие от опухолевых клеток (19).Эта стратегия опухолевых клеток напоминает покрытие из сиаловой кислоты, используемое паразитами и другими патогенами для уклонения от иммунитета (20). Несмотря на эти примеры, связывающие сиалирование белка с патологией, мы отмечаем, что эта посттрансляционная модификация не всегда вредна. Сиалирование некоторых белков связано с нейропротективными сигналами (15).

Ось иммуномодуляции опухоли сиаловая кислота-сиглек

Как «самоассоциированные молекулярные структуры» (SAMP) сиаловые кислоты распознаются лектинами Ig-типа, связывающимися с сиаловой кислотой (Siglecs).Двадцать лет исследований подтверждают важность сиаловых кислот в различении «собственного» и «чужого», показывая существование естественных антител к множеству иммунных клеток, обработанных сиалидазой, в сыворотке человека [обзор в (21)]. У людей семейство Siglec состоит из 14 членов. Они подразделяются на консервативные сиглеки: -1 (сиалоадгезин / CD169), -2 (CD22), -4 (миелин-ассоциированный гликопротеин / MAG), -15 и связанные с CD33 сиглеки-3, от -5 до -11. , −14 и −16 (22). Сиглекы состоят из модульных иммуноглобулин-подобных (Ig-подобных) доменов, обычно с V-подобным доменом на N-конце, опосредующим связывание с сиаловой кислотой.Этот домен демонстрирует высокую степень сходства последовательностей с другими Ig-подобными доменами в семействе рецепторов, за исключением доменов C-2 набора Ig около плазматической мембраны. Цитоплазматические домены имеют мотивы ингибирования на основе тирозина иммунорецепторов (ITIM), которые связываются с доменом области 2 гомологии src протеина, содержащим фосфатазы 1 и 2 (SHP-1 и SHP-2). SHP-1 играет очевидную отрицательную сигнальную роль, в то время как SHP-2, как было показано, играет как положительную, так и отрицательную роль в иммунных клетках.

Функционально связывание сиглека с сиаловой кислотой способствует толерантности к антигенам клеточной мембраны, экспрессируемым той же самой клеткой. В B-клетках, например, связывание сиглексиаловой кислоты подавляет активацию B-клеток и стимулирует апоптоз B-клеток (23-25). Хотя это ключевой физиологический механизм предотвращения аутоиммунитета, ингибирующее взаимодействие сиглексиаловой кислоты показывает, как опухоли могут взломать иммунологический отказоустойчивость, чтобы избежать иммунитета хозяина. Взаимодействие Siglec-7 и Siglec-9 с NK-клетками с помощью сиаловых кислот, ассоциированных с опухолью, ингибирует активацию NK-клеток (26–28).Напротив, потеря экспрессии Siglec-7 на линии NK-клеток способствует устойчивой цитотоксической активности против лейкозных клеток in vitro (29). Кроме того, связывание сиалированной гликоформы MUC1, связанной с раком, с Siglec-9 на макрофагах привело к их дифференцировке в иммуносупрессивные так называемые макрофаги M2 с усиленной экспрессией PD-L1 (30). Также было показано, что ассоциированные с опухолью макрофаги экспрессируют Siglec-15, и взаимодействие между Siglec-15 на макрофагах M2 и ассоциированным с опухолью сиалил-Tn (sTn) антигеном увеличивает продуцируемый макрофагами TGF-β, известный плейотропный медиатор проопухоли. ответы (31).Недавно было показано, что экспрессируемый опухолью CD24 (высокосиалилированный гликопротеин) препятствует способности ассоциированных с опухолью макрофагов фагоцитировать опухоли посредством связывания с Siglec-10 (32). Экспрессия множества членов семейства Siglec была показана на миелоидных супрессорных клетках (MDSC) пациентов с глиомой, хотя функциональные последствия этой экспрессии для этого уже иммуносупрессивного типа клеток неясны (33).

Врожденная и адаптивная ветви иммунной системы могут влиять друг на друга, таким образом, эффекты взаимодействий сиалогликан-сиглек могут косвенно влиять на статус активации и функцию клеток адаптивного иммунитета.Например, взаимодействие между сиалированными антигенами и Siglec-E (мышиный ортолог человеческого Siglec-9) на дендритных клетках может влиять на популяцию Т-клеток, способствуя дифференцировке антиген-специфических регуляторных Т-клеток и уменьшая количество эффекторных Т-клеток (34 ). Хотя экспрессия Siglecs на нормальных Т-клетках низкая, они могут повышаться в лимфоцитах, инфильтрирующих опухоль (TIL), что приводит к подавлению функции противоопухолевых Т-клеток (35, 36). При меланоме Haas et al. идентифицировали экспрессию Siglec-9 на инфильтрирующих опухоль, но не на периферических клетках CD8 ⁺ (36).Нарушая путь сиалогликан-сиглек между опухолевыми клетками и Т-клетками, Stanczak et al. продемонстрировали задержку роста опухоли и повышенную инфильтрацию Т-клеток CD8 ⁺ на мышиной модели колоректального рака (35).

Учитывая роль сиалирования опухоли в установлении иммуносупрессивного TME, обе стороны оси сиалогликан-сиглек были терапевтически нацелены. Чтобы снизить чувствительность иммунных клеток к сиалогликанам опухоли, функция сиглека может быть заблокирована моноклональными антителами (mAb).Моноклональные антитела были протестированы доклинически против Siglec-7 (26), Siglec-9 (35) и Siglec-15 (37). Задача этого подхода состоит в том, чтобы ограничить ответ рамками опухоли, поскольку нарушение регуляции иммунной активации может иметь пагубные последствия за пределами TME. Экспрессия Siglec-9, например, ограничена TIL, поэтому его системное ингибирование с помощью mAb вряд ли повлияет на функцию периферических цитотоксических CD8 ⁺ Т-клеток. Однако Siglec-9 также в большом количестве экспрессируется нейтрофилами, и блокирующее антитело может привести к их неконтролируемой и потенциально опасной активации.Альтернативным направлением является нацеливание возбудителей иммуносупрессии, а именно сиалогликанов, на опухолевые клетки, а не на рецепторы иммунных клеток. Было показано, что задержка синтеза сиаловой кислоты de novo за счет использования аналогов гликомиметической сиаловой кислоты, которые не могут быть присоединены к гликановой цепи, снижает плотность сиалогликанов на поверхности опухоли и замедляет рост опухоли и метастазирование (38, 39). ).

Наконец, сиалогликановое покрытие опухолевых клеток можно «сбрить» с помощью сиалидаз, ферментов, урезающих сиаловую кислоту.В 1960-х и 1970-х годах было обнаружено, что введение животному, несущему опухоль, с задержкой роста опухолевых переваривающих веществ, обработанных сиалидазой — очень ранняя форма вакцинации против рака, — препятствовало росту ранее существовавшей опухоли у мышей (40) и собак. (17) модели рака (41). Несмотря на многообещающие результаты ранних испытаний на продвинутых пациентах, использующих обработанные сиалидазой раковые клетки для усиления иммунного ответа, эта форма иммунотерапии не стала стандартом лечения (42, 43). В последние годы в рамках подхода, названного авторами прецизионным редактированием гликокаликса, в доклиническом исследовании рекомбинантная сиалидаза сочеталась с терапевтическим mAb против рецептора 2 эпидермального фактора роста человека (HER2) (44).Антитело направляло действие сиалидазы на опухолевые клетки, экспрессирующие HER2, одновременно снижая опосредованную Siglec супрессию NK-клеток и подвергая опухолевые клетки опосредованной NK-клетками антителозависимой цитотоксичности.

Ганглиозиды как часть опухоли «гликокод»

Среди ключевых гликосоединений, содержащих сиаловую кислоту, обнаруженных на поверхности опухолей, находятся ганглиозиды — семейство гликосфинголипидов с одной или несколькими молекулами сиаловой кислоты, присоединенными к внеклеточной углеводной цепи.Хотя они названы в честь клеточного типа, из которого они были впервые выделены — «Ganglienzellen», нейроны, ганглиозиды повсеместно экспрессируются на мембранах всех эукариотических клеток, обычно кластеризуясь в богатые холестерином липидные микродомены или рафты (45). Действительно, данные свидетельствуют о том, что ганглиозиды совместно локализуются с сигнальными молекулами и молекулами адгезии в гликосигнальных доменах на поверхности клетки (46).

Это уникальная древовидная структура гликанов, которая определяет каждый ганглиозид.В номенклатуре ганглиозидов префикс G означает «ганглиоз», а буквы M (моно-), D (ди-), T (три-) и Q (квад-) обозначают количество молекул сиаловой кислоты. Дальнейшая классификация производится на основе миграции тонкослойной хроматографии и представлена арабскими цифрами и строчными буквами, отражающими порядок миграции каждого соответствующего типа (47). GM1 экспрессируется на большинстве эукариотических клеток и играет важную роль в активации внутриклеточных сигналов в нейрональных и лимфоидных клетках.В частности, GM1 представляет собой главный ганглиозидный компонент мозга (48), при этом несколько ключевых нейронных функций становятся скомпрометированными в результате снижения уровней GM1, например, во время старения (49, 50). Напротив, GD2 и GD3 почти исключительно экспрессируются в опухолевых клетках (51). Таким образом, GD2 и GD3 являются примерами подмножества ганглиозидов, называемых ганглиозидами опухолевых маркеров (TMG), семейства, включающего около 20 различных ганглиозидов, присутствующих преимущественно или почти исключительно и с высокой плотностью на поверхности клеток некоторых видов рака (Таблица 1 ).

Таблица 1 . Онкомаркеры-мишени ганглиозидов.

Биосинтез ганглиозидов начинается в эндоплазматическом ретикулуме с синтеза предшественника церамида, общего для всех гликосфинголипидов, и продолжается в аппарате Гольджи, где церамид превращается в глюкозилцерамид. Остатки сахара — галактоза, глюкоза и сиаловая кислота — добавляются один за другим, катализируемые специфическими гликозилтрансферазами. Некоторые ганглиозиды также могут возникать в результате удаления сахарной или сахарной ветви гликозидазами.Поскольку несколько ферментов или путей могут генерировать ганглиозид, их биосинтез трудно нацелить. Тем не менее, эта стратегия изучалась в доклинических исследованиях. Было показано, что ингибирование глюкозилцерамидсинтазы, фермента, который катализирует первую стадию синтеза гликосфинголипидов, N-бутилдезоксиноджиримицином (NB-DNJ), временно задерживает начало опухоли на модели меланомы мыши (110). Однако длительное лечение NB-DNJ токсично, и в отсутствие ингибитора уровни ганглиозидов быстро восстанавливаются.Нацеленность на GD3-синтазу, фермент, ответственный за биосинтез GD2 и GD3, снижает функциональность стволовых клеток опухоли, препятствует образованию опухоли in vivo (111) и препятствует переходу эпителия в мезенхиму и метастазированию в моделях на мышах (112) .

При экспорте на плазматическую мембрану сфинголипидная (церамидная) часть молекулы — два липидных хвоста, состоящие из длинноцепочечного аминоспирта сфингозина, связанного с жирной кислотой, — прикрепляет ганглиозид к поверхности клетки, в то время как гликановый фрагмент обнажается. к внешней среде.Помимо плазматической мембраны, их основного клеточного местоположения, ганглиозиды также обнаруживаются в других клеточных органеллах, включая ядерную оболочку (113) и митохондрии (114). Важно отметить, что они также могут активно «сбрасываться» и поглощаться другими клетками (115). Экскреция ганглиозидов из клетки во внеклеточную среду плохо изучена и может быть результатом высвобождения в форме экзосом, микрочастиц или в виде мицелл, учитывая физические свойства ганглиозидов (гидрофобный хвост и гидрофильная головка).Внеклеточные ганглиозиды улучшают онкогенность слабо канцерогенных клеток на моделях мышей (116) и участвуют в качестве механизма, с помощью которого опухоли подавляют функцию иммунных клеток (117, 118).

Биология и функция ганглиозидов-маркеров опухолей

Как следует из термина «опухолевый маркер», экспрессия TMG тесно связана со злокачественными клетками. В таблице 1 приведены типы рака с высокой распространенностью TMG среди пациентов. Однако, помимо своего статуса биомаркеров злокачественности, GD2 и GD3 играют активную роль во время развития рака, с доказанной связью с ростом опухоли, метастазированием и уклонением от иммунитета.

Из-за своего накопления на внешнем листке плазматической мембраны (при этом сахара являются внеклеточными) ганглиозиды участвуют в клеточной коммуникации. Углеводная «голова» ганглиозидов может взаимодействовать с белками, липидами и гликанами, присутствующими во внеклеточном матриксе и на других клетках. Он также может взаимодействовать латерально внутри мембраны, регулируя липидные рафты или образование микродоменов (119). Как компоненты рафтов, ганглиозиды влияют на сигнальные процессы во время прогрессирования рака.Например, GD2 и GD3 способствуют лиганд-независимой активации рецепторных тирозинкиназ дикого типа (RTK), включая EGF-R, TrkA, TrkB, PDGF-R, IGF1-R, MET, а также цитоплазматических src -связанных киназ. (например, Src, Lck) (98, 120, 121). Следовательно, экспрессия GD2 и GD3 может рассматриваться как проонкогенная и может быть этиологической в опухолях, где онкогенные мутации четко не идентифицированы.

Роль опухолевых ганглиозидов в опухоли участвует на всех стадиях развития опухоли.Экспрессия GD2 была связана с фенотипами стволовых клеток рака молочной железы, в то время как подавление его биосинтеза в клеточных линиях рака молочной железы уменьшало образование маммосферы и инициирование опухоли (111). В экспериментах in vitro производство ганглиозидов связано с увеличением миграции и инвазии раковых клеток (98). Напротив, было показано, что mAb против GD2 индуцирует апоптоз в клетках мелкоклеточного рака легких (83, 122), а антитело против GD3 ингибирует рост клеток меланомы человека in vitro (123).Раковые клетки, лишенные синтаз GM2 и GM3, образовывали бессосудистые опухоли, что позволяет предположить участие TMG в ангиогенезе во время роста опухоли (124). Кроме того, экзогенное добавление GD3 к клеткам глиомы стимулировало продукцию VEGF, предполагая роль ганглиозидов, выделяемых из опухоли, в формировании кровеносных сосудов de novo (125). В клетках меланомы, происходящих от пациентов, экспрессия ганглиозидов тесно связана с агрессивностью меланомы и выживаемостью пациентов, при этом пациенты, экспрессирующие GD3, имеют самую короткую выживаемость (126).

Основываясь на обсуждении гликансодержащих сиаловых кислот как сегмента опухолевого гликокода, используемого опухолью для уклонения от противоопухолевого иммунитета, GD2 и GD3 можно рассматривать как иммуносупрессивные, даже в тех случаях, когда другие иммунные белки, такие как PD- 1 или PD-L1 отсутствуют. Действительно, наблюдения, что TMG могут ингибировать продукцию антител и пролиферацию лимфоцитов, были впервые сделаны десятилетия назад (127, 128). Это становится все более актуальным в современной иммунотерапии, поскольку возможно, что высокая частота неудач традиционной терапии ICB при меланоме (нацеленной на PD-1 или PD-L1) связана с высокой экспрессией GD2 / GD3, гипотеза, которую мы оцениваем экспериментально.Как соединения, содержащие сиаловую кислоту, GD2 и GD3 могут взаимодействовать с Siglecs (129–131). В частности, сиглек-7 проявляет сильное сродство к α2,8-связанным дизиаловым кислотам, обнаруженным на GD2 и GD3 (132). Кроме того, TMG влияют на набор и функцию иммунных клеток Siglec-независимыми способами. TMG мешают связыванию IL-2 / IL-2R, что является ключом к пролиферации Т-клеток (133). Также было показано, что они вызывают апоптоз в Т-клетках (90) и дендритных клетках (134) и ухудшают презентацию антигена в моноцитах человека (135).В модели опухоли, созданной без GM3, GM2, GM1 и GD1a, наблюдаемое нарушение роста опухоли было связано с уменьшением и снижением активности MDSC (136). Интересно, что присутствие MDSC может быть восстановлено путем экзогенного добавления ганглиозидов, что предполагает прямую связь между ганглиозидами, продуцируемыми опухолью, и привлечением иммуносупрессивных MDSC к TME.

TMG как терапевтические мишени

В 2009 году GD2 был «оценен» NCI как 12-е место по приоритету среди всех клинических раковых антигенов, с дополнительными тремя ганглиозидами (GD3, фукозил-GM1 и N-ацетил GM3), включенными в список из 75 приоритетных антигенов (137). .Высокая экспрессия GD2 и GD3 при раке делает эти многообещающие мишени для терапевтического вмешательства. Более того, когда GD2 или GD3 присутствуют в раке, опухолевые клетки экспрессируют их стабильно и гомогенно, и о микрогетерогенности опухоли в отношении экспрессии TMG не сообщалось. GD2 или GD3 сохраняются на протяжении всего прогрессирования опухоли, и экспрессия, по-видимому, не снижается после химиотерапии, по крайней мере, в опубликованных исследованиях нейробластомы (138), остеосаркомы (139) и в исследовании ex vivo нескольких клеточных линий (140). .

Этиологическая роль GD2 / GD3 в онкогенезе и подавлении иммунитета — это дополнительные особенности, которые делают эти гликолипиды идеальными терапевтическими мишенями для клинической трансляции. Однако использование GD2 или GD3 было сложной задачей. Моноклональные антитела против GD2 [динутуксимаб / Ch24.18 mAb (141–143) и 3F8 mAb (144)] и GD3 [BEC2 (145), R24 (146)] достигли частичного успеха в терапии рака как пассивный иммунитет (т. Е. Введение очищенных антител против мишени). Однако они вызывают серьезные побочные эффекты, такие как сильная висцеральная боль, которая не блокируется морфином (147).В то время как mAb Ch24.18 в сочетании с GM-CSF и IL-2 стимулирует антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность и улучшает общую выживаемость при нейробластоме (141), в клинических испытаниях они имели низкую эффективность или низкий терапевтический индекс [обзор в (148)]. Совсем недавно сконструированные химерные антигенные рецепторы (CAR), экспрессирующие последовательность mAb против GD2 в Т- или NK-клетках, использовались в комбинации с ингибиторами ICB и цитокинами (149), но клетки не сохранялись в кровотоке, и лечение не показало эффективности. (150).Эта неудача неудивительна, учитывая, что CAR был сконструирован из mAb, которые также демонстрируют низкий терапевтический индекс пассивного иммунитета. В дополнение к клиническим исследованиям CAR Т-клеток, проведенным при нейробластоме и меланоме, доклинически, недавно были протестированы CAR анти-GD2 Т-клетки против рака груди (151) и диффузной средней глиомы (152).

Исторически сложилось так, что разработка вакцин против GD2 или против GD3 была безуспешной. Гликолипиды слабо иммуногенны и, как полагают, не обрабатываются антигенпрезентирующими клетками или не представлены антигенами MHC.Хотя липиды могут распознаваться специализированными CD1 (молекулы, подобные MHC класса I) — ограниченными Т-клетками, каждый ганглиозид не имеет уникального типа липидов. Фактически, липидные хвосты могут быть гетерогенными в пределах одного ганглиозида (в пределах длины углеродной цепи, степени окисления и насыщения). Следовательно, существуют лишь незначительные различия между нормальными углеводными головками GM1 и опухолевыми GD2 и GD3, и их липидные хвосты могут быть общими или могут проявлять неоднородность по всем ганглиозидам, являются ли они нормальными или TMG.Таким образом, при использовании целых TMG в качестве иммуногенов возникают опасения в отношении толерантности, перекрестной реактивности или временных и неэффективных иммунных реакций.

Несмотря на вышеупомянутые проблемы, в первоначальных попытках разработки вакцин GD2 / GD3 использовались нативные гликолипиды GD2 или GD3, химически конъюгированные с носителями (153, 154). Они были в некоторой степени иммуногенными и индуцировали гуморальные ответы, которые задерживали рост опухоли у мышей через механизм комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC). Однако титры анти-ганглиозидных антител были непродолжительными даже после нескольких иммунизаций, и не было корреляции между гуморальным титром и терапевтической эффективностью опухоли (147).

Потенциал γδ Т-клеток в нацеливании на «гликокод»

γδ Т-клетки, экспрессирующие гамма- и дельта-цепи Т-клеточного рецептора (TCR), связанные с инвариантными сигнальными цепями CD3, являются подклассом Т-лимфоцитов, определяющей характеристикой которых является их способность проявлять черты как врожденного, так и адаптивного иммунитета. системы (155). Они экспрессируют TCR, взаимодействие которого с его мишенью опосредует активацию Т-клеток. Подмножества человеческих γδ Т-клеток — подмножества у других видов будут отличаться — классифицируются в соответствии с цепью Vδ в TCR.Vδ (1-8) вместе с одной из 6 различных цепей Vγ (2–5, 8 и 9) образует зрелый TCR посредством рекомбинации V (D) J. Таким образом, они генерируют разнообразие TCR подобно обычным αβ Т-клеткам.

С другой стороны, TCR типа γδ распознают качественно различные антигены, кинетика, механизмы распознавания антигена и локализация в ткани принципиально отличаются от αβ Т-клеток. В то время как некоторые γδ Т-клетки могут находиться в циркуляции, причем Vγ9Vδ2 является основным подмножеством, соответствующим примерно 5% от общего количества CD3 ⁺ клеток на периферии (156), два других основных подмножества γδ Т-клеток, Vδ1 и Vδ3, являются преимущественно тканево-резидентный.Подобно клеткам врожденного иммунитета, γδ Т-клетки распознают мишени с широким набором кодируемых патогенами или дисрегулируемых собственных сигнатур, в отличие от специфичности, проявляемой αβ Т-клетками.

Распознавание антигена γδ Т-клетками

В отличие от αβ Т-клеток, γδ Т-клетки не полагаются на презентацию пептидов комплексом MHC антигенпрезентирующей клетки для активации. Точные механизмы распознавания Т-клеточного антигена γδ остаются областью интенсивных исследований, осложненных огромным набором структурно разнообразных классов собственных и несамолигандов, распознаваемых γδ TCR (157).Сюда входят растворимые и мембраносвязанные белки и пептиды широкого диапазона размеров, а также небелковые мишени, такие как фосфолипиды, непептидные антигены и углеводы.

Хотя часто называют MHC-неограниченным, некоторые из наиболее хорошо охарактеризованных мишеней γδ-TCR включают неклассические молекулы MHC класса I. Родственные MHC-I молекулы T10 и T22, специфически обнаруженные у мышей, были первыми лигандами, связывание которых с γδ-TCR было подтверждено биохимически (158, 159).Распознавание липидов, представленных семейством CD1 MHC класса I-подобных белков, было установлено несколько лет спустя (160–162) и является ключевым аспектом TME-связанной биологии γδ Т-клеток. Т-клетки Vδ1 и Vδ3 могут распознавать сфинголипид-α-галактозилцерамид (α-GalCer), представленный CD1d, и, как следствие, повышать выработку цитокинов, характерных для Th0 (т.е. IFNγ и IL-4), Th2 (т.е. IFNγ) и Th3 ( т.е. IL-4) клетки (163, 164). Недавно было показано, что третий тип неклассической молекулы MHC класса I, MHC-related protein 1 (MR1), является мишенью для γδ-TCR (165).Этот белок участвует в представлении микробных метаболитов, связанных с биосинтезом витамина B2, и, как известно, стимулирует особую подгруппу αβ Т-клеток, известных как инвариантные Т-клетки, связанные со слизистой оболочкой (MAIT-клетки). Интересно, что разрешенная кристаллическая структура комплекса γδTCR – MR1 – антиген обнаружила ключевое отличие от ранее предложенных способов распознавания TCR-лиганд. Было обнаружено, что γδ TCR связывается под антигенсвязывающей щелью MR1, что указывает на новый «антиген-агностический» способ взаимодействия TCR-мишень, биологические последствия которого еще не изучены.

В дополнение к мишеням, представленным как часть неклассических молекул MHC, было описано несколько типов непептидных антигенов для активации Т-клеток с помощью γδ TCR. Распознавание опухолевых клеток, в частности, усиливается за счет способности γδ Т-клеток распознавать такие антигены, которые часто являются побочными продуктами нерегулируемых опухолевых процессов (и которые не связывают молекулы MHC). Фосфоантигены или фосфорилированные непептидные антигены являются классическим примером этого принципа. Фосфоантиген изопентенилпирофосфат (IPP) накапливается в опухолевых клетках из-за дерегулированного мевалонатного пути (166) и специфически и сильно активирует Т-клетки Vγ9Vδ2 (167).Хотя первоначально считалось, что фосфоантигены непосредственно активируют γδ TCR, новые данные показывают, что это распознавание требует участия членов семейства надсемейства Ig, известных как бутирофилины. В дополнение к ранее задействованному бутирофилину 3A1 (168–170), два недавних исследования идентифицировали бутирофилин 2A1 как ключ к распознаванию фосфоантигенов γδ Т-клетками (171, 172). Ригау и др. предложили модель, в которой продукция фосфоантигена клеткой-мишенью модифицирует комплекс, состоящий из бутирофилина 3A1 и бутирофилина 2A1, заставляя его совместно связываться и активировать TCR Vγ9Vδ2.

В дополнение к активации, опосредованной рецептором TCR, следует подчеркнуть, что γδ Т-клетки также экспрессируют другие активирующие рецепторы, такие как рецепторы NK-клеток (173, 174). Основываясь на более раннем исследовании, показавшем предрасположенность к канцерогенезу в отсутствие γδ Т-клеток (175), Strid et al. показали, что активация рецептора NKG2D лигандом Rae-1 (известная как MICA у людей) на резидентных в ткани Т-клетках Vγ5Vδ1γδ ингибирует рак кожи на мышиной модели (176). Помимо кожи, роль NKG2D в активации γδ Т-клеток была дополнительно показана на периферических клетках Vγ9Vδ2 (177).В NK-клетках рецептор NKG2D ранее упоминался в этом тексте как нарушенный повышенными уровнями сиалирования опухолевых клеток. Учитывая его теперь известную функциональную роль в γδ Т-клетках, возможно, что иммуносупрессивные эффекты повышенного сиалирования раковых клеток могут распространяться на нарушенную функцию γδ Т-клеток.

γδ Т-клетки, нацеленные на углеводы в опухолевых ганглиозидах

Широкий набор мишеней, распознаваемых γδ TCR, а также другими рецепторами на γδ T-клетках, наводит на мысль об их потенциальном использовании против специфических углеводных мишеней на опухолевых клетках, таких как TMG.Однако это новая область, и конкретные примеры такой реакционной способности углеводов остаются немногочисленными.

Роль CD1d в активации γδ Т-клеток является косвенным примером пересечения сфер γδ Т-клеток и TMG. В одном исследовании GD3, выделившийся из опухоли яичника, ингибировал активацию NKT-клеток, при этом GD3 связывается с высоким сродством как к человеческому, так и к мышиному CD1d. In vivo введение GD3 подавляло индуцированную α-GalCer активацию NKT-клеток дозозависимым образом, что приводило к установлению иммуносупрессивного TME (94).Хотя экспериментально доказано только в контексте NKT-клеток, возможно, что блокада анти-GD3 взаимодействия GD3-CD1d высвободит его распознавание и последующую активацию γδ Т-клетками, обеспечивая дополнительный терапевтический эффект. Следует отметить, что взаимодействие GD3-CD1d, наоборот, может иметь иммунный активирующий эффект. Было показано, что при меланоме GD3 активирует NKT-клетки CD1d-зависимым образом (178, 179).

Ключом к потенциалу γδ Т-клеток в нацеливании на гликаны, ассоциированные с опухолью, является тот факт, что они не требуют презентации антигенов MHC.Это имеет отношение к гликобиологии опухолей, поскольку чистые углеводы обычно не представлены MHC (180). В то время как αβ Т-клетки могут распознавать гликопептиды, обработанные MHC (пептиды, присоединенные к гликану), раннее исследование определило неограниченную углеводную специфичность γδ Т-клеток (181). Кроме того, некоторые Т-клеточные эпитопы, ограниченные МНС, могут не подвергаться гликозилированию. Пептид, ограниченный H-2Kb, сохраняет способность быть представленным в его гликозилированной форме (следовательно, на представление не влияет гликозилирование пептида), поскольку связанный углевод входит в центральную область сайта связывания TCR.Следовательно, манипуляции с γδ или αβ TCR могут привести к ранее не использовавшимся стратегиям нацеливания на небелковые антигены без ограничения MHC.

Недавно мы сообщили о генерации синтетических углеводородных головных групп GD2 и GD3, отображаемых на поливалентном полиамидоаминовом каркасе (PAMAM-GD2 и PAMAM-GD3). PAMAM-GD не содержат липидов, водорастворимы, недорогие в производстве, хорошо охарактеризованы химически и структурно (включая критическую β-конфигурацию первого сахара) и идентичны головным группам природных углеводов на поверхности опухолей ( 182, 183).Эти продукты (далее называемые вакцинами) являются мощными иммуногенами — при прививке мышам они стимулируют В- и Т-клеточный иммунитет. Вакцины в качестве монотерапии обладают терапевтическим действием против четырех агрессивных и метастатических моделей сингенного рака, значительно снижая первичные опухоли, метастатическое бремя и, что важно, увеличивая общую выживаемость. Неожиданно это исследование показало рост γδ Т-клеток, опосредованный чистым углеводным дендримером. Это происходит быстро после вакцинации мышей (независимо от наличия опухоли), а у мышей с опухолью (или после заражения опухолью) следовала экспансия CD8 ⁺ Т-клеток in vivo .Адаптивный перенос относительно небольшого количества Т-клеток, выделенных после вакцинации, также является терапевтическим в опухолевых моделях (182).

Данные подтверждают мнение о том, что вакцинация может напрямую увеличивать и активировать γδ Т-клетки (и, возможно, через APC), которые затем обходят иммуносупрессивные TME и становятся TIL (Рисунок 1). Экспансия γδ Т-клеток обнаруживается у мышей с опухолью, а также у мышей без опухоли. Следовательно, хотя вакцина может также блокировать иммуносупрессивное действие TMG на Т-клетки, этот механизм вряд ли будет учитывать начальную экспансию, но может иметь отношение к противоопухолевой эффективности.За начальным ростом γδ Т-клеток следует вторая волна экспансии и рекрутирования эффекторных TIL CD8 ⁺. Способность γδ Т-клеток активировать другие подмножества Т-клеток была показана ранее (184, 185). Возможно, что вторая волна эффекторных TIL CD8 ⁺ распознает неоантигены, представленные или выделенные поврежденными или подвергнутыми стрессу опухолевыми клетками. Мы отмечаем, что хотя in vivo Т-клеточная память, генерируемая гликомиметическими вакцинами, не оценивалась, гуморальный иммунитет против TMG созревает и переключает класс с IgM на IgG и является суррогатным маркером памяти.

Рисунок 1 . Гликомиметические вакцины TMG механизмы активации иммунной системы. После системной доставки вакцинных антигенов (1) происходит быстрое размножение γδ Т-клеток. Неизвестно, увеличиваются ли γδ TCR за счет связывания непосредственно с вакцинным гликомиметическим продуктом, или антиген представлен DC. Экспансия γδ Т-клеток не зависит от того, есть ли у мышей опухоли, экспрессирующие TMG, поэтому, хотя вакцина может также блокировать иммуносупрессивное действие TMG на Т-клетки, этот механизм вряд ли может объяснить начальное увеличение.(2) У мышей с опухолями, экспрессирующими TMG, вакцинация приводит к значительному увеличению TIL γδ Т-клеток. (3) Эффекторная активность генерирует вторичные антигены или неоантигены. (4) Предполагаемые неоантигены (еще не идентифицированные) циркулируют и представляются CD8 + αβ Т-клеткам, которые (5, 6) расширяются в виде второй волны, в основном состоящей из CD8 + Т-клеток, которые также становятся TIL. Генерация in vivo Т-клеток памяти в гликомиметических вакцинах не оценивалась. Однако гуморальный иммунитет против TMG (оцениваемый как суррогатный маркер) созревает и переключает класс с IgM на IgG.

Механизм действия вакцин PAMAM-GD2 и GD3 и роль γδ Т-клеток в обеспечении иммунитета против TMG меняют парадигму, поскольку практически все предыдущие экспериментальные и клинические данные с использованием вакцин, направленных против TMG, были сосредоточены на гуморальном иммунитете, а не на гуморальном иммунитете. на клеточный иммунитет. Такое предубеждение, возможно, было вызвано ранними многообещающими результатами использования mAb против TMG в качестве терапевтических агентов.

Т-клетки γδ восприимчивы к ингибированию, опосредованному PD-1 (186, 187), и опухолевые модели, в которых оценивались вакцины, экспрессируют высокие уровни PD-L1.Высокая терапевтическая эффективность предполагает, что вакцины частично преодолевают ингибирующие эффекты PD-L1 на γδ Т-клетки. Текущие исследования оценивают, может ли комбинированная терапия с ICB усилить противораковые эффекты вакцин.

Адоптивный перенос Т-клеток, выделенных от вакцинированных мышей, привел к появлению γδ Т-клеток в виде TIL и к высокому терапевтическому индексу. Однако в исследовании не оценивалась последовательность TCR γδ, которые были увеличены, и не рассматривалось, связываются ли продукты гликомиметической вакцины непосредственно с TCR γδ или, например, через CD1.Более того, антигены и механизм, вызывающий вторую волну экспансии Т-лимфоцитов CD8 ⁺, независимо от того, зависит ли это от Т-лимфоцитов и имеет ли это терапевтическое значение, являются ключевыми для правильной разработки будущей противораковой вакцины. Гликомиметическая противораковая вакцина TMG — это захватывающий подход, который требует дальнейшей оценки иммунных механизмов и связей между TMG и γδ Т-клетками. Также следует отметить, что концепция использования γδ Т-клеток и нацеливания сахаров для лечения рака изучается на предмет нераковых патологий, начиная от антивирусной, антибактериальной и антипаразитарной терапии (188–191) до аутоиммунной. болезни (192).

Терапевтическое нацеливание на γδ Т-клетки

Научная литература, касающаяся клинической эффективности терапии γδ Т-клетками, в целом положительна, что поддерживает дальнейшие исследования их использования в клинических условиях (156, 193). Исследования, проведенные до сих пор, включали пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями (фолликулярная лимфома, множественная миелома и острый миелоидный лейкоз) и негематологическими опухолями, такими как почечно-клеточный рак, рак груди и простаты (194). Клетки Vδ1 + показали многообещающие результаты доклинически (195), и инфильтрация этих клеток коррелировала с некротизирующими опухолями и выживаемостью пациентов при меланоме (196).Однако в большинстве клинических исследований использовались Т-клетки Vγ9Vδ2 из-за их относительно высокой доступности в периферической крови и их способности культивировать, размножать и активировать ex vivo . Чтобы активировать Т-клетки Vγ9Vδ2, можно использовать опосредованную бутирофилином реактивность TCR Vγ9Vδ2 к фосфоантигенам, используя химические соединения для повышения или имитации экспрессии фосфоантигенов либо на опухолевых клетках, либо на антигенпрезентирующих клетках в TME. К таким соединениям относятся аминобисфосфонаты (например, памидронат и золедронат) или синтетические аналоги фосфоантигена (197, 198).Этот подход предлагает полезный инструмент для размножения, но не обязательно является полезным терапевтическим подходом, поскольку размноженные Т-клетки Vγ9Vδ2 почти моноклональны и не специфичны для желаемого антигена. Действительно, клинический ответ в исследованиях, проведенных до сих пор, был минимальным [см. Обзоры (199) и (200)]. Таким образом, эти эксперименты представляют собой исследование биологии Т-лимфоцитов с некоторым исследованием параметров безопасности. Кроме того, клинические данные убедительно указывают на необходимость использования комбинаторного подхода с другими видами иммунной терапии для максимальной эффективности (193, 201).Даже с этими ограничениями первые опубликованные результаты обнадеживают (193).

CAR γδT клеточная терапия

Т-клетки, сконструированные для экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR), составляют ветвь иммунотерапии, которая сочетает антигенную специфичность моноклональных антител с сигнальными мотивами рецепторов, чтобы способствовать пролиферации цитотоксических эффекторных Т-клеток. CAR-терапия успешно применялась при нескольких типах гематологических злокачественных новообразований (202–204), и хотя перенос в солидные опухоли был несколько ограничен, сообщалось о некотором успехе с CAR при раке груди (151) и диффузной средней глиоме (152).

Возможно, что сконструированные CAR Т-клетки, как и природные Т-клетки, ограничены иммуносупрессивным TME. Это может нарушить набор, функцию и выживаемость Т-клеток. В этом контексте γδ CAR Т-клетки являются интересной альтернативной мишенью. Трансдукция γδ Т-клеток с помощью CAR может направлять их цитотоксическую активность специфически против опухолевого антигена, сохраняя при этом другие их полезные свойства, такие как способность перекрестно презентировать антиген αβ Т-клеткам. Более того, ключевым преимуществом природы γδ Т-клеток без ограничения MHC является то, что препараты CAR γδ Т-клеток могут быть созданы и размножены из объединенных здоровых доноров.

Чтобы максимизировать эффективность CAR-терапии, идеальный антиген для генерации CAR должен быть опухолеспецифичным, высоко и стабильно экспрессироваться всеми злокачественными клетками и этиологически влиять на развитие опухоли. Подчеркивая терапевтический потенциал TMG, в одном из первых исследований по созданию γδ CAR Т-клеток был использован антиген GD2 (205). Авторы сообщили, что GD2-CAR подмножеств Vδ1 и Vδ2 были увеличены в количестве, достаточном для клинических исследований. Экспрессия GD2-CAR γδ Т-клетками усиливала их врожденную цитотоксичность, направляя ее эффекты против опухолевых клеток, экспрессирующих GD2.Дальнейшее усиление противоопухолевого иммунного ответа, увеличенные CAR-трансдуцированные клетки Vδ2 сохраняли способность интернализировать и перекрестно представлять опухолевые антигены αβТ-лимфоцитам.

Первоначально считалось, что

γδ Т-клеткам не хватает памяти, и это было проблемой при разработке терапии CAR γδ Т-клетками. Недостаток памяти потенциально приводит к короткоживущим противоопухолевым ответам, но это можно преодолеть, используя терапию Т-клетками CAR γδ в нескольких циклах лечения. Обнадеживает недавние данные исследований на мышах и людях, предполагающие, что γδ Т-клетки действительно обладают характеристиками, напоминающими αβ Т-лимфоциты памяти, способствуя антиген-специфическому адаптивному иммунитету (206–209).Например, у мышей, инфицированных B. pertussis, было показано, что резидентные в легких γδ Т-клетки памяти увеличиваются при вторичной инфекции с увеличением продукции цитокина, IL-17 (207). Доказано, что у людей Vδ1 + и Vδ2 + γδ Т-клетки способствуют микробиоспецифическому адаптивному иммунитету (208, 209).

Заключительные замечания

Концепция «гликокода» (6, 210) предполагает, что гликозилирование белка — при этом сиаловые кислоты, по-видимому, являются ключевыми — регулирует биологические события, которые имеют решающее значение для иммунитета и прогрессирования рака, сравнимо, но не только, с типом PD-1. блокировки КПП.Эта концепция распространяется на гликозилирование мембранных и матричных белков, муцинов и ганглиозидов, где TMG представляют собой гликоиммунную контрольную точку. Вакцины, антитела, небольшие молекулы, растворимые гликопротеины, ферментативное расщепление сиаловых кислот или растворимые конкуренты, нацеленные на гликоиммунную контрольную точку, могут быть многообещающим подходом к терапии (211).

Будет важно рассмотреть биологию γδ Т-клеток в контексте стратегий, нацеленных на гликокод и сиаловую кислоту, содержащий белки и ганглиозиды.В таблице 2 показано сравнение характеристик различных видов иммунотерапии рака, в том числе многих, которые имеют механизм действия γδ Т-клеток. В таблице 2 представлен наш взгляд на их относительные преимущества и недостатки. Мы представляем обзор их текущего этапа развития, который мы рассматриваем как эталон времени, в течение которого каждый подход находился в разработке (с учетом времени и инвестиций ресурсов), и степени ожидания успеха. Однако, исходя из истории, ожидается, что большинство подходов, возможно, найдет узкую нишу или указание на то, где они могут быть полезны.К сожалению, большинство из них либо потерпят неудачу клинически, либо столкнутся со сложными нормативными препятствиями, либо станут несостоятельными на рынке.

Таблица 2 . Иммунотерапевтические подходы с участием γδ T-клеток или γδ TCR.

Наша работа по разработке гликомиметических вакцин неожиданно привела к ранней активации γδ Т-клеток in vivo и к высокой терапевтической эффективности при раке. Помимо рака, концептуально этот прогресс применим к терапии других патологий (например,g., противовирусные препараты), которые могут получить пользу от активации врожденной и адаптивной иммунных систем за счет нацеливания на сиаловые кислоты и другие гликаны.

Авторские взносы

Все перечисленные авторы внесли существенный, прямой и интеллектуальный вклад в работу и одобрили ее к публикации.

Финансирование

Для этой работы HS получил финансирование от Канадских институтов исследований в области здравоохранения (CIHR) (PJT-162291), CIHR Proof-of-Principle Tier 1 (POP-1) и сети центров передового опыта GlycoNet.SR финансировалась CIHR (PJT-162260), Междисциплинарной инициативой МакГилла по инфекциям и иммунитету (Mi4) и Фондом Коула. CR был поддержан премией Канадского института исследований в области здравоохранения (159912).

Конфликт интересов

HS является автором патентов на вакцины против TMG.

Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Список литературы

3. Харгадон К.М., Джонсон К.Э., Уильямс С.Дж. Терапия блокадой иммунных контрольных точек при раке: обзор одобренных FDA ингибиторов иммунных контрольных точек. Int Immunopharmacol. (2018) 62: 29–39. DOI: 10.1016 / j.intimp.2018.06.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Хаслам А., Прасад В. Оценка процента пациентов с онкологическими заболеваниями в США, которые имеют право на лечение ингибиторами контрольных точек иммунотерапевтическими препаратами и отвечают на них. JAMA Netw Open. (2019) 2: e192535. DOI: 10.1001 / jamanetworkopen.2019.2535

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5. Peixoto A, Relvas-Santos M, Azevedo R, Santos LL, Ferreira JA. Гликозилирование белков и изменения микросреды опухоли, определяющие признаки рака. Передний Онкол. (2019) 9: 380. DOI: 10.3389 / fonc.2019.00380

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

8. Газарян Х., Идони Б., Оппенгеймер С.Б.Обзор гликобиологии: углеводы, лектины и их значение в терапии рака. Acta Histochem. (2011) 113: 236–47. DOI: 10.1016 / j.acthis.2010.02.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Хакомори С. Злокачественность опухоли, определяемая аберрантным гликозилированием и метаболизмом сфинго (глико) липидов. Cancer Res . (1996) 56: 5309–18.

PubMed Аннотация | Google Scholar

15. Ганьон М., Сарагови HU. Ганглиозиды: терапевтические средства или терапевтические мишени? Мнение экспертов Ther Patents. (2002) 12: 1215–23. DOI: 10.1517 / 13543776.12.8.1215

CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. Heimburg-Molinaro J, Lum M, Vijay G, Jain M, Almogren A, Rittenhouse-Olson K. Противораковые вакцины и углеводные эпитопы. Вакцина. (2011) 29: 8802–26. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2011.09.009

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Sedlacek HH, Meesmann H, Seiler FR. Регресс спонтанных опухолей молочной железы у собак после инъекции обработанных нейраминидазой опухолевых клеток. Int J Cancer. (1975) 15: 409–16. DOI: 10.1002 / ijc.2

0307

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

19. Коэн М., Элькабец М., Перлмуттер М., Поргадор А., Воронов Е., Апте Р.Н. и др. Сиалирование фибросаркомы, индуцированной 3-метилхолантреном, определяет противоопухолевые иммунные ответы во время иммуноредактирования. J Immunol. (2010) 185: 5869–78. DOI: 10.4049 / jimmunol.1001635

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23.Macauley MS, Pfrengle F, Rademacher C, Nycholat CM, Gale AJ, von Drygalski A, et al. Антигенные липосомы, содержащие лиганды CD22, индуцируют антиген-специфический апоптоз В-клеток. J Clin Invest. (2013) 123: 3074–83. DOI: 10.1172 / JCI69187

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Lanoue A, Batista FD, Stewart M, Neuberger MS. Взаимодействие CD22 с альфа2,6-связанными сиалогликоконъюгатами: врожденное распознавание себя для снижения аутореактивности В-клеток? Eur J Immunol. (2002) 32: 348–55. DOI: 10.1002 / 1521-4141 (200202) 32: 2 <348 :: AID-IMMU348> 3.0.CO; 2-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Macauley MS, Paulson JC. Сиглек индуцирует толерантность к антигенам клеточной поверхности за счет BIM-зависимой делеции антиген-реактивных В-клеток. J Immunol. (2014) 193: 4312–21. DOI: 10.4049 / jimmunol.1401723

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

26. Худак Дж. Э., Канхэм С. М., Бертоцци ЧР.Гликокаликс-инженерия раскрывает основанный на Siglec механизм иммуноубийства NK-клеток. Nat Chem Biol. (2014) 10: 69–75. DOI: 10.1038 / nchembio.1388

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

27. Jandus C, Boligan KF, Chijioke O, Liu H, Dahlhaus M, Demoulins T, et al. Взаимодействие между рецепторами Siglec-7/9 и лигандами влияет на зависимый от NK-клеток иммунный надзор за опухолью. J Clin Invest. (2014) 124: 1810–20. DOI: 10.1172 / JCI65899

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

28.Фалько М., Биассони Р., Боттино С., Витале М., Сивори С., Аугульяро Р. и др. Идентификация и молекулярное клонирование p75 / AIRM1, нового члена семейства сиалоадгезинов, который функционирует как ингибиторный рецептор в естественных клетках-киллерах человека. J Exp Med. (1999) 190: 793–802. DOI: 10.1084 / jem.190.6.793

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

29. Хуан С.Х., Ляо Ю.Дж., Фан Т.Дж., Чиу Т.Дж., Лин Ю.Х., Тву Ю.С. Развитая линия клеток NK-92MI с фенотипом Siglec-7 (neg) проявляет высокую и устойчивую цитотоксичность в отношении лейкозных клеток. Int J Mol Sci. (2018) 19: 1073. DOI: 10.3390 / ijms1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Битсон Р., Таджадура-Ортега В., Ачкова Д., Пикко Г., Цурукцоглу Т.Д., Клаузинг С. и др. Муцин MUC1 модулирует иммунологическое микроокружение опухоли за счет вовлечения лектина Siglec-9. Nat Immunol. (2016) 17: 1273–81. DOI: 10.1038 / ni.3552

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31.Takamiya R, Ohtsubo K, Takamatsu S, Taniguchi N, Angata T. Взаимодействие между Siglec-15 и ассоциированным с опухолью сиалил-Tn антигеном усиливает секрецию TGF-бета из моноцитов / макрофагов по пути DAP12-Syk. Гликобиология. (2013) 23: 178–87. DOI: 10.1093 / glycob / cws139

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

32. Баркал А.А., Брюер Р.Э., Маркович М., Коварски М., Баркал С.А., Заро Б.В. и др. Передача сигнала CD24 через макрофаг Siglec-10 является мишенью для иммунотерапии рака. Природа. (2019) 572: 392–6. DOI: 10.1038 / s41586-019-1456-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

33. Santegoets KCM, Gielen PR, Bull C, Schulte BM, Kers-Rebel ED, Kusters B, et al. Профилирование экспрессии иммунных ингибиторов сиглеков и их лигандов у пациентов с глиомой. Cancer Immunol Immunother. (2019) 68: 937–49. DOI: 10.1007 / s00262-019-02332-w

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

34.Perdicchio M, Ilarregui JM, Verstege MI, Cornelissen LA, Schetters ST, Engels S, et al. Антигены, модифицированные сиаловой кислотой, вызывают толерантность за счет ингибирования пролиферации Т-клеток и индукции de novo регуляторных Т-клеток. Proc Natl Acad Sci USA. (2016) 113: 3329–34. DOI: 10.1073 / pnas.1507706113

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Stanczak MA, Siddiqui SS, Trefny MP, Thommen DS, Boligan KF, von Gunten S, et al. Самоассоциированные молекулярные паттерны опосредуют уклонение от ракового иммунитета, задействуя Siglecs на Т-клетках. J Clin Invest. (2018) 128: 4912–23. DOI: 10.1172 / JCI120612

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

36. Хаас К., Болиган К.Ф., Джандус К., Шнайдер С., Симиллион С., Станчак М.А. и др. Сиглек-9 регулирует субпопуляцию эффекторных CD8 (+) Т-клеток памяти, которые собираются в микроокружении меланомной опухоли. Cancer Immunol Res. (2019) 7: 707–18. DOI: 10.1158 / 2326-6066.CIR-18-0505

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

37.Ван Дж., Сун Дж., Лю Л.Н., Мухи Д.Б., Ни Икс, Токи М. и др. Сиглек-15 как иммуносупрессор и потенциальная мишень для нормализующей иммунотерапии рака. Nat Med. (2019) 25: 656–66. DOI: 10.1038 / s41591-019-0374-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

38. Bull C, Boltje TJM, Wassink de Graaf AM, van Delft FL, den Brok MH, Adema GJ. Нацеливание на аберрантное сиалирование в раковых клетках с использованием аналога фторированной сиаловой кислоты ухудшает адгезию, миграцию и рост опухоли in vivo . Mol Cancer Ther. (2013) 12: 1935–46. DOI: 10.1158 / 1535-7163.MCT-13-0279

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

39. Булл С., Болтье Т.Дж., ван Динтер Э.А., Петерс Т., де Грааф А.М., Леусен Дж. Х. и др. Направленная доставка гликомиметика, блокирующего сиаловую кислоту, в раковые клетки препятствует метастатическому распространению. САУ Nano. (2015) 9: 733–45. DOI: 10.1021 / nn5061964

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

40.Риос А., Симмонс Р.Л. Иммуноспецифическая регрессия различных сингенных опухолей мышей в ответ на опухолевые клетки, обработанные нейраминидазой. J Natl Cancer Inst. (1973) 51: 637–44.

PubMed Аннотация | Google Scholar

41. Sedlacek HH, Seiler FR. Иммунотерапия опухолевых заболеваний нейраминидазой: противоречия, новые аспекты, пересмотренные концепции. Cancer Immunol Immunother. (1978) 5: 153–63. DOI: 10.1007 / BF00199623

CrossRef Полный текст | Google Scholar

44.Сяо Х., Вудс Е.К., Вукожичич П., Бертоцци ЧР. Прецизионное редактирование гликокаликса как стратегия иммунотерапии рака. Proc Natl Acad Sci USA. (2016) 113: 10304–9. DOI: 10.1073 / pnas.1608069113

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

46. Ивабучи К., Чжан Й., Ханда К., Уизерс Д.А., Синай П., Хакомори С. Восстановление мембран, имитирующих «гликосигнальный домен», и их чувствительность к лизо-GM3. J Biol Chem. (2000) 275: 15174–81.DOI: 10.1074 / jbc.275.20.15174

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

49. Се Х, Ву Г, Лу Чж, Ледин РВ. Усиление натрий-кальциевого обменника в ядерной оболочке ядерным ганглиозидом GM1. J Neurochem. (2002) 81: 1185–95. DOI: 10.1046 / j.1471-4159.2002.00917.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

50. Муто Т., Токуда А., Миядай Т., Хамагути М., Фуджики Н. Ганглиозид GM1 связывается с белком Trk и регулирует функцию рецептора. Proc Natl Acad Sci USA. (1995) 92: 5087–91. DOI: 10.1073 / pnas.92.11.5087

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

52. Элькашеф С.М., Эллисон С.Дж., Садик М., Башир Х.А., Рибейро Мораис Дж., Лоутман П.М. и др. Полисиаловая кислота поддерживает выживание раковых клеток и способность к миграции в гипоксической среде. Научный доклад (2016) 6: 33026. DOI: 10.1038 / srep33026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

53.Хеттмер С., Ладиш С., Каучич К. Низкая экспрессия комплексных ганглиозидов характеризует клеточные линии нейробластомы человека. Cancer Lett. (2005) 225: 141–9. DOI: 10.1016 / j.canlet.2004.11.036

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

54. Муджу К., Череш Д.А., Ян Х.М., Райсфельд Р.А. Дизиалоганглиозид GD2 на клетках нейробластомы человека: антиген-мишень для цитолиза, опосредованного моноклональными антителами, и подавления роста опухоли. Cancer Res. (1987) 47: 1098–104.

PubMed Аннотация | Google Scholar

55. Cheresh DA, Pierschbacher MD, Herzig MA, Mujoo K. Дизиалоганглиозиды GD2 и GD3 участвуют в прикреплении клеток меланомы и нейробластомы человека к белкам внеклеточного матрикса. J Cell Biol. (1986) 102: 688–96. DOI: 10.1083 / jcb.102.3.688

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

56. Козырески-Чубак Д., Ву Г., Ледин Р. В.. Появление ядерного GM1 в нейронах центральной и периферической нервной системы. Brain Res Dev Brain Res. (1999) 115: 201–8. DOI: 10.1016 / S0165-3806 (99) 00062-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

57. Каванна Б., Карпо М., Педотти Р., Скарпини Е., Меуччи Н., Аллария С. и др. Антитела IgM к GM2: клинические корреляты и реактивность с клеточной линией нейробластомы человека. J Neuroimmunol. (1999) 94: 157–64. DOI: 10.1016 / S0165-5728 (98) 00245-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

58.Vrionis FD, Wikstrand CJ, Fredman P, Mansson JE, Svennerholm L, Bigner DD. Пять новых моноклональных антител с определенным эпитопом, реагирующих с GM2 и клеточными линиями глиомы и медуллобластомы человека. Cancer Res. (1989) 49: 6645–51.

PubMed Аннотация | Google Scholar

59. Миркин Б.Л., Кларк С.Х., Чжан С. Ингибирование пролиферации клеток нейробластомы человека и фосфорилирования рецептора EGF ганглиозидами GM1, GM3, GD1A и GT1B. Cell Prolif. (2002) 35: 105–15.DOI: 10.1046 / j.1365-2184.2002.00228.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

60. Hildebrandt H, Becker C, Gluer S, Rosner H, Gerardy-Schahn R, Rahmann H. Полисиаловая кислота на молекуле адгезии нервных клеток коррелирует с экспрессией полисиалилтрансфераз и способствует росту клеток нейробластомы. Cancer Res. (1998) 58: 779–84.

PubMed Аннотация | Google Scholar

61. Валентин У., Мюленхофф М, Леманн У., Хильдебрандт Х., Шумахер У.Экспрессия молекулы адгезии нервных клеток и полисиаловой кислоты в клеточных линиях нейробластомы человека. Int J Oncol. (2011) 39: 417–24. DOI: 10.3892 / ijo.2011.1038

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

62. Пукел С.С., Ллойд К.О., Травассос Л.Р., Дипполд В.Г., Этген Х.Ф., Старый ЖЖ. GD3, известный ганглиозид меланомы человека. Обнаружение и характеристика мышиными моноклональными антителами. J Exp Med. (1982) 155: 1133–47. DOI: 10.1084 / jem.155.4.1133

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

64. Хун Д.С., Андо И., Свиланд Дж., Цучида Т., Окун Е., Мортон Д.Л. и др. Экспрессия ганглиозида GM2 на клетках меланомы человека коррелирует с чувствительностью к лимфокин-активированным клеткам-киллерам. Int J Cancer. (1989) 43: 857–62. DOI: 10.1002 / ijc.2

0520

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

66. Mennel HD, Bosslet K, Wiegandt H, Sedlacek HH, Bauer BL, Rodden AF.Экспрессия GD2-эпитопов в внутричерепных опухолях человека и нормальном мозге. Exp Toxicol Pathol. (1992) 44: 317–24. DOI: 10.1016 / S0940-2993 (11) 80218-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

67. Лама Г., Мангиола А., Проитти Г., Колабианки А., Ангелуччи С., А. Д. А. и др. Маркеры предшественников / стволовых клеток в мозге, прилегающем к глиобластоме: экспрессия ганглиозида GD3 и протеогликана NG2. J Neuropathol Exp Neurol. (2016) 75: 134–47. DOI: 10.1093 / jnen / nlv012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

68. Окава Й., Момота Х., Като А., Хашимото Н., Цуда Й., Котани Н. и др. Ганглиозид GD3 усиливает инвазивность глиом, образуя комплекс с рецептором альфа-фактора роста тромбоцитов и киназой yes. J Biol Chem. (2015) 290: 16043–58. DOI: 10.1074 / jbc.M114.635755

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

69. Биркс С.М., Данкуа Дж.О., Кинг Л., Власак Р., Горецки О.К., Пилкингтон Г.Дж.Нацеливание на путь ацетилирования GD3 избирательно индуцирует апоптоз в глиобластоме. Neuro Oncol. (2011) 13: 950–60. DOI: 10.1093 / neuonc / nor108

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

70. Хедберг К.М., Махеспаран Р., Рид Т.А., Тайснес Б.Б., Торсен Ф., Вистед Т. и др. Связанные с глиомой ганглиозиды 3′-isoLM1, GD3 и GM2 демонстрируют селективную экспрессию области в ксенотрансплантатах глиобластомы человека в головном мозге голых крыс. Neuropathol Appl Neurobiol. (2001) 27: 451–64.DOI: 10.1046 / j.1365-2990.2001.00353.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

71. Фудзимото Ю., Изумото С., Сузуки Т., Киношита М., Кагава Н., Вада К. и др. Ганглиозид GM3 подавляет распространение и инвазию глиомы. J Neurooncol. (2005) 71: 99–106. DOI: 10.1007 / s11060-004-9602-3

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

73. Басси Р., Виани П., Джуссани П., Рибони Л., Теттаманти Г. Ганглиозид GM3 ингибирует опосредованную эндотелином-1 передачу сигнала в клетках глиомы C6. FEBS Lett. (2001) 507: 101–4. DOI: 10.1016 / S0014-5793 (01) 02966-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

74. Trouillas J, Daniel L, Guigard MP, Tong S, Gouvernet J, Jouanneau E, et al. Полисиалированные молекулы адгезии нервных клеток, экспрессируемые в опухолях гипофиза человека и связанные с экстраселлярной инвазией. J Neurosurg. (2003) 98: 1084–93. DOI: 10.3171 / jns.2003.98.5.1084

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

75.Brezicka FT, Olling S, Nilsson O, Bergh J, Holmgren J, Sorenson S и др. Иммуногистологическое определение ганглиозида фукозил-GM1 при раке легких и нормальных тканях человека с помощью моноклональных антител. Cancer Res. (1989) 49: 1300–5.

PubMed Аннотация | Google Scholar

76. Ямада Т., Бандо Х, Такеучи С., Кита К., Ли К., Ван В. и др. Генетически сконструированное гуманизированное антитело против ганглиозида GM2 против множественных метастазов органов, продуцируемых экспрессирующими GM2 клетками мелкоклеточного рака легкого. Cancer Sci. (2011) 102: 2157–63. DOI: 10.1111 / j.1349-7006.2011.02093.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

77. Бланко Р., Домингес Э., Моралес О., Бланко Д., Мартинес Д., Ренгифо С.Э. и др. Прогностическое значение экспрессии ганглиозида N-гликолил GM3 у пациентов с немелкоклеточной карциномой легкого: новые доказательства. Патолог Res Int. (2015) 2015: 132326. DOI: 10.1155 / 2015/132326

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

78.Хаяси Н., Чиба Х., Куронума К., Го С., Хасегава Й., Такахаши М. и др. Обнаружение N-гликолированных ганглиозидов при немелкоклеточном раке легкого с использованием моноклональных антител GMR8. Cancer Sci. (2013) 104: 43–7. DOI: 10.1111 / cas.12027

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

81. Liang JX, Liang Y, Gao W. Клинико-патологическое и прогностическое значение сверхэкспрессии сиалила Lewis X у больных раком: метаанализ. Onco Targets Ther. (2016) 9: 3113–25. DOI: 10.2147 / OTT.S102389

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

84. Ватараи С., Киура К., Шигето Р., Шибаяма Т., Кимура И., Ясуда Т. Создание моноклональных антител, специфичных для ганглиозида GM1: обнаружение ганглиозида GM1 в клеточных линиях и тканях мелкоклеточной карциномы легких. J Biochem. (1994) 116: 948–54. DOI: 10.1093 / oxfordjournals.jbchem.a124651

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

85.Лян Й.Дж., Дин Й., Ливери С.Б., Лобатон М., Ханда К., Хакомори С.И. Профили дифференциальной экспрессии гликосфинголипидов в стволовых клетках рака молочной железы человека по сравнению с раковыми не стволовыми клетками. Proc Natl Acad Sci USA. (2013) 110: 4968–73. DOI: 10.1073 / pnas.1302825110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

86. Стинакерс А., Ванбезелэр Дж., Казет А., Бобовски М., Ромбоутс Y, Коломб Ф. и др. Накопление необычных ганглиозидов G (Q3) и G (P3) в клетках рака груди, экспрессирующих G (D3) синтазу. Molecules. (2012) 17: 9559–72. DOI: 10.3390 / молекулы17089559

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

87. Бобовски М., Винсент А., Стинакерс А., Коломб Ф., Ван Сёнинген И., Жюльен С. и др. Эстрадиол подавляет экспрессию гена G (D3) синтазы ST8SIA1 в клетках рака груди человека, предотвращая связывание NFkappaB с промотором ST8SIA1. PLoS ONE. (2013) 8: e62559. DOI: 10.1371 / journal.pone.0062559

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

88.Wang X, Li X, Zeng YN, He F, Yang XM, Guan F. Повышенная экспрессия полисиаловой кислоты коррелирует со злокачественным фенотипом в клеточных линиях рака груди и клинических образцах тканей. Int J Mol Med. (2016) 37: 197–206. DOI: 10.3892 / ijmm.2015.2395

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

89. Дас Т., Са Джи, Хилстон К., Кудо Д., Рэйман П., Бисвас К. и др. GM1 и фактор некроза опухоли-альфа, сверхэкспрессируемый при почечно-клеточной карциноме, взаимодействуют друг с другом, вызывая апоптоз Т-клеток. Cancer Res. (2008) 68: 2014–23. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-07-6037

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

90. Бисвас К., Ричмонд А., Рэйман П., Бисвас С., Торнтон М., Са Г. и др. Экспрессия GM2 при почечно-клеточной карциноме: потенциальная роль в индуцированной опухолью дисфункции Т-клеток. Cancer Res. (2006) 66: 6816–25. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-06-0250

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

91. Сакакибара Н., Гаса С., Камио К., Макита А., Нономура К., Тогаши М. и др.Отличительные паттерны гликолипидов в опухоли Вильмса и почечно-клеточной карциноме. Cancer Lett. (1991) 57: 187–92. DOI: 10.1016 / 0304-3835 (91)

-B

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

92. Borzym-Kluczyk M, Radziejewska I, Cechowska-Pasko M. Повышенная экспрессия MUC1 и сиалиловых антигенов Льюиса в различных областях светлой почечно-клеточной карциномы. Clin Exp Nephrol. (2015) 19: 732–7. DOI: 10.1007 / s10157-014-1013-y

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

93.Ravindranath MH, Muthugounder S, Presser N, Selvan SR, Santin AD, Bellone S и др. Иммуногенные ганглиозиды при раке яичников человека. Biochem Biophys Res Commun. (2007) 353: 251–8. DOI: 10.1016 / j.bbrc.2006.12.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

94. Уэбб Т.Дж., Ли Х, Джунтоли Р.Л. 2-й, Лопес П.Х., Хойзер С., Шнаар Р.Л. и др. Молекулярная идентификация GD3 как супрессора врожденного иммунного ответа при раке яичников. Cancer Res. (2012) 72: 3744–52. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-11-2695

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

95. Prinetti A, Aureli M, Illuzzi G, Prioni S, Nocco V, Scandroglio F и др. Сверхэкспрессия GM3-синтазы приводит к снижению подвижности клеток и усилению регуляции кавеолина-1 в клетках карциномы яичников человека. Гликобиология. (2010) 20: 62–77. DOI: 10.1093 / glycob / cwp143

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

96.Чанг Х.Р., Кордон-Кардо С., Хоутон А.Н., Чунг Н.К., Бреннан М.Ф. Экспрессия дизиалоганглиозидов GD2 и GD3 на саркомах мягких тканей человека. Рак. (1992) 70: 633–8.

PubMed Аннотация | Google Scholar

97. Хайнер Дж. П., Миральди Ф., Каллик С., Макли Дж., Нили Дж., Смит-Менса WH и др. Локализация GD2-специфического моноклонального антитела 3F8 в остеосаркоме человека. Cancer Res. (1987) 47: 5377–81.

PubMed Аннотация | Google Scholar

98.Сибуя Х., Хамамура К., Хотта Х., Мацумото Й., Нисида Й., Хаттори Х. и др. Усиление злокачественных свойств клеток остеосаркомы человека дисиалиловыми ганглиозидами GD2 / GD3. Cancer Sci. (2012) 103: 1656–64. DOI: 10.1111 / j.1349-7006.2012.02344.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

99. Добренков К., Островная И., Гу Дж., Чунг И.Ю., Чунг Н.К. Онкогенные мишени GD2 и GD3 высоко экспрессируются в саркомах детей, подростков, молодых людей. Рак крови у детей. (2016) 63: 1780–5. DOI: 10.1002 / pbc.26097

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

100. Липински М., Брахам К., Филип И., Вильс Дж., Филип Т., Горидис С. и др. Связанные с нейроэктодермой антигены на клеточных линиях саркомы Юинга. Cancer Res. (1987) 47: 183–7.

PubMed Аннотация | Google Scholar

101. Кайлаянгири С., Альтватер Б., Мельцер Дж., Пшерер С., Люке А., Диркес С. и др. Ганглиозидный антиген G (D2) экспрессируется на поверхности в саркоме Юинга и обеспечивает независимое от MHC иммунное нацеливание. руб. J Рак. (2012) 106: 1123–33. DOI: 10.1038 / bjc.2012.57

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

102. Скурсони А.М., Галуццо Л., Камареро С., Лопес Дж., Любенецки Ф., Сампор С. и др. Обнаружение ганглиозида N-гликолил GM3 в нейроэктодермальных опухолях с помощью иммуногистохимии: привлекательная мишень для вакцины от агрессивного педиатрического рака. Clin Dev Immunol. (2011) 2011: 245181. DOI: 10.1155 / 2011/245181

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

103.Модак С., Джеральд В., Чунг Н.К. Дизиалоганглиозид GD2 и новый опухолевый антиген: потенциальные мишени для иммунотерапии десмопластической мелкоклеточной опухоли. Med Pediatr Oncol. (2002) 39: 547–51. DOI: 10.1002 / mpo.10151

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

105. Торбидони А.В., Скурсони А., Камареро С., Сегатори В., Габри М., Алонсо Д. и др. Иммунореактивность Mab 14F7 против N-гликолил GM3 ганглиозида в опухолях ретинобластомы. Acta Ophthalmol. (2015) 93: e294–300. DOI: 10.1111 / aos.12578

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

106. Скурсони А.М., Галуццо Л., Камареро С., Поццо Н., Габри М.Р., де Акоста С.М. и др. Обнаружение и характеристика N-гликолизированных ганглиозидов в опухоли Вильмса с помощью иммуногистохимии. Pediatr Dev Pathol. (2010) 13: 18–23. DOI: 10.2350 / 08-10-0544.1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

107. Рот Дж., Цубер С., Вагнер П., Блаха И., Биттер-Суэрманн Д., Хайц ПУ.Наличие длинноцепочечной формы полисиаловой кислоты молекулы адгезии нервных клеток в опухоли Вильмса. Идентификация молекулы клеточной адгезии как антигена развития и ее значение для гистогенеза опухоли. A м. J Pathol . (1988) 133: 227–40.

Google Scholar

108. Komminoth P, Roth J, Saremaslani P, Matias-Guiu X, Wolfe HJ, Heitz PU. Полисиаловая кислота молекулы адгезии нервных клеток в щитовидной железе человека: маркер медуллярной карциномы щитовидной железы и первичной гиперплазии С-клеток.Иммуногистохимическое исследование 79 поражений щитовидной железы. Am J Surg Pathol. (1994) 18: 399–411. DOI: 10.1097 / 00000478-199404000-00008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

109. Zhang S, Cordon-Cardo C, Zhang HS, Reuter VE, Adluri S, Hamilton WB и др. Выбор опухолевых антигенов в качестве мишеней для иммунной атаки с использованием иммуногистохимии: I. Акцент на ганглиозиды. Int J Cancer. (1997) 73: 42–9.

PubMed Аннотация | Google Scholar

110.Guerrera M, Ladisch S. N-бутилдезоксиноджиримицин подавляет метаболизм ганглиозидов клеток меланомы мыши и задерживает начало опухоли. Cancer Lett. (2003) 201: 31–40. DOI: 10.1016 / S0304-3835 (03) 00459-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

111. Баттула В.Л., Ши Й., Эванс К.В., Ван Р.Й., Спет Е.Л., Джакамо Р.О. и др. Ганглиозид GD2 идентифицирует стволовые клетки рака груди и способствует онкогенезу. J Clin Invest. (2012) 122: 2066–78. DOI: 10.1172 / JCI59735

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

112.Sarkar TR, Battula VL, Werden SJ, Vijay GV, Ramirez-Pena EQ, Taube JH, et al. GD3-синтаза регулирует эпителиально-мезенхимальный переход и метастазирование при раке молочной железы. Онкоген. (2015) 34: 2958–67. DOI: 10.1038 / onc.2014.245

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

113. Ledeen R, Wu G. GM1 в ядерной оболочке регулирует ядерный кальций посредством ассоциации с ядерным обменником натрия и кальция. J Neurochem. (2007) 103 (Дополнение.1): 126–34. DOI: 10.1111 / j.1471-4159.2007.04722.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

114. Сано Р., Аннунциата И., Паттерсон А., Мошиах С., Гомеро Е., Опферман Дж. И др. Накопление GM1-ганглиозидов на мембранах ER, ассоциированных с митохондриями, связывает стресс ER с Ca (2 +) — зависимым митохондриальным апоптозом. Mol Cell. (2009) 36: 500–11. DOI: 10.1016 / j.molcel.2009.10.021

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

115.Lauc G, Heffer-Lauc M. Отбрасывание и поглощение ганглиозидов и гликозилфосфатидилинозитол-заякоренных белков. Biochim Biophys Acta. (2006) 1760: 584–602. DOI: 10.1016 / j.bbagen.2005.11.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

117. McKallip R, Li R, Ladisch S. Опухолевые ганглиозиды подавляют опухолеспецифический иммунный ответ. J Immunol. (1999) 163: 3718–26.

PubMed Аннотация | Google Scholar

120.Тонг В., Майра М., Ганьон М., Сарагови Х. Связывание лигандов с ганглиозидом GD2 клеточной поверхности вызывает Src-зависимую активацию передачи сигналов рецептора N-метил-D-аспартата и изменения клеточной морфологии. PLoS ONE. (2015) 10: e0134255. DOI: 10.1371 / journal.pone.0134255

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

121. Cazet A, Bobowski M, Rombouts Y, Lefebvre J, Steenackers A, Popa I, et al. Ганглиозид G (D2) индуцирует конститутивную активацию c-Met в клетках рака молочной железы MDA-MB-231, экспрессирующих G (D3) синтазу. Гликобиология. (2012) 22: 806–16. DOI: 10.1093 / glycob / cws049

CrossRef Полный текст | Google Scholar

122. Aixinjueluo W., Furukawa K, Zhang Q, Hamamura K, Tokuda N, Yoshida S, et al. Механизмы апоптоза клеток мелкоклеточного рака легкого, индуцированного моноклональными антителами против GD2: роль аноикиса. J Biol Chem. (2005) 280: 29828–36. DOI: 10.1074 / jbc.M414041200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

123.Dippold WG, Knuth A, Meyer zum Buschenfelde KH. Ингибирование роста клеток меланомы человека in vitro с помощью моноклональных анти-GD3-ганглиозидных антител. Cancer Res. (1984) 44: 806–10.

PubMed Аннотация | Google Scholar

125. Koochekpour S, Merzak A, Pilkington GJ. Продукция фактора роста эндотелия сосудов стимулируется ганглиозидами и изоформами TGF-β в клетках глиомы человека in vitro . Cancer Lett. (1996) 102: 209–15. DOI: 10.1016 / 0304-3835 (96) 04161-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

126. Трингали С., Сильвестри И., Теста Ф, Балдассари П., Анастасия Л., Мортарини Р. и др. Молекулярное субтипирование метастатической меланомы на основе профилей метаболизма клеточных ганглиозидов. BMC Рак. (2014) 14: 560. DOI: 10.1186 / 1471-2407-14-560

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

127. Агарвал М.К., Нетер Э. Влияние выбранных липидов и поверхностно-активных веществ на иммуногенность некоторых бактериальных антигенов. J Immunol. (1971) 107: 1448–56.

PubMed Аннотация | Google Scholar

128. Ladisch S, Gillard B, Wong C, Ulsh L. Шеддинг и иммунорегуляторная активность ганглиозидов клеток лимфомы YAC-1. Cancer Res. (1983) 43: 3808–13.

PubMed Аннотация | Google Scholar

129. Рапопорт Э., Михалев И., Чжан Дж., Крокер П., Бовин Н. Паттерн связывания ганглиозидов CD33-связанных сиглеков. Bioorg Med Chem Lett. (2003) 13: 675–8.DOI: 10.1016 / S0960-894X (02) 00998-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

130. Николл Г., Аврил Т., Лок К., Фурукава К., Бовин Н., Крокер ПР. Экспрессия ганглиозида GD3 на клетках-мишенях может модулировать цитотоксичность NK-клеток через сиглек-7-зависимые и независимые механизмы. Eur J Immunol. (2003) 33: 1642–8. DOI: 10.1002 / eji.200323693

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

131. Ито А., Ханда К., Холерс Д. А., Сато М., Хакомори С.Специфичность связывания siglec7 с дизиалоганглиозидами почечно-клеточного рака: возможная роль дизиалоганглиозидов в прогрессировании опухоли. FEBS Lett. (2001) 504: 82–6. DOI: 10.1016 / S0014-5793 (01) 02734-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

132. Ямаджи Т., Тераниши Т., Алфей М.С., Крокер П.Р., Хашимото Ю. Небольшая область рецептора естественных клеток-киллеров, Siglec-7, отвечает за его предпочтительное связывание с альфа-2,8-дисиалилом и разветвленным альфа-2, 6-сиалильные остатки.Сравнение с Сиглек-9. J Biol Chem. (2002) 277: 6324–32. DOI: 10.1074 / jbc.M110146200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

133. Лу П., Шаром Ф.Дж. Ганглиозиды являются мощными иммуносупрессорами IL-2-опосредованной пролиферации Т-клеток в среде с низким содержанием белка. Иммунология. (1995) 86: 356–63.

PubMed Аннотация | Google Scholar

134. Peguet-Navarro J, Sportouch M, Popa I, Berthier O, Schmitt D, Portoukalian J.Ганглиозиды из опухолей меланомы человека нарушают дифференциацию дендритных клеток от моноцитов и вызывают их апоптоз. J Immunol. (2003) 170: 3488–94. DOI: 10.4049 / jimmunol.170.7.3488

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

136. Вондиму А., Лю И, Су И, Бобб Д., Ма Дж. С., Чакрабарти Л. и др. Ганглиозиды стимулируют инфильтрацию опухоли и функцию миелоидных клеток-супрессоров. Cancer Res. (2014) 74: 5449–57. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-14-0927

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

137. Чивер М.А., Эллисон Дж. П., Феррис А.С., Финн О.Дж., Гастингс Б.М., Хехт Т.Т. и др. Приоритезация раковых антигенов: пилотный проект национального института рака по ускорению трансляционных исследований. Clin Cancer Res. (2009) 15: 5323–37. DOI: 10.1158 / 1078-0432.CCR-09-0737

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

138. Крамер К., Джеральд В. Л., Кушнер Б. Х., Ларсон С. М., Хамид М., Чунг Н. К..Потеря дисалоганглиозида GD2 после терапии моноклональными антителами при нейробластоме встречается редко. Med Pediatr Oncol. (2001) 36: 194–6. DOI: 10.1002 / 1096-911X (20010101) 36: 1 <194 :: AID-MPO1046> 3.0.CO; 2-B

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

139. Пун В.И., Рот М., Пиперди С., Геллер Д., Гилл Дж., Рудзински Э.Р. и др. Экспрессия ганглиозида GD2 сохраняется при рецидиве у пациентов с остеосаркомой. Clin Sarcoma Res. (2015) 5: 4.DOI: 10.1186 / s13569-014-0020-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

140. Доронин И.И., Вишнякова П.А., Холоденко И.В., Пономарев Е.Д., Рязанцев Д.Ю. и др. Ганглиозид GD2 в приеме и передаче сигнала клеточной смерти в опухолевые клетки. BMC Рак. (2014) 14: 295. DOI: 10.1186 / 1471-2407-14-295

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

141. Yu AL, Gilman AL, Ozkaynak MF, London WB, Kreissman SG, Chen HX, et al.Детская онкология, антитела против GD2 с GM-CSF, интерлейкином-2 и изотретиноином для нейробластомы. N Engl J Med. (2010) 363: 1324–34. DOI: 10.1056 / NEJMoa0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

142. Салех М.Н., Хазаэли М.Б., Уиллер Р.Х., Аллен Л., Тилден А.Б., Гриззл В. и др. Фаза I испытания химерного моноклонального антитела против GD2 ch24.18 у пациентов со злокачественной меланомой. Гибридомы с человеческими антителами. (1992) 3: 19–24.DOI: 10.3233 / HAB-1992-3104

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

143. Хандгретингер Р., Андерсон К., Ланг П., Допфер Р., Клингебиль Т., Шраппе М. и др. Фаза I исследования химерного антиганглиозидного антитела GD2 человека / мыши ch24.18 у пациентов с нейробластомой. евро J Рак. (1995) 31A: 261–7. DOI: 10.1016 / 0959-8049 (94) 00413-Y

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

144. Чунг Н.К., Нили Дж. Э., Ландмайер Б., Нельсон Д., Миральди Ф.Нацеливание моноклональных антител ганглиозидов GD2 на нейробластому. J Nucl Med. (1987) 28: 1577–83.

PubMed Аннотация | Google Scholar

145. McCaffery M, Yao TJ, Williams L, Livingston PO, Houghton AN, Chapman PB. Иммунизация пациентов с меланомой антиидиотипическим моноклональным антителом BEC2, имитирующим ганглиозид GD3: повышенная иммуногенность в сочетании с адъювантом. Clin Cancer Res. (1996) 2: 679–86.

PubMed Аннотация | Google Scholar

146.Баджорин Д.Ф., Чепмен П.Б., Вонг Дж., Койт Д.Г., Куницка Дж., Димаджио Дж. И др. Оценка фазы I комбинации моноклонального антитела R24 и интерлейкина 2 у пациентов с метастатической меланомой. Cancer Res. (1990) 50: 7490–5.

PubMed Аннотация | Google Scholar

148. Keyel ME, Reynolds CP. В центре внимания динутуксимаб в лечении нейробластомы высокого риска: разработка и место в терапии. Биологические препараты. (2019) 13: 1–12. DOI: 10.2147 / BTT.S114530

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

149.Эссер Р., Мюллер Т., Стефес Д., Клёсс С., Зайдель Д., Гиллис С.Д. и др. NK-клетки, сконструированные для экспрессии GD2-специфического рецептора антигена, проявляют встроенную ADCC-подобную активность против опухолевых клеток нейроэктодермального происхождения. J Cell Mol Med. (2012) 16: 569–81. DOI: 10.1111 / j.1582-4934.2011.01343.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

150. Гаргетт Т., Ю. В., Дотти Г., Ивон Е. С., Кристо С. Н., Хейболл Д. Д. и др. GD2-специфические CAR Т-клетки подвергаются сильной активации и делеции после столкновения с антигеном, но могут быть защищены от вызванной активацией гибели клеток с помощью блокады PD-1. Mol Ther. (2016) 24: 1135–49. DOI: 10,1038 / мт.2016.63

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

151. Зейтц С.М., Шредер С., Кнопф П., Краль А.С., Хау Дж., Шлейхер С. и др. Т-клетки химерного антигенного рецептора, нацеленные на GD2, предотвращают образование метастазов за счет устранения стволовых клеток рака молочной железы. Онкоиммунология. (2020) 9: 1683345. DOI: 10.1080 / 2162402X.2019.1683345

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

152.Mount CW, Majzner RG, Sundaresh S, Arnold EP, Kadapakkam M, Haile S и др. Сильная противоопухолевая эффективность Т-клеток против GD2 CAR в диффузных глиомах средней линии h4-K27M (+). Nat Med. (2018) 24: 572–9. DOI: 10.1038 / s41591-018-0006-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

158. Кроули М.П., Фарер А.М., Баумгарт Н., Хэмпл Дж., Гутгеманн И., Тейтон Л. и др. Популяция мышиных γδ Т-клеток, которые распознают индуцибельную молекулу MHC класса Ib. Наука. (2000) 287: 314–6. DOI: 10.1126 / science.287.5451.314

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

159. Wingren C, Crowley MP, Degano M, Chien Y, Wilson IA. Кристаллическая структура лиганда Т-клеточного рецептора Т22: усеченная MHC-подобная складка. Наука. (2000) 287: 310–4. DOI: 10.1126 / science.287.5451.310

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

160. Бай Л., Пикард Д., Андерсон Б., Чаудхари В., Луома А., Джабри Б. и др.Большинство CD1d-сульфатид-специфических Т-клеток в крови человека используют полуинвариантный TCR Vδ1. Eur J Immunol. (2012) 42: 2505–10. DOI: 10.1002 / eji.201242531

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

161. Луома А.М., Кастро С.Д., Майасси Т., Бембинстер Л.А., Бай Л., Пикард Д. и др. Кристаллическая структура рецептора Т-клеток Vδ1 в комплексе с CD1d-сульфатидом демонстрирует MHC-подобное распознавание собственного липида γδ Т-клетками человека. Иммунитет. (2013) 39: 1032–42.DOI: 10.1016 / j.immuni.2013.11.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

162. Агеа Э., Руссано А., Бистони О, Маннуччи Р., Николетти И., Корацци Л. и др. Человеческое CD1-ограниченное распознавание липидов пыльцы Т-клетками. J Exp Med. (2005) 202: 295–308. DOI: 10.1084 / jem.20050773

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

163. Ульдрих А.П., Ле Нур Дж., Пелличчи Д.Г., Герардин Н.А., Макферсон К.Г., Лим Р.Т. и др.Распознавание CD1d-липидного антигена γδ TCR. Nat Immunol. (2013) 14: 1137–45. DOI: 10.1038 / ni.2713

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

164. Манган Б.А., Данн М.Р., О’Рейли В.П., Данн П.Дж., Эксли М.А., О’Ши Д. и др. Передний край: ограничение CD1d и секреция цитокинов Th2 / Th3 / Th27 Т-клетками Vδ3 человека. J Immunol. (2013) 191: 30–4. DOI: 10.4049 / jimmunol.1300121

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

165.Le Nours J, Gherardin NA, Ramarathinam SH, Awad W., Wiede F, Gully BS и др. Класс γδ Т-клеточных рецепторов распознает нижнюю сторону антигенпрезентирующей молекулы MR1. Наука. (2019) 366: 1522–7. DOI: 10.1126 / science.aav3900

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

166. Танака Y, Морита CT, Танака Y, Ньевес Е., Бреннер МБ, Блум Б.Р. Природные и синтетические непептидные антигены, распознаваемые γδ Т-клетками человека. Природа. (1995) 375: 155–8.DOI: 10.1038 / 375155a0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

167. Gober HJ, Kistowska M, Angman L, Jeno P, Mori L., de Libero G. Клетки γδ рецептора Т-клеток человека распознают эндогенные метаболиты мевалоната в опухолевых клетках. J Exp Med. (2003) 197: 163–8. DOI: 10.1084 / jem.20021500

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

168. Harly C, Guillaume Y, Nedellec S, Peigne CM, Monkkonen H, Monkkonen J, et al.Ключевое значение CD277 / бутирофилина-3 (BTN3A) в восприятии клеточного стресса основной субпопуляцией γδ Т-клеток человека. Кровь. (2012) 120: 2269–79. DOI: 10.1182 / кровь-2012-05-430470

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

169. Sandstrom A, Peigne CM, Leger A, Crooks JE, Konczak F, Gesnel MC, et al. Внутриклеточный домен B30.2 бутирофилина 3A1 связывает фосфоантигены, опосредуя активацию Т-клеток Vγ9Vδ2 человека. Иммунитет. (2014) 40: 490–500.DOI: 10.1016 / j.immuni.2014.03.003

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

170. Willcox CR, Vantourout P, Salim M, Zlatareva I., Melandri D, Zanardo L, et al. Бутирофилин-подобный 3 напрямую связывает человеческий рецептор Т-клеток Vγ4 + с использованием способа, отличного от клонально ограниченного антигена. Иммунитет. (2019) 51: 813–25.e4. DOI: 10.1016 / j.immuni.2019.09.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

171. Карунакаран М.М., Уиллкокс С.Р., Салим М., Палетта Д., Фихтнер А.С., Нолл А. и др.Бутирофилин-2A1 напрямую связывает кодируемые зародышевой линией области Vγ9Vδ2 TCR и необходим для восприятия фосфоантигена. Иммунитет. (2020) 52: 487–98.e6. DOI: 10.1016 / j.immuni.2020.02.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

172. Ригау М., Остроуска С., Фулфорд Т.С., Джонсон Д.Н., Вудс К., Руан З. и др. Бутирофилин 2A1 необходим для реактивности фосфоантигена γδ Т-клетками. Наука. (2020) 367: aay516. DOI: 10.1126 / science.aay5516

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

173.Коррейя Д.В., Лопес А., Сильва-Сантос Б. Распознавание опухолевых клеток γδ Т-лимфоцитами: рецептор Т-клеток против рецепторов NK-клеток. Онкоиммунология. (2013) 2: e22892. DOI: 10.4161 / onci.22892

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

174. Сильва-Сантос Б., Стрид Дж. Работа в «режиме NK»: естественный киллер из группы 2 d и рецепторы естественной цитотоксичности при наблюдении за стрессом с помощью γδ Т-клеток. Front Immunol. (2018) 9: 851. DOI: 10.3389 / fimmu.2018.00851

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

175. Girardi M, Oppenheim DE, Steele CR, Lewis JM, Glusac E, Filler R, et al. Регулирование кожных злокачественных новообразований γδ Т-клетками. Наука. (2001) 294: 605–9. DOI: 10.1126 / science.1063916

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

176. Стрид Дж., Робертс С.Дж., Филлер Р.Б., Льюис Дж. М., Квонг Б.Я., Шперо В. и др. Острая активация лиганда NKG2D способствует быстрой реорганизации местного иммунного компартмента с плейотропным действием на канцерогенез. Nat Immunol. (2008) 9: 146–54. DOI: 10.1038 / ni1556

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

177. Lanca T, Correia DV, Moita CF, Raquel H, Neves-Costa A, Ferreira C и др. Белок ULBP1 класса Ib MHC является неизбыточным детерминантом чувствительности лейкемии / лимфомы к цитотоксичности Т-лимфоцитов γδ. Кровь. (2010) 115: 2407–11. DOI: 10.1182 / кровь-2009-08-237123

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

178.Park JE, Wu DY, Prendes M, Lu SX, Ragupathi G, Schrantz N, et al. Тонкая специфичность естественных Т-клеток-киллеров против ганглиозида GD3 и идентификация GM3 как ингибирующего лиганда естественных Т-клеток-киллеров. Иммунология. (2008) 123: 145–55. DOI: 10.1111 / j.1365-2567.2007.02760.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

179. Ву Д.Й., Сегал Н.Х., Сидобре С., Кроненберг М., Чепмен ПБ. Перекрестное представление дизиалоганглиозида GD3 естественным Т-клеткам-киллерам. J Exp Med. (2003) 198: 173–81. DOI: 10.1084 / jem.20030446

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

181. Speir JA, Abdel-Motal UM, Jondal M, Wilson IA. Кристаллическая структура MHC класса I представлена гликопептидом, который генерирует специфичные для углеводов CTL. Иммунитет. (1999) 10: 51–61. DOI: 10.1016 / S1074-7613 (00) 80006-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

182. Тонг В., Майра М., Ройчоудхури Р., Галан А., Брахими Ф., Гилберт М. и др.Вакцинация гликомиметиками опухолевых ганглиозидов активирует избирательный иммунитет, обеспечивающий лечение рака. Cell Chem Biol. (2019) 26: 1013–26.e4. DOI: 10.1016 / j.chembiol.2019.03.018

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

183. Тонг У., Спрулс Т, Геринг К., Сарагови Х. Рациональный дизайн пептидных лигандов против гликолипида с помощью ЯМР-исследований. Methods Mol Biol. (2012) 928: 39–52. DOI: 10.1007 / 978-1-62703-008-3_4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

185.Брандес М., Виллиманн К., Биолей Дж., Леви Н., Эберл М., Луо М. и др. Кросс-презентирующие человеческие γδ Т-клетки индуцируют устойчивые Т-клеточные ответы CD8 + алфавита. Proc Natl Acad Sci USA. (2009) 106: 2307–12. DOI: 10.1073 / pnas.0810059106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

186. Castella B, Foglietta M, Sciancalepore P, Rigoni M, Coscia M, Griggio V и др. Анергические Т-клетки костного мозга Vγ9Vδ2 как ранние и долговременные маркеры подавления иммунитета, индуцированного PD-1-нацеленным микроокружением, при миеломе человека. Онкоиммунология. (2015) 4: e1047580. DOI: 10.1080 / 2162402X.2015.1047580

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

187. Hoeres T, Holzmann E, Smetak M, Birkmann J, Wilhelm M. Передача сигналов PD-1 модулирует продукцию гамма-интерферона гамма-дельта (γδ) Т-клетками в ответ на лейкемию. Онкоиммунология. (2019) 8: 1550618. DOI: 10.1080 / 2162402X.2018.1550618

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

188.Невес П.К., Рудерсдорф Р.А., Галлер Р., Боналдо М.С., де Сантана М.Г., Мадд П.А. и др. CD8 + гамма-дельта TCR + и CD4 + Т-клетки продуцируют IFN-гамма через 5-7 дней после вакцинации против желтой лихорадки у индийских макак-резус до индукции классических антиген-специфических Т-клеточных ответов. Вакцина. (2010) 28: 8183–8. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2010.09.090

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

189. Невес П.С., Сантос Дж. Р., Тубарао Л.Н., Боналдо М.К., Галлер Р. Ранняя продукция IFN-гамма после иммунизации мышей вакциной против YF 17D и ее связь с адаптивными иммунными ответами. PLoS ONE. (2013) 8: e81953. DOI: 10.1371 / journal.pone.0081953

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

190. Муиа Р.П., Ю Х., Прешер Дж. А., Хеллман Ю., Чен Х, Бертоцци С. Р. и др. Идентификация гликопротеинов, на которые нацелена транс-сиалидаза Trypanosoma cruzi , фактор вирулентности, нарушающий гликозилирование лимфоцитов. Гликобиология. (2010) 20: 833–42. DOI: 10.1093 / glycob / cwq037

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

193.Fisher JP, Heuijerjans J, Yan M, Gustafsson K, Anderson J. γδ T-клетки для иммунотерапии рака: систематический обзор клинических испытаний. Онкоиммунология. (2014) 3: e27572. DOI: 10.4161 / onci.27572

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

194. Фурни Дж. Дж., Сикард Х., Поупо М., Безомб С., Блан А, Романь Ф. и др. Какие уроки можно извлечь из испытаний иммунотерапии рака на основе γδ Т-лимфоцитов? Cell Mol Immunol. (2013) 10: 35–41. DOI: 10.1038 / cmi. 2012.39

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

195. Maeurer MJ, Martin D, Walter W., Liu K, Zitvogel L, Halusczcak K, et al. Vδ1 + лимфоциты кишечника человека распознают опухолевые клетки эпителиального происхождения. J Exp Med. (1996) 183: 1681–96. DOI: 10.1084 / jem.183.4.1681

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

196. Бялашевич А.А., Ма JX, Ричард Г. Инфильтрация альфа / бета- и гамма / дельта TCR (+) лимфоцитов при некротизирующей меланоме хориоидеи. Br J Ophthalmol. (1999) 83: 1069–73. DOI: 10.1136 / bjo.83.9.1069

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

197. Moulin M, Alguacil J, Gu S, Mehtougui A, Adams EJ, Peyrottes S, et al. Активация Т-клеток Vγ9Vδ2 сильно агонистическими нуклеотидными фосфоантигенами. Cell Mol Life Sci. (2017) 74: 4353–67. DOI: 10.1007 / s00018-017-2583-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

198. Kunzmann V, Bauer E, Feurle J, Weissinger F, Tony HP, Wilhelm M.Стимуляция γδ Т-клеток аминобисфосфонатами и индукция активности антиплазматических клеток при множественной миеломе. Кровь. (2000) 96: 384–92. DOI: 10.1182 / blood.V96.2.384

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

199. Себастьен З., Принц И., Дешане-Мервилл Дж, Сильва-Сантос Б., Кубалл Дж. Трансляция γδ (γδ) Т-клеток и их рецепторов в терапию раковых клеток. Nat Rev Drug Discov. (2020) 19: 169–84. DOI: 10.1038 / s41573-019-0038-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

201.Николь А.Дж., Токуяма Х., Маттаролло С.Р., Хаги Т., Сузуки К., Йококава К. и др. Клиническая оценка аутологичной иммунотерапии на основе гамма-дельта-Т-лимфоцитов для метастатических солидных опухолей. руб. J Рак. (2011) 105: 778–86. DOI: 10.1038 / bjc.2011.293

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

202. Гарфалл А.Л., Маус М.В., Хванг В.Т., Лейси С.Ф., Манке Ю.Д., Меленхорст Дж. Дж. И др. Химерные антигенные рецепторные Т-клетки против CD19 при множественной миеломе. N Engl J Med. (2015) 373: 1040–7. DOI: 10.1056 / NEJMoa1504542

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

203. Maude SL, Frey N, Shaw PA, Aplenc R, Barrett DM, Bunin NJ, et al. Т-клетки химерного антигенного рецептора для устойчивой ремиссии лейкемии. N Engl J Med. (2014) 371: 1507–17. DOI: 10.1056 / NEJMoa1407222

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

204. Портер Д.Л., Хванг В.Т., Фрей Н.В., Лейси С.Ф., Шоу П.А., Лорен А.В. и др.Химерные антигенные рецепторные Т-клетки сохраняются и вызывают стойкие ремиссии при рецидивирующей рефрактерной хронической лимфоцитарной лейкемии. Sci Transl Med. (2015) 7: 303ra139. DOI: 10.1126 / scitranslmed.aac5415

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

205. Capsomidis A, Benthall G, Van Acker HH, Fisher J, Kramer AM, Abeln Z, et al. Человеческие гамма-дельта-Т-клетки, сконструированные с помощью химерного антигенного рецептора: повышенная цитотоксичность с сохранением перекрестной презентации. Mol Ther. (2018) 26: 354–65. DOI: 10.1016 / j.ymthe.2017.12.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

206. Рибо Дж. К., де Баррос А., Панг Д. Д., Невес Дж. Ф., Пеперзак В., Робертс С. Дж. И др. CD27 является детерминантом тимического баланса между субпопуляциями γδ Т-клеток, продуцирующими гамма-интерферон и интерлейкин 17. Nat Immunol. (2009) 10: 427–36. DOI: 10.1038 / ni.1717

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

207.Misiak A, Wilk MM, Raverdeau M, Mills KH. Продуцирующие ИЛ-17 врожденные и патоген-специфические резидентные ткани ткани памяти γδ Т-клетки размножаются в легких мышей, инфицированных Bordetella pertussis. J Immunol. (2017) 198: 363–74. DOI: 10.4049 / jimmunol.1601024

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

208. Дэйви М.С., Уиллкокс С.Р., Джойс С.П., Ладелл К., Касатская С.А., Макларен Д.Е. и др. Клональный отбор в репертуаре человеческих Vδ1 Т-клеток указывает на γδ TCR-зависимый адаптивный иммунный надзор. Nat Commun. (2017) 8: 14760. DOI: 10.1038 / ncomms14760

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

209. Димова Т., Брауэр М., Госселин Ф., Тассиньон Дж., Лео О., Доннер С. и др. Эффекторные Т-клетки Vgamma9Vδ2 доминируют в репертуаре γδ Т-клеток человеческого плода. Proc Natl Acad Sci USA. (2015) 112: E556–65. DOI: 10.1073 / pnas.1412058112

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Abstracts ‐ Posters — 2018 — Алкоголизм: клинические и экспериментальные исследования

Многоуровневые доказательства общего перехода Павлова от инструментария к инструментам при расстройстве, вызванном употреблением алкоголя

М.Гарбусов ^1,2,3,4,5, К. Соммер ^1,2,3,4,5, С. Небе ^1,2,3,4,5, М. Себольд ^{1,2 , 3,4,5}, S. Kuitunen-Paul ^1,2,3,4,5, H.-U. Wittchen ^1,2,3,4,5, M.N. Smolka ^1,2,3,4,5, U.S. Zimmermann ^1,2,3,4,5, M.A. Rapp ^1,2,3,4,5, Q.J.M. Huys ^1,2,3,4,5, F. Schlagenhauf ^1,2,3,4,5, A. Heinz ^1,2,3,4,5

¹ Charité — Universitätsmedizin, Берлин, 10117, Германия ² Technische Universität, Дрезден, 01062, Германия ³ Потсдамский университет, 14469, Германия ⁴ Университет Цюриха, 8006, Швейцария ⁵ Институт Макса Планка for Human Cognitive and Brain Sciences, Лейпциг, 04103, Германия

Фон

Павловские стимулы влияют на текущее инструментальное поведение (передача от Павлова к инструментам, PIT), механизм, который, как постулируется, имеет отношение к рецидивирующему поведению.PIT был увеличен у зависимых животных, и на нервном уровне активность, связанная с PIT, в основном наблюдалась в прилежащем ядре (NAcc). Хотя есть свидетельства того, что приписывание значимости релевантным сигналам, приводящим к реактивности сигнала, имеет значение для рецидивирующего поведения, исследования того, как внешние сигналы напрямую влияют на принятие решений у пациентов с алкогольной зависимостью, проводятся редко. Однако это очень важно для лучшего понимания механизмов, ведущих к рецидиву. Таким образом, мы стремимся представить данные о том, усиливается ли PIT у пациентов с алкогольной зависимостью.Более того, мы исследуем связь между PIT и импульсивностью, предполагаемым рецидивом и нервной активацией.

Методы

Мы оценили пациентов с алкогольной зависимостью, недавно прошедших детоксикацию, а также контрольных групп, соответствующих возрасту и полу. Общая задача PIT состояла из трех частей с использованием денежного вознаграждения: (1) инструментальная обусловленность, (2) условная рефлексия по Павлову и (3) перенос (PIT), изучающая влияние фоновых стимулов Павлова на текущее инструментальное поведение.Более того, мы измерили импульсивное поведение выбора с помощью задачи дисконтирования денежной задержки. Мы предположили усиление поведенческой PIT у пациентов с алкогольной зависимостью по сравнению с контрольной группой. Кроме того, мы выдвинули гипотезу о положительной связи между поведенческими эффектами PIT, импульсивным поведением выбора и изученными нейронными корреляциями PIT в априорной области интереса, включающей NAcc, в связи с предполагаемым рецидивом.

Результаты

Как и предполагалось, поведенческая PIT была увеличена у пациентов с алкогольной зависимостью по сравнению с контрольной группой.Более того, поведенческий PIT был положительно связан с импульсивным поведением выбора. На нервном уровне PIT активировал прилежащее ядро и предсказал рецидивирующее поведение через 3 месяца в когорте пациентов с алкогольной зависимостью.

Выводы

Мы предоставляем многоуровневые доказательства того, что ИПН, по-видимому, является важным механизмом, связанным с хроническим потреблением алкоголя. Мы обнаружили, что PIT связан с потенциальными факторами риска развития и сохранения расстройств, связанных с употреблением алкоголя, такими как импульсивный выбор.Более того, активация NAcc, связанная с PIT, может быть биомаркером предполагаемого рецидива и согласуется с теорией зависимости от стимулов, указывающей на потенциальный риск для поддержания AUD. Взятые вместе, наши данные подчеркивают важность контекстных сигналов, влияющих на поведение, и могут стимулировать терапевтические программы.

Биология диабетической невропатии | Запрос PDF

Сводка Эпалрестат представляет собой производное карбоновой кислоты, которое ингибирует альдозоредуктазу, фермент пути сорбита (полиола).В условиях гипергликемии эпалрестат снижает внутриклеточное накопление сорбита, что играет роль в патогенезе поздних осложнений сахарного диабета. Эпалрестат в дозе 150 мг / день в течение 12 недель улучшал скорость проведения двигательных и сенсорных нервов, а также порог вибрации по сравнению с исходным уровнем и плацебо у пациентов с диабетической невропатией. Субъективные симптомы, включая боль, онемение, гиперестезию, холод в конечностях, мышечную слабость, головокружение и ортостатический обморок, также улучшились.Аналогичные преимущества были замечены при сравнении с историческими контрольными данными. Эпалрестат 300 мг / день в течение 1 или 3 лет также значительно превосходил плацебо или отсутствие лечения в улучшении параметров электроретинограммы и времени восстановления фотостресса у пациентов с диабетической ретинопатией. Улучшения были также задокументированы с помощью фундускографии и флюоресцентной ангиографии. Эпалрестат оказался наиболее эффективным у пациентов с менее тяжелым сахарным диабетом и поздним развитием осложнений. Эпалрестат, по-видимому, хорошо переносится с преимущественно незначительными побочными эффектами, о которых сообщалось в клинических испытаниях.Чаще всего сообщалось о повышении уровня ферментов печени, но, как правило, они разрешались спонтанно при снижении дозы или прекращении приема. Влияние возраста и почечной недостаточности на эффективность и переносимость эпалрестата требует уточнения, и данные о его применении при других поздних осложнениях диабета, таких как нефропатия, также отсутствуют. Для полного определения роли эпалрестата также необходимы сравнения с другими ингибиторами альдозоредуктазы. Предполагаемая способность эпалрестата предотвращать развитие диабетических осложнений также должна быть исследована.Таким образом, имеющиеся данные предполагают, что эпалрестат вызывает некоторое улучшение при нейропатии с поздним началом и ретинопатии, связанной с сахарным диабетом, хотя необходимы дополнительные исследования, чтобы определить, необходима ли продолжающаяся терапия для поддержания достигнутых улучшений и подтверждения переносимости в долгосрочной перспективе. Тем не менее, предварительные результаты показывают, что эпалрестат может быть полезным лекарством в области, где существует потребность в эффективной терапии. Фармакология Путь метаболизма сорбита (полиола), альтернативный путь восстановления глюкозы с участием ферментов альдозоредуктазы и сорбитолдегидрогеназы, как полагают, активируется в условиях гипергликемии.Считается, что внутриклеточное накопление сорбита во время гипергликемии частично отвечает за патогенез поздних осложнений сахарного диабета. Эпалрестат, неконкурентоспособный ингибитор альдозоредуктазы, значительно снижает внутриклеточное накопление сорбита в седалищном нерве, эритроцитах и тканях глаза на животных моделях, а также в эритроцитах у людей с сахарным диабетом, не влияя на уровень глюкозы. Эпалрестат также увеличивал поглощение натрийзависимого миоинозитола тканью седалищного нерва у крыс и фибробластов кожи пациентов с диабетом и уменьшал скорость нервной проводимости и изменения сетчатки, обычно наблюдаемые у пациентов с диабетической невропатией и ретинопатией, соответственно.У здоровых добровольцев эпалрестат распределяется быстро, и пиковые концентрации в плазме достигаются через 1-2 часа после приема внутрь от 50 до 200 мг. Период полувыведения составляет около 1 часа, и неизмененные эпалрестат и сульфатные конъюгаты моно- и дигидроксифенильных метаболитов обнаруживаются в моче. Лечебный потенциал Пероральный эпалрестат в дозе 150 мг / день в течение 12 недель вызывал улучшение скорости проведения двигательных и сенсорных нервов и восприятия вибраций по сравнению с плацебо у пациентов с диабетической невропатией.Также улучшились субъективные симптомы, включая боль, онемение, гиперестезию, холод в конечностях, мышечную слабость, головокружение, ортостатический обморок и запор / диарею. Сравнение с историческими контрольными препаратами показало аналогичные преимущества, как и сравнение с метилкобаламином. Эти данные подтверждаются результатами несравнительных испытаний продолжительностью от 4 недель до 1 года, в которых участвовало 365 пациентов с диабетической невропатией. Сравнительные исследования продолжительностью 1 или 3 года у пациентов с диабетической ретинопатией показывают, что эпалрестат 300 мг / день значительно более эффективен, чем плацебо или отсутствие лечения, в улучшении или предотвращении ухудшения глазных признаков и симптомов.Эпалрестат, по-видимому, наиболее эффективен у пациентов с менее тяжелым сахарным диабетом и недавно возникшими поздними осложнениями. Переносимость Эпалрестат хорошо переносился в основном в несравнительных японских клинических испытаниях продолжительностью до 3 лет. Чаще всего сообщалось о незначительном повышении уровня ферментов печени, диарее, эритеме, волдырях на коже и повышенном уровне креатинина в сыворотке. Эпалрестат переносился так же хорошо, как плацебо и метилкобаламин в сравнительных исследованиях.Дозировка и администрирование Рекомендуемая дозировка эпалрестата для приема внутрь составляет 50 мг 3 раза в день до еды. Эпалрестат особенно рекомендуется для использования у пациентов с высоким уровнем гликозилированного гемоглобина (что указывает на неспособность контролировать гипергликемию), несмотря на стандартное фармакологическое и нефармакологическое вмешательство. Следует рассмотреть альтернативное лечение, если адекватный ответ на эпалрестат не наблюдается после 12 недель терапии.

Функциональная и геномная характеристика модельной системы ксенотрансплантата для изучения метастазов при тройном отрицательном раке молочной железы

Характеристика спонтанного метастатического потенциала линий, полученных из MDA-MB-231

Для идентификации генов, участвующих в прогрессировании и метастазировании у человека TNBC, мы сначала всесторонне охарактеризовали четыре модели ксенотрансплантата рака груди человека на предмет различий в способности к спонтанным метастазам.Каждая линия опухоли была получена из клеток TNBC человека MDA-MB-231 (фиг. S1), первоначально выделенных из плеврального выпота пациента с метастатическим раком груди (Cailleau et al., 1974). Было показано, что каждая из четырех линий соответствует MDA-MB-231 с помощью профилирования с коротким тандемным повторением (STR) (см. Материалы и методы). 231_ATCC — это строка раннего перехода (номер прохода <20). Линия 231_I представляет собой популяцию клеток MDA-MB-231, субкультивированных более чем в 50 раз in vitro (Mongroo et al., 2004), а ее дочерняя линия, 231_LNA, была выделена из метастазов в лимфатические узлы, которые развились из 231_I. первичная ортотопическая опухоль (рис.S1, таблица S1). Клетки 231_LM2 были выделены из экспериментальных метастазов в легкие, которые возникли у мышей, инокулированных версией родительской линии, меченной репортерным геном, и были широко охарактеризованы в другом месте (Minn et al., 2005a). Наконец, клетки 231_HM.LNm5 были выделены в нашей лаборатории из метастазов в лимфатические узлы у мыши, несущей первичную опухоль молочной железы MDA-MB-231HM (Fietz et al., 2017). Линия MDA-MB-231HM была первоначально выделена из спонтанных метастазов в легких, которые возникли после шести циклов пассирования in vivo , в результате чего спонтанные вторичные поражения, образующиеся в легких, были изолированы и увеличены ex vivo и впоследствии повторно имплантированы в легкие. молочная железа (Chang et al., 2007, 2008). Мы и другие исследователи задокументировали их агрессивный метастатический фенотип у мышей (Chang et al., 2015; Fietz et al., 2017; Jin et al., 2012; Le et al., 2016).

Относительные способности четырех линий опухолей к спонтанному метастазированию in vivo сравнивали бок о бок в модели хирургической резекции, в которой одиночные ортотопические опухоли молочной железы удалялись одинакового размера (A, рис. S1 и S2). Использовали мышей с иммунодефицитом NOD.Cg- Prkdc ^scid Il2rg ^tm1Wjl / SzJ (NSG), поскольку ранее было показано, что они поддерживают повышенное метастазирование линий рака груди (Iorns et al., 2012; Puchalapalli et al., 2016). Визуализация биолюминесценции всего животного (BLI) показала, что у мышей с опухолями 231_ATCC не было обнаружено признаков локального или отдаленного рецидива через 22 дня после резекции, тогда как каждая из трех других линий опухолей демонстрировала как местный рецидив, так и отдаленный рецидив в брюшной и грудной полостях. (В). Ex vivo Флуоресцентная визуализация выявила метастатические отложения в легких, печени и селезенке у животных, инокулированных 231_LNA, 231_LM2 или 231_HM.Клетки LNm5 (рис. S3), что было связано со значительной гипертрофией всего органа печени и селезенки (данные не показаны). Во вторичных органах мышей с опухолями 231_ATCC метастатических поражений обнаружено не было (рис. S3). Эти результаты были подтверждены и расширены гистологическими анализами легких, печени и селезенки мышей с опухолями (). Помимо метастазов в мягкие ткани, опухоли 231_HM.LNm5 также диссеминировали в позвоночник у меньшинства людей (E). Мы также наблюдали значительные различия в частоте метастазов в ипсилатеральные лимфатические узлы среди различных моделей (Le et al., 2016). Метастазы в дренирующий лимфатический узел в подмышечной впадине наблюдались в моделях 231_LM2 и 231_HM.LNm5, но не в линиях 231_ATCC или 231_LNA (рис. S4). В целом, эта обширная оценка in vivo демонстрирует, что модель 231_ATCC неспособна к спонтанным метастазам у мышей NSG, тогда как 231_LNA имеет промежуточную метастатическую способность, а опухоли 231_LM2 и 231_HM.LNm5 являются высоко метастатическими.

Сравнение четырех вариантов опухолей, полученных из MDA-MB-231 in vivo . (A) Скорость роста первичной опухоли измерялась с помощью электронных штангенциркулей. Средний объем опухоли ± s.e.m. Показано. 231_ATCC ( n = 3), 231_LNA ( n = 4), 231_LM2 ( n = 4), 231_HM.LNm5 ( n = 4). Различия в темпах роста определялись с использованием моделирования линейной регрессии со смешанными эффектами (Johnstone et al., 2015): 231_ATCC против 231_LNA ( P = 0,002), 231_ATCC против 231_LM2 ( P = 0,002), 231_ATCC против 231_HM ( P = 0,001), 231_LNA против 231_LM2 ( P = 0.006), 231_LNA против 231_HM ( P = 0,002), 231_LM2 против 231_HM ( P = 0,168). Первичные опухоли 231_LM2 и 231_HM.LNm5 были хирургически резецированы на 18 день, 231_LNA на 21 день и 231_ATCC на 72 день после инокуляции (стрелки). (B-E) In vivo биолюминесцентная визуализация моделей ксенотрансплантатов рака молочной железы. Люциферазные изображения живых мышей были получены через 22 дня после хирургической резекции первичной опухоли молочной железы для всех моделей. Как местный, так и отдаленный рецидив опухоли присутствовал в каждой из трех метастатических моделей [(C) 231_LNA, (D) 231_LM2, (E) 231_HM.LNm5], но не у мышей, инокулированных клетками 231_ATCC (B). Для каждой модели показаны три мыши [ n = 4 для каждой модели, кроме 231_ATCC ( n = 3)]. Клетки 231_LM2 экспрессируют люциферазу-2 светлячка (luc2), шкала яркости от 1 × 10 ⁷ (мин) до 1 × 10 ⁹ (макс). Остальные три модели выражают диммер люциферазы-1 Firefly (luc1), шкалы яркости от 1 × 10 ⁵ (мин) до 1 × 10 ⁷ (макс). Сайт первичной первичной опухоли в правой паховой молочной железе обозначен красной стрелкой на примере одной мыши (B).

Спонтанный метастаз вариантов MDA-MB-231 в отдаленные органы. Срезы (3 мкм) были вырезаны из репрезентативных FFPE-фиксированных вторичных органов, полученных через 22 дня после резекции первичной опухоли. Слайды, окрашенные H & E, сканировали с использованием прибора Olympus VS120, а изображения получали с помощью программного обеспечения OlyVIA (Olympus). (А) 231_ATCC. (В) 231_LNA. (С) 231_LM2. (Г, Д) 231_HM.LNm5. (i) печень, (ii) легкое, (iii) селезенка, (iv) метастатические отложения на позвоночнике между почками, (v) объединенные светлопольные и флуоресцентные (tdTomato) изображения метастатического отложения на позвоночнике между почками (7 × увеличение).Метастатические поражения обозначены синей пунктирной линией. Т — область опухоли; К, почка. Масштабные линейки: (i-iii) 200 мкм, (iv) 2 мм.

231_ATCC была самой медленно пролиферирующей линией, как in vivo (A), так и в трехмерной (3D) культуре in vitro (C). 231_LNA и 231_LM2 образовывали неплотно прилегающие инвазивные структуры при культивировании на геле базальной мембраны in vitro (A), как и ожидалось для раковых клеток, способных к метастазированию. Однако, несмотря на быстрое распространение и агрессивный метастатический фенотип 231_HM.Клетки LNm5 in vivo , они неожиданно сформировали неинвазивные почти сферические кластеры в 3D-культуре, фенотип, который очень напоминал морфологию неметастатических клеток 231_ATCC (A). Как родительские клетки 231_HM, так и линия 231_HM.LNm5 показали значительно меньшую миграцию in vitro в сыворотку по сравнению с тремя другими линиями (B). Действительно, недавно мы показали, что клетки 231_HM.LNm5 менее подвижны, чем клетки 231_ATCC in vitro (Fietz et al., 2017).

In vitro фенотипов различных вариантов MDA-MB-231. Скорость пролиферации, а не инвазивный характер роста коррелирует со способностью к метастазированию. (A) Изображения клеток, культивируемых в 3D. Указанные клеточные линии высевали поверх 50% матрицы Cultrex, и изображения получали при указанном увеличении через 5 дней. Показаны флуоресцентные изображения светлого поля (оттенки серого) и согласованные tdTomato. Линии 231_ATCC и 231_HM.LNm5 образовывали неинвазивные сфероиды, тогда как 231_LNA и 231_LM2 образовывали слабо связанные инвазивные кластеры. (B) In vitro подвижность вариантов MDA-MB-231.Анализы миграции в лунки с использованием 10% FBS в качестве хемоаттрактанта ( n = 3 на линию) были выполнены для указанных клеточных линий. Родительские клетки MDA-MB-231HM (231_HM) также были включены для сравнения. Отображаются два репрезентативных поля (увеличение × 100) из двух разных Transwells на клеточную линию. (C) 3D in vitro. Пролиферацию (на 50% Cultrex) измеряли в течение 5 дней с использованием анализа Cell Titer Glo (Promega) для указанных линий клеток. Среднее ± среднеквадратичное отклонение. ( n = 4).* P <0,05. *** P <0,001 по тесту Стьюдента t .

Анализ содержания ДНК и числа копий ДНК в вариантах MDA-MB-231

Клетки MDA-MB-231 близки к триплоиду и демонстрируют трисомию большинства аутосом (Satya-Prakash et al., 1981). Для оценки потенциальной гетерогенности внутри каждой популяции, полученной из MDA-MB-231, с помощью проточной цитометрии проводили анализ клеточного цикла на асинхронно растущих немаркированных версиях четырех линий. 231_ATCC, 231_I (из которых было выделено 231_LNA) и 231_LM2 показали почти идентичное содержание ДНК и распределение клеточного цикла, причем каждое из них указывает на гомогенные или почти гомогенные популяции (A-C).Напротив, родительские клетки 231_HM демонстрировали распределение клеточного цикла, указывающее на две различные клеточные популяции (D). Одна популяция имела идентичное содержание ДНК с тремя другими линиями (что составляло 42% от общего числа), тогда как «анеуплоидная» фракция представляла большинство (58%) популяции. «Анеуплоидные» клетки показали 1,78-кратное увеличение общего содержания ДНК по сравнению с менее многочисленной фракцией. Это согласуется с дупликацией всего диплоидного генома в почти триплоидных родительских клетках MDA-MB-231, таким образом давая вероятную почти квинтаплоидную дочернюю линию.Для дальнейшего изучения этого были созданы клональные популяции родительских клеток 231_HM путем лимитирующего разведения и были охарактеризованы две дочерние линии. 231_HMcloneB2 показал распределение клеточного цикла, идентичное таковому у минорной фракции 231_HM и другим трем клеточным линиям (E). Напротив, 231_HMcloneC7 показал распределение, соответствующее гомогенной популяции основной почти квинтаплоидной популяции 231_HM (F). Эти результаты показывают, что каждая из двух значимых популяций 231_HM может существовать независимо друг от друга.Обе линии 231_HMcloneB2 и 231_HMcloneC7 были спонтанно метастатическими в легкие, печень и селезенку при анализе в модели ортотопической резекции in vivo (данные не показаны), что позволяет предположить, что агрессивная метастатическая способность не связана конкретно с плоидностью ДНК в модели 231_HM.

Анализ клеточного цикла и массива SNP четырех вариантов клеточной линии MDA-MB-231. (A-F) Указанные клеточные линии, полученные из MDA-MB-231, анализировали на распределение клеточного цикла с помощью проточной цитометрии.231_HMcloneB2 (E) и 231_HMcloneC7 (F) — две разные клональные дочерние линии, полученные из родительских клеток 231_HM (D). (G) Полногеномные паттерны увеличения числа копий ДНК (синий), потери (красный), потери гетерозиготности (желтый) и аллельного дисбаланса (фиолетовый), полученные из анализа массива SNP, изображены линейно для четырех указанных клеточных линий. Номер хромосомы указан вверху. Расположение гомозиготной делеции 9p21.3 , которая является общей для четырех клеточных линий, указано стрелкой.

Для определения вариаций числа копий ДНК (CNV) в четырех линиях, полученных из MDA-MB-231, к SNP была применена геномная ДНК из немаркированных версий клеточных линий (231_ATCC, 231_I, 231_LM2, 231_HM), культивированных in vitro массивы (G, рис. S5). Каждая линия показывала уникальный паттерн изменения числа копий ДНК, хотя также присутствовали общие области увеличения / потери и аллельный дисбаланс, включая общую гомозиготную делецию CDKN2A (кодирует p16 / INK4A и p14ARF) / CDKN2B (кодирует p15 / INK4B) / Локус MTAP в точке 9p21.3 (G, рис. S5). Высокий уровень (CNV log ₂ ratio≥1) амплификации ДНК не был обнаружен ни в одной линии (G, рис. S5). Путем анализа увеличения / уменьшения числа копий как общих, так и уникальных ДНК в геноме (таблица S2) была оценена генетическая дивергенция каждой линии из 231_ATCC. 231_LNA был наиболее похож на 231_ATCC (разница 15,2%), за ним следовало 231_LM2 (25,8%), причем 231_HM было наиболее различающимся (66,1%). Однако последний результат следует интерпретировать с осторожностью, поскольку массив SNP 231_HM представляет собой слияние двух разных анеуплоидных популяций.

Дифференциальная экспрессия генов среди вариантов MDA-MB-231

Чтобы определить фактор (факторы), лежащий в основе сильно различающихся метастатических возможностей четырех конгенных моделей, резецированные первичные опухоли были дезагрегированы, общая РНК была выделена из изолированных раковых клеток (рис. S1). ) и цифровое секвенирование РНК (RNA-Seq) (Harrison et al., 2015). Согласованные паттерны дифференциальной экспрессии генов были обнаружены среди четырех вариантов MDA-MB-231 (). Анализ обогащения набора генов (GSEA) был проведен на данных RNA-Seq, чтобы установить клеточные процессы, которые были нарушены во всех трех метастатических линиях (231_LNA, 231_LM2, 231_HM.LNm5) по сравнению с неметастатической линией 231_ATCC (Subramanian et al., 2005) и, следовательно, может управлять метастатическим фенотипом. Примечательно, что из десяти наиболее значимо активированных наборов генов в метастатических клетках девять были связаны со сплайсингом и метаболизмом РНК или с биогенезом рибосом (Рис. S6). Чтобы расширить эти результаты, был опрошен набор данных рака молочной железы из Атласа генома рака (TCGA) (Koboldt et al., 2012). Сравнение небольших опухолей у пациентов со стадией I с первичными новообразованиями у пациентов со стадией заболевания II-IV показало, что каждый из девяти наборов данных, касающихся метаболизма РНК, также был значительно повышен в опухолях от пациентов с более поздней стадией и, следовательно, мог быть причинно вовлечен в прогрессирование рак груди человека ().Интересно, что также было обнаружено значительное подавление генов, участвующих в развитии и морфогенезе молочных желез (), возможно, указывая на то, что приобретение метастатической компетентности в вариантах MDA-MB-231 было связано с де-дифференцировкой. Одним из возможных объяснений результатов GSEA является то, что повышенная экспрессия генов биогенеза рибосом была отражением повышенной потребности в синтезе белка в более быстро пролиферирующих метастатических клетках по сравнению с клетками 231_ATCC (Orsolic et al., 2016; van Riggelen et al., 2010). Однако не было обнаружено никаких доказательств повышенной экспрессии каких-либо наборов генов, участвующих в пролиферации эпителиальных клеток в метастатических линиях (). Одним из процессов, который может повлиять на приобретение метастатической способности при раке молочной железы, является переход эпителия в мезенхиму (EMT), при котором более мезенхимальный фенотип может наделять раковые клетки способностью разрушать базальную мембрану и проникать в окружающие ткани (Chaffer et al. , 2016; Таубе и др., 2010). Чтобы проверить нарушение регуляции генов, относящихся к ЕМТ, GSEA проводили с использованием «основных генов ЕМТ», которые были активированы или подавлены после индукции ЕМП в эпителиальных клетках молочной железы человека (Taube et al., 2010). Набор эпителиальных генов, подавленных после индукции EMT, был значительно подавлен в трех метастатических моделях по сравнению с 231_ATCC (). Это предполагает, что, несмотря на то, что MDA-MB-231 обладает мезенхимальным или базальным B фенотипом (Lehmann et al., 2011; Neve et al., 2006), дальнейшее снижение уровней экспрессии эпителиальных генов связано с приобретением метастатического потенциала в Метастатические варианты, происходящие из MDA-MB-231. Существенных изменений в мезенхимальных генах, активируемых при индукции ЭМП, не обнаружено (данные не показаны).Для дальнейшего изучения этого аспекта были исследованы экспрессия и распределение ключевого эпителиального маркера (E-кадгерин) и ключевого мезенхимального маркера (виментина). МРНК E-кадгерина не была обнаружена в опухолевых клетках, полученных из MDA-MB-231, с помощью RNA-Seq, и белок E-кадгерин не присутствовал на стыках клеток ни в одной из четырех линий при оценке in vitro или in vivo (рис. S7B). МРНК виментина была в изобилии в опухолевых клетках каждой модели (данные не показаны), но не экспрессировалась дифференциально (рис.S7A). Картина окрашивания нитчатой цитоплазмы для виментина присутствовала в каждой из четырех клеточных линий in vitro , и сильное цитоплазматическое окрашивание было обнаружено в каждой линии in vivo (фиг. S7C). Все четыре модели опухолей были слабо положительными при применении антител к панцитокератину (СК) (распознающему СК1, СК5, СК6 и СК8) (фиг. S8). Кроме того, никаких различий в интенсивности или распределении окрашивания E-кадгерином или виментином не наблюдалось в двух клональных дочерних линиях 231_HM, 231_HMcloneC7 и 231_HMcloneB2 (рис.S9). Вместе эти данные показывают, что каждая из четырех моделей обладает сильным мезенхимальным фенотипом.

Тепловая карта паттернов экспрессии генов опухолевых клеток среди ксенотрансплантатов молочной железы MDA-MB-231. Каждая строка представляет один ген. Строки были сгруппированы по сходству (евклидово расстояние). Только гены с более чем двукратным изменением (log ₂-кратное изменение ≤ −1 или ≥1) в уровне экспрессии по сравнению с неметастатическими опухолевыми клетками 231_ATCC ( n = 2) и средним числом транскриптов секвенирования ≥30, являются показано.231_LNA ( n = 6), 231_LM2 ( n = 6), 231_HM.LNm5 ( n = 6). Полный набор данных по дифференциально экспрессируемым генам представлен в таблице S3.

Таблица 1.

Анализ обогащения набора генов (GSEA) данных экспрессии RNA-Seq

Также наблюдалась дисрегуляция отдельных генов в четырех моделях, и некоторые из них можно было сгруппировать в широкие категории или семейства (). Мы сосредоточились на двух моделях измененной экспрессии генов (Nguyen et al., 2009). Сначала мы исследовали транскрипты, экспрессия которых была нарушена во всех метастатических моделях, по сравнению с неметастатическими первичными опухолевыми клетками 231_ATCC. В этом контексте гены с повышенной регуляцией были обозначены как гены инициации метастазирования и, наоборот, гены с пониженной регуляцией были обозначены как гены супрессии метастазов (таблицы S3-S4, фиг. S10). Аналогичным образом, мРНК с повышенной экспрессией, специфичной для высокометастатических клеток 231_HM.LNm5 по сравнению с тремя другими моделями, были помечены как гены вирулентности метастазирования, тогда как соответствующие гены с пониженной регуляцией были классифицированы как гены авирулентности метастазов (таблицы S3-S4, рис.S10).

Таблица 2.

Дифференциальная экспрессия генов среди четырех моделей опухолей, полученных из MDA-MB-231

Классы молекул с подтвержденной ролью в прогрессировании опухоли были нарушены (). Цистеиновая протеиназа катепсин C [ CTSC (Ruffell et al., 2013)] была активирована во всех трех метастатических моделях, тогда как несколько генов цистатина типа 2, ингибиторов цистеиновых протеиназ, были подавлены в каждой (Ai et al., 2006; Кокс, 2009). Костные морфогенетические белки BMP2 и BMP4 были нарушены. BMP2 , способствующий инвазии и прогрессированию клеток рака молочной железы MCF-7 (Clement et al., 2005), был значительно повышен во всех трех метастатических линиях, тогда как ген супрессора метастазов рака молочной железы BMP4 (Cao et al. , 2014) подавлялась в каждом из трех вариантов (). Экспрессия BMPRIA , который кодирует предпочтительный рецептор как для BMP2, так и для BMP4, не изменилась (данные не показаны). Интересно, что также была отмечена измененная экспрессия кластеров генов.Металлотионеины участвуют в клеточном метаболизме ионов металлов (Dziegiel et al., 2016). Четыре гена из кластера металлотионеина на хромосоме 16q13 человека ( MT1A , MT1E , MT1M , MT2A ) были сверхэкспрессированы только в опухолях 231_HM.LNm5 (), что поместило их в категорию метастатической вирулентности (таблица). . Точно так же три гена из локуса коллагена на 21q22 ( COL6A1 , COL6A2 , COL18A1 ) специфически репрессировались в 231_HM.LNm5. Однако цистатины 2 типа ( CST1 , CST2 , CST4 ) и псевдоген цистатина CSTP1 , все кодируемые кластером генов на 20p11, были подавлены в трех метастатических моделях по сравнению с неметастатическим 231_ATCC. Кроме того, CST6 , родственный ген цистатина 2 типа, расположенный на другой хромосоме, был сильно репрессирован в каждой из трех метастатических линий ().

Шао и его коллеги ранее сообщали об увеличении ангиогенеза в первичных ксенотрансплантатах MDA-MB-231HM по сравнению с опухолями, образованными родительской линией MDA-MB-231, как было определено окрашиванием для определения плотности микрососудов и микроангиографией (Jin et al., 2012), и наши результаты согласуются с этим (данные не показаны). Чтобы определить, может ли гипоксия играть роль в усилении неоангиогенеза в первичных опухолях 231_HM.LNm5, данные RNA-Seq были проанализированы на предмет проангиогенных факторов, индуцированных гипоксией. Удивительно, но средний уровень экспрессии ключевого гена, способствующего ангиогенезу, VEGFA (Ferrara, 2002), был самым низким в опухолевых клетках 231_HM.LNm5 и значительно ниже, чем в неметастатических клетках 231_ATCC (фиг. S11Ai). Аналогичным образом, средние уровни гипоксически-чувствительной карбоангидразы 9 ( CA9 ) также были самыми низкими в 231_HM.LNm5 (рис. S11Aii). In vitro эксперименты показали умеренное повышение экспрессии мРНК VEGFA в клетках 231_ATCC после воздействия на клетки 1% кислорода в течение 6 или 24 часов, и эта индукция была ослаблена в клетках 231_HM.LNm5 (рис. S11B). Это предполагает, что другие факторы в дополнение к VEGFA могут способствовать интенсивному ангиогенезу в первичных ксенотрансплантатах 231_HM.LNm5.

Другим процессом, который увеличивает кровоснабжение опухоли, является мимикрия сосудов, при которой раковые клетки трансдифференцируются в эндотелиально-подобные клетки с образованием трубчатых структур, несущих кровь, которые могут снимать гипоксию, а также способствовать метастазированию на моделях мышей (Seftor et al., 2012; Wagenblast et al., 2015). Три гена, которые вносят вклад в мимикрию сосудов, эндоглин ( ENG ; компонент рецепторного комплекса трансформирующего фактора роста бета на эндотелиальных клетках), TIE1 (кодирует ключевой ангиогенный рецептор) и антикоагулянт, способствующий развитию сосудистой сети SERPINE2 (Wagenblast et al., 2015), все были активированы в метастатических клетках (). Следует отметить, что эндоглин способен связывать BMP-2 путем взаимодействия с лиганд-связывающими рецепторами BMP типа I ALK3 (BMPRIA) и ALK6 (BMPRIB) (Barbara et al., 1999), но формируют ли эктопически активированные BMP2 и ENG функциональный рецепторный комплекс в метастатических вариантах MDA-MB-231, остается выяснить. Таким образом, васкулогенная мимикрия является возможным явлением, способствующим прогрессированию опухоли, но требуется дальнейшая оценка, чтобы подтвердить ее присутствие и потенциальную роль в гематогенном метастазировании вариантов MDA-MB-231. Наконец, в четырех опухолях была нарушена регуляция нескольких генов, кодирующих ионные каналы (). Экспрессия потенциал-управляемых калиевых каналов KCNU1, KCNQ3 и KCNAB2 была увеличена в высокометастатических линиях, тогда как SCNN1A , кодирующем альфа-субъединицу главного эпителиального натриевого канала (не-потенциал-зависимого) и регулируемого глюкокортикоидами (Fietz et al. ., 2017), подавлялся во всех трех метастатических опухолях и является кандидатом в ген супрессора метастазов (). Хемокиновый лиганд-2 (CCL2) с мотивом C-C способствует метастазированию рака молочной железы посредством взаимодействия с его рецептором CCR2 на макрофагах (Kitamura et al., 2015). CCL2 Уровни мРНК были по крайней мере в четыре раза выше в клетках первичной опухоли 231_HM.LNm5 по сравнению с тремя другими линиями (). Кроме того, секретируемый белок CCL2 не обнаруживался в 3D-культурах 231_ATCC, 231_LNA и 231_LM2 in vitro , но надежно экспрессировался 231_HM.Клетки LNm5 (данные не показаны). Интересно, что работа Канга и Лу показала, что эктопическая экспрессия CCL2 в клетках 231_LM2 усиливает экспериментальные метастазы в легкие посредством рекрутирования способствующих опухолям макрофагов легких, которые проявляют его родственный рецептор CCR2 (Lu and Kang, 2009). Действительно, нацеливание на ось CCL2-CCR2 оценивается для терапии рака молочной железы, хотя недавние открытия предполагают, что модуляция этого пути может привести к нежелательным нежелательным последствиям у пациентов (Bonapace et al., 2014).

Метилирование гена связано с приобретением агрессивной метастатической способности.

Поскольку устойчивые изменения в экспрессии генов были очевидны во всех четырех моделях опухолей из данных RNA-Seq, было проведено предварительное исследование механизмов, лежащих в основе этих различий. CNV генов вряд ли лежат в основе наблюдаемых существенных различий в экспрессии генов, поскольку амплификации высокого уровня и гомозиготные делеции отсутствовали во всех линиях, за исключением делеции 9p21.3 ( CDKN2A / B ), который наблюдался во всех четырех клеточных линиях (G). Изменения в метилировании промотора связаны с увеличением метастатического потенциала при раке молочной железы (Fang et al., 2011), поэтому мы исследовали, может ли метилирование ДНК быть альтернативным объяснением заметного подавления выбранных генов в опухолевых клетках 231_HM.LNm5 с помощью ДНК. деметилирующие агенты и ингибиторы гистондеацетилазы (Cameron et al., 1999). И BMP4 , и CST6 являются генами подавления метастазов, подавляющими активность в 231_HM.Опухолевые клетки LNm5 по сравнению с неметастатическими опухолевыми клетками 231_ATCC (), и оба содержат островки CpG, охватывающие их сайты начала транскрипции в их 5′-проксимальных областях (A, D). Подавление уровней BMP4 (B) и CST6 (E) в клетках 231_HM.LNm5 по сравнению с клетками 231_ATCC сохранялось в 2D-культуре, что позволяет предположить, что механизмы, лежащие в основе подавления, являются внутренними для раковых клеток. Обработка деметилирующим агентом 5-аза-2′-дезоксицитидин (5azadC) приводила к умеренной двух-трехкратной индукции мРНК BMP4 в 231_HM.Клетки LNm5, но без индукции в клетках 231_ATCC (C). Ингибитор гистондеацетилазы (HDAC) трихостатин А (TSA) вызывал лишь незначительное увеличение (от 1,3 до 1,5 раз) уровней мРНК BMP4 в обеих клеточных линиях, показывая, что ацетилирование гистонов само по себе не отвечает за молчание BMP4 в 231_HM.LNm5 ячеек. Совместное введение TSA и 5azadC привело к дальнейшему увеличению (в 4,4 раза) экспрессии BMP4, особенно в клетках 231_HM.LNm5. Обработка 5azadC приводила к заметному увеличению в 27–34 раза уровней мРНК CST6 в 231_HM.Клетки LNm5, но без увеличения ячеек 231_ATCC (F). Как было обнаружено для BMP4, обработка TSA лишь незначительно (в 1,6–1,8 раза) усиливала экспрессию CST6 в обеих линиях. Совместная обработка TSA и 5azadC увеличивала мРНК CST6 в 43 раза в клетках 231_HM.LNm5, но снова не оказывала эффекта на клетки 231_ATCC.

Анализ уровней мРНК BMP4 и CST6 после лечения деметилирующим агентом и ингибитором гистондеацетилазы. (A) Островок CpG (506 п.н.) охватывает сайт начала транскрипции гена BMP4 человека.(B) Относительные уровни мРНК BMP4 и в клетках 231_ATCC и 231_HM.LNm5, обработанных носителем (DMSO), с помощью TaqMan qRT-PCR. Экспрессия в 231_ATCC была установлена на 1. Среднее ± стандартное отклонение. ( п = 3). (C) TaqMan qRT-PCR анализ уровней экспрессии мРНК BMP4 и в клетках 231_ATCC и 231_HM.LNm5, обработанных 5-аза-2′-дезоксицитидином (5azadC) и трихостатином A (TSA). Экспрессия в клетках, обработанных носителем, была установлена на 1. Среднее ± стандартное отклонение. ( п = 3). (D) Островок CpG (370 п.н.) охватывает сайт начала транскрипции гена CST6 человека.(E) Относительные уровни мРНК CST6 и в клетках 231_ATCC и 231_HM.LNm5, обработанных носителем (DMSO), с помощью TaqMan qRT-PCR. Экспрессия в 231_ATCC была установлена на 1. Среднее ± стандартное отклонение. ( п = 3). (F) TaqMan qRT-PCR анализ уровней экспрессии мРНК CST6 в обработанных 5azadC и TSA клетках 231_ATCC и 231_HM.LNm5. Экспрессия в клетках, обработанных носителем, была установлена на 1. Среднее ± стандартное отклонение. ( п = 3).

Вместе эти данные указывают на то, что ключевые CpG-островки BMP4 и CST6 , охватывающие их сайты начала транскрипции, не метилированы в клетках 231_ATCC, а также предполагают возможное низкоуровневое метилирование BMP4 и устойчивое метилирование CST6. в 231_HM.LNm5, хотя для окончательного ответа на этот вопрос необходима прямая оценка метилирования CpG-островков. Работа других ученых показала, что метилирование CST6 связано с худшим прогнозом для пациентов с раком груди (Kioulafa et al., 2009), тогда как кодируемый белок (цистатин M) подавлял пролиферацию, подвижность и метастазирование клеток рака груди (Zhang et al. , 2004). BMP4 также было показано метилированным при раке груди (Hartmann et al., 2009). Интересно, что метилирование CpG-островков также было связано с EMT в модели линии клеток рака молочной железы человека (Carmona et al., 2014), и поэтому может способствовать подавлению эпителиальных генов, наблюдаемых в трех метастатических вариантах MDA-MB-231 по сравнению с 231_ATCC ().

Деловые звезды из биологии. Деловые звезды из биологии Ok google gds biology

Помагал бо всакему студенту при придобитви оцен ГДЗ в деловом звезде из биологии 9. Разред Пасечник В.В. Ne zaveda se vsak učenec, da je celotno njegovo prihodnje življenje odvisno od kakovosti šolanja. Вечерний отрок в младостниковом районе 11.разред кот долготрайно казен. Pravzaprav način, kako se človek pokaže v določenem obdobju, močno vpliva na njegovo prihodnjo kariero. E se obrnemo na statistiko, lahko vidimo nekaj zelo zanimivih dejstev. Tako vsa proračunska mesta na prestižnih univerzah v državi zasedajo odlični študentje in veliko manj pogosto dobri študentje. Dobijo rdečoiplomo in se z njo odpravijo na delo na prestižne položaje в великих подводных али владних агенциях. Mnogi celo začnejo svoje, previous uspešno, podjetje.To je lastica dejstva, da so ti ljudje eni najbolj schemeliniranih, delavnih in odgovornih: nikoli ne obupajo na pol poti. Poleg tega, da imate odličen certifikat, obstajajo nekatere vrste Bonusov:

Pobegnejo z zamujenimi urami in nenapisanimi preizkusi. To je lastica dejstva, da se učitelji dobro zavedajo, da lahko nadomestijo vse zamujeno gradivo.
Практично не ведо, кай е тестно навдушенье. Hladna inteligenca, возможность создать в критических ситуациях так, что научили изкушен обискованя шестивильных олимпийских игр в текмован.Sodelovanje pri njih lahko na univerzi prinese tudi dobre bonuse: na primer povečano štipendijo ali štipendije.
Skoraj vsak si želi biti prijatelj z njimi, tk. на testu lahko goljufajo. Мед врстники уже давно авторитето.

Как премагаты тезаве с биологическим природником за деловыми звездами за 9. Разред из пасечника

e želite dosči ta položaj, morate poskusiti. Tako je učenec dolžan obiskovati allako uro, izvajati katero koli vajo — le tako se bo obvladal delovni program.Pomembno je, da rightčasno odpravimo vrzeli v znanju. Na primer, pogosto nastanejo pri temi, kot je algebra. Kraljica znanosti ne prenaša pozabljenih pravil — vsega se je treba naučiti na pamet. Vendar tega ni treba storiti — dovolj je le odpreti GDZ z uporabo učbenika Pasechnik V.V. ФГОС за 9. Разред на сплету. V Решебник из биологии за 9. разред, деловые звезды, авторы: В.В. Пасечник, Г. Швецов tukaj je:

Правила одговори на полюбно штевило.
Подробне решитве налог.
Obstajajo tudi zaključeni testi.

Деловые звезды je sestavni del изобразительно-metodičnega sklopa serije «Življenjska linija» za 5-6 razred, ki ga je uredil V. V. Pasechnik, in je namenjen učencem, kiben vrikovjöjo.
Структура создания устойчивости темы структуры учёбы »Биология. 5-6 разредов «во всем различна впрашаня в налоге, наменень вадби шестивильных потребителей вещин. Прирочник все туди налоге за надзор, ки вам бодо помагале, да се болье приправа зыць на преиздание.
Priročnik je namenjen učencem za samostojno delo doma ali v razredu.

Beležnica je dodatek učbeniku В. В. Пасечника »Биология. Бактерие, глайв, растлайн. Рейтинг клиентов 5». Učbenik JE v skladu г zveznim državnim izobraževalnim standardom osnovnega splošnega izobraževanja. Učno gradivo Poleg zvezka vključuje elektronsko prijavo, metodološki priročnik в delovni программе.
Beležnica vsebuje različna reproduktivna в ustvarjalna vprašanja в naloge, vključno v obliki laboratorijskih дель, kognitivnih nalog , табличек, диаграмм, рисб в терминологических крижанках.В звездку со туди тестне налоге, ки бодо студентом помагале при приправы на успешно исправлен изпит в државни изпит.
Naloge, namenjene Oblikovanju veščin metapredmetov (načrtovanje dejavnosti, izpostavljanje različnih znakov, primerjava, razvrščanje итд.) В особым образом ласти ученцв так означены с посеб.

Пренезит в преберите Biologija, Bakterije, Gobe, Rastline, 5. razred, Деловые звезды, Пасечник В.В., 2015

Предлагаемый Звезек Же дель Изобразевальнега Комплекса За Учбеник Н.в. Сонина »Биология. Živi organizationm. 6. Разред «. Налоге за обликование метапредметных вещей (начальное действие, указание различных знаков, примерное, развернутое и т. Д.) В осебне последних событий, на которых изображено 15 знаков, находится в зоне действия. поглава е наслов «Налоге за успех», катерега впрашаня со сэставлена в облики в об упоштеваню захтев Енотнега државнега изпита.
Učbenik je v skladu z (Zvezni izobraževalni standard osnovnega splošnega izobraževanja. Učno gradivo poleg zvezka vključuje tudi elektronsko prijavo, metodični priročnik in delovni elektronko prijavo, pozitemislés.

. pestiče (z jajčnikom, stebrom in stigmo) в vsak del rože pobarvajte z eno barvo (na primer skodelice so zelene, venci rumeni, itd.).

Prenesite in preberite Biologija, živi organizationm, 6.razred, delovni zvezek za učbenik Сонин Н.И. «Биология, живиорганизм, 6. разред», Сонин Н.И., 2014

Деловые звезды, которые я хотел бы развить за учеником «Основы сплошной биологии» за учётом 9. Разреда (ур. И. Н. Пономарев, О. А. Корнилова, Н. М. Чернов). В нём понужен налоге, ки имао другочно спознавно в изображево нараво, устраняйо именаним одделком в одставком учбеника. Učitelju bodo omogočili organiranje diferenciranega praktičnega dela devetošolcev, učencem pa pridobivanje kakovostnega znanja iz splošne biologije.

Пренезит в преберите Biologija, 9. razred, Delovni zvezek, T.A. Козлова, В. Кучменко, 2013

Предлагаемые звезды для изображения изображений за учеником В.Б. Захаров, Н.И. Сонин «Биология. Разноликость живых организаций «. Включающая различная встреча, налоге, лабораторное дело.
Градиво в звезку я разпорочено в истем запоредью кот в учбенику. Дело з звездком бо ученцем помагало больше усвоить всебино учбеника в себе приправити на успешное исправление изпита в државне изпитне агенство с упорабо тестовых налогов, включенных в деловые звезды.

Пренезит в преберите Биология, Разноликость живых организаций, 7. Разред, Деловые звезды, Захаров В.Б., Сонин Н.И., 2014

Деловые звезды и додатек учёным В.Б. Захарова, С.Г. Мамонтова, Н.И. Сонина, Э.Т. Захарова „Биология. Splošna biologija. Raven profila, razred 10 «в» Biologija, Splošna biologija. Ворон профила. Razred 11 «.

Delovni zvezek bo omogočil boljšo asimilacijo” за sistematizacijo in utrjevanje znanja, pridobljenega pri preučevanju gradiva učbenika.

Na koncu zvezka so «Naloge za usposabljanje», sestavljene v Obliki in ob upoštevanju zahtev izpita, ki bodo študentom pomagale bolje usvojiti vsebino predmeta.

Закажи учителя припуска решебников? Kaj GDZ — spletna goljufija ali nepogrešljivo orodje za učenje? На та в другом впрашанья Лахко ученци в njihovi starši preprosto odgovorijo, saj so prejeli praktično izdajo.
Деловые звезды со стороны воли кот учинковит учни припомочек.Didaktični kompleksi-delavnice so dnevni arzenal učitelja, spretnega mentorja za učenca in priročnik za starše, ki so pozabili na šolski učni načrt. Разположенность приправленных одговоров ниич другега кот «водильная нить» за все от категорий.
За приправо домашних налогов в 9. Разреду е припорочиво упоработить прирочник, ки га е сставил В.В. Пасечник, Г. Швецов. Автор sta si po svojih najboljših močeh prizadevala zagotoviti, da bodo v publikaciji vsi našli need in koristno:
— učitelji — kompleks za usposabljanje pri pouku;
— šolar — orodje za brušenje znanja;
— starši — можно превратить домашние налоги.
Pouk biologije v 9. razredu zajema obsežno izobraževalno gradient: od molkularne teorije do Evolucijskih hipotez. Šolarji ne samo, da še naprej raziskujejo svet, ampak se tudi seznanijo z osnovami raziskujejo dejavnosti.
GDZ — к тому приложению за утрдитев дополнительной информации в разреду, нихово упорабо в практике в предотвращении дополнительных результатов. Правилен пристоп к упора решебника бо принесел разум, напачен пристоп бо тежаве послабшал. Izbira je vaša!

Biologija za devetošolce: učinkoviti delovni zvezki in issueske knjige

Dohitevanje delovni zvezek pri biologiji za 9.razred, ki sta jo sestavila V.V. Пасечник в Г. Shvetsov in jo objavila založba Drofa, bodo študentje dobili popolno in poglobljeno, praktično razumevanje takšnih odsekov in tem predmeta, kot so:
— vloga in mesto biologije v sistemu razosostih meznozos;
— temeljni pojmi in načela celične znanosti — citologija, celične teorije in kemična sestava glavnega elementa vseh živih organmov na planetu, sizes, ki se pojavljajo v celicah — presnova, biosinteza other beljakov;
— понятие организаций, нжихов индивидуальной развой в размножении, методе значильности процедур;
— genetika, njeni vzorci в облике, teorije в njihovo praktično preverjanje.
Z Упорабо посэбне решитве прирочника бодо деветошолси лахко самостойно, в своем темпе в на подлаги своих налогов в Цильеве, приправили учинковить деловые начала в дозгли тисто, кар си желио. To načrtovanje dela z GDZ mora lagati:
— ocenjevanje osnovne stopnje znanja študenta;
— результат, ки га с таким делом жели дозечи — удележба в змага на олимпийских играх при предмете, избранное трэнутнега в конце результата из биологии, приправа на тележке;
-samokontrola in samopreverjanje dosžkov, prepoznavanje in rightčasno odpravljanje nastalih pomanjkljivosti, odpravljanje težav, prilagajanje načrtov.
Devetošolci lahko delajo s pomočjo zbirk že pripravljenih domačih nalog sami ali s pomočjo specialistov-mentorjev in voditeljev pripravljalnih tečajev in krožkov iz biologije. Друга помембна преданность техник е ненехно упоштеванье начела правильного содержания результатов. Погосто правильно прейет, а напачно приказан одговор воды до зманишанья результатов, на текмованых, олимпийских игр в подобных догодких па до изгубе награднега места, изгубе. Редно дело с приправленными домашними налогами вам бо омогочило, да се знебите такшнега твеганя, главна ствар е, да бодите позорни не ле на одлочитев, ампак туди на писанье результатов.
Zbirko priporočajo številni stkovnjaki in specialisti, pogosto jo uporabljajoiplomati enajstega razreda, ki se pripravljajo naizpit iz biologije, da pregledajo zapleteno in the obsežve grateivo.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

55-е ежегодное собрание ACNP: стендовая сессия II

Шиничиро Накадзима *, Юсуке Ивата, Эрик Плитман, Джун Ку Чунг, Филип Герретсен, Ванна Мар, Винченцо де Лука, Гэри Ремингтон, Ариэль Графф-Герреро

Центр наркологии и психического здоровья , Tokyo, Japan

Предпосылки: Предполагается, что ответ на клозапин является маркером, по которому пациенты с шизофренией могут быть разделены на биологически отдельные подгруппы.Хотя когнитивные нарушения являются основным симптомом шизофрении, лишь несколько исследований изучали взаимосвязь между когнитивной функцией и ответом на клозапин у пациентов с устойчивой к лечению шизофренией.

Методы: В настоящее исследование включены 16 пациентов с шизофренией / шизоаффективным расстройством, которые ответили на клозапин (возраст: 43,2 ± 11,9 года; женщины 37,5%), 19 пациентов, которые не ответили на клозапин (возраст: 44,6 ± 11,3 года; женщины 26,3%) и 19 здоровых людей из контрольной группы (возраст 44.1 ± 12,5 года; женщины 31,6%). Участники были сопоставлены по возрасту и полу. Были проведены следующие когнитивные оценки: собеседование с руководителем (EXIT), постукивание пальцами (FT), рифленая доска (GP), беглость письма (F, A и S) (LF), интервал между буквами и цифрами (LNS), мини-ментальный Экзамен по статусу (MMSE), повторяемая батарея для оценки нейропсихологического статуса (RBANS), тест Струпа (тесты по цвету и цветному слову), тест на построение следа A и B (TMT) и тест Векслера по чтению взрослых (WTAR). Когнитивные функции сравнивали среди респондентов, не ответивших и здоровых людей из контрольной группы с использованием дисперсионного анализа.Тесты со связанным значением p менее 0,0022 (0,05 / 23) считались значимыми. Если между ними была значительная разница, проводились апостериорные тесты Тьюки. Апостериорные тесты со связанным значением p менее 0,0038 (0,05 / 13) считались значимыми, поскольку было 13 когнитивных областей, в которых были обнаружены значимые различия между 3 группами.

Результаты: баллы PANSS по общей, положительной подшкале и глобальной подшкале были выше у не ответивших, чем у респондентов (t (33) = 4.7, p <0,001; t (33) = 6,1, p <0,001; t (33) = 4,2, p <0,001, соответственно), при этом не было обнаружено различий в дозе клозапина между группами (t (33) = 0,90, p = 0,38).

Значительные различия были обнаружены в оценках областей WTAR, EXIT, RBANS Immediate Memory, Visuospatial / Construction, Language, Attention и Delayed Memory, GP (доминантные и недоминантные руки), LF F test, LNS, Stroop Color- Словесные тесты и TMT B среди 3 групп (F (2, 46) = 9.62, стр. <0,001; F (2, 51) = 27,09, p = <0,001; F (2, 51) = 10,99, p <0,001; F (2, 51) = 8,62, p = 0,001; F (2, 50) = 37,71, p <0,001; F (2, 50) = 15,14, p <0,001; F (2, 50) = 15,71, p <0,001; F (2, 50) = 9,00, p <0,001; F (2, 50) = 8,31, p = 0,001; F (2, 44) = 12,88, p <0,001; F (2, 49) = 12,45, p <0,001; F (2, 51) = 18,06, p <0,001 соответственно). Не было обнаружено различий в оценках MMSE, FT (доминантные и недоминантные руки), LF A и S, тесте Stroop Color и TMT A (F (2, 50) = 0.11, p = 0,90; F (2, 51) = 4,76, p = 0,04; F (2, 51) = 4,77, p = 0,01; F (2, 50) = 4,75, p = 0,01; F (2, 50) = 2,84, p = 0,07; F (2, 50) = 1,44, p = 0,25, F (2, 51) = 6,52, p = 0,003, соответственно), а также отношения баллов тестов Stroop Color и Color-Word, а также TMT A и B (F (2, 43) = 4,42, p = 0,02; F (2, 51) = 5,38, p = 0,008, соответственно).

Среди этих 13 доменов не было домена, в котором было бы обнаружено различие между респондентами и не отвечающими.Результаты тестов WTAR, EXIT, RBANS Language domain, LF F и Stroop Color-Word у не ответивших были ниже, чем у здоровых людей из контрольной группы, без каких-либо существенных различий среди других сравнений ( p <0,001; p <0,001; p <0,001; p = 0,001; p <0,001 соответственно). И респонденты, и не отвечающие показали значительно худшие результаты, чем здоровые люди из контрольной группы по шкале RBANS Total, Immediate Memory, Visuospatial / Constructional, Attention и Delayed Memory, GP (доминантные и недоминантные руки), LNS и TMT B без каких-либо значимых различия между респондентами и неответчиками ( p <.001 и p <0,001; p <0,001 и p <0,001; p = 0,001 и p <0,001; p <0,001 и p <0,001; p = 0,002 и p <0,001; p = 0,002 и p <0,001; p = 0,003 и p = 0,001; p <0,001 и p <0,001; p <0,001 и p <0,001 соответственно).

Гдз по биологии пономарева 9: ГДЗ Биология 9 класс Пономарева, Корнилова, Чернова

ГДЗ Пономарева 9 – Telegraph

ГДЗ по биологии для 9 класса на 5.fun

Часто ищут

Гдз онлайн биология тетрадь 9 класс пономарева

Гдз по алгебре класс в двух учебниках а.г мордкович

Учебник по анатомии привес скачать бесплатно

Учебник английского языка для технических университетов и вузов гдз

▶▷▶▷ гдз по биологии 9 класс пономарева учебник проверь себя

Корнилова О. А.

▶▷▶ гдз биология пономарева учебник ответы на вопросы

Ответы по биологии 9 клас 2015

границ | В поисках сладкого пятна: глико-иммунные контрольные точки и γδ Т-клетки в целевой иммунотерапии

Введение

Гликозилирование во взаимодействии опухолевых клеток и иммунных клеток

Ось иммуномодуляции опухоли сиаловая кислота-сиглек

Ганглиозиды как часть опухоли «гликокод»

Биология и функция ганглиозидов-маркеров опухолей

TMG как терапевтические мишени

Потенциал γδ Т-клеток в нацеливании на «гликокод»

Распознавание антигена γδ Т-клетками

γδ Т-клетки, нацеленные на углеводы в опухолевых ганглиозидах

Терапевтическое нацеливание на γδ Т-клетки

CAR γδT клеточная терапия

Заключительные замечания

Авторские взносы

Финансирование

Конфликт интересов

Список литературы

Abstracts ‐ Posters — 2018 — Алкоголизм: клинические и экспериментальные исследования

Многоуровневые доказательства общего перехода Павлова от инструментария к инструментам при расстройстве, вызванном употреблением алкоголя

Биология диабетической невропатии | Запрос PDF

Функциональная и геномная характеристика модельной системы ксенотрансплантата для изучения метастазов при тройном отрицательном раке молочной железы

Характеристика спонтанного метастатического потенциала линий, полученных из MDA-MB-231

Анализ содержания ДНК и числа копий ДНК в вариантах MDA-MB-231

Дифференциальная экспрессия генов среди вариантов MDA-MB-231

Таблица 1.

Таблица 2.

Метилирование гена связано с приобретением агрессивной метастатической способности.

Деловые звезды из биологии. Деловые звезды из биологии Ok google gds biology

Как премагаты тезаве с биологическим природником за деловыми звездами за 9. Разред из пасечника

Biologija za devetošolce: učinkoviti delovni zvezki in issueske knjige

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Что сохраняется в файле cookie?

55-е ежегодное собрание ACNP: стендовая сессия II

Шиничиро Накадзима *, Юсуке Ивата, Эрик Плитман, Джун Ку Чунг, Филип Герретсен, Ванна Мар, Винченцо де Лука, Гэри Ремингтон, Ариэль Графф-Герреро

Центр наркологии и психического здоровья , Tokyo, Japan

Добавить комментарий Отменить ответ